Articolo metodologico

Genotipizzazione rapida del tessuto mouse utilizzando Sigma Extract-N-Amp PCR Tissue Kit

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DOI:

10.3791/636

22 gennaio 2008

In questo articolo

Sommario

La genotipizzazione completa di un campione coda di topo, tra cui la digestione dei tessuti e la lettura della PCR, è fatto in un'ora e mezza con Sigma SYBR Green Extract-N-Amp PCR Tissue kit.

Abstract

Il rilevamento del DNA genomico tramite PCR e rivelazione su un gel elettroforesi è un metodo standard che il genotipo di un campione di tessuto è determinata. La preparazione tradizionale dei tessuti per PCR-ready DNA spesso richiedere diverse ore o giorni, a seconda del campione di tessuto. Il genotipo del campione può quindi essere ritardata per diversi giorni, che non è un'opzione per i diversi tipi di esperimenti. Qui mostriamo la genotipizzazione completa di un campione coda di topo, tra cui la digestione dei tessuti e la lettura di PCR, in un'ora e mezza con Sigma SYBR Green Extract-N-Amp PCR Tissue kit. In primo luogo, dimostriamo i quindici minuti di estrazione del DNA dal campione di tessuto. Poi, dimostriamo il tempo reale lettura della amplificazione del campione, che consente l'individuazione di un campione positivo in quanto è di essere amplificati. Insieme, la lettura rapida estrazione e in tempo reale permettono una immediata identificazione del genotipo di numerosi tipi differenti di tessuti attraverso il metodo affidabile di PCR.

Protocollo

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR KitKit di reagentiSigma-AldrichXNATGInclude: Soluzione di estrazione, Soluzione di neutralizzazione B, Soluzione di preparazione dei tessuti, Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

Ristampe e permessi

Tag

Genotipizzazione di tessuti muriniKit Extract N AmpEstrazione del DNAPCR in tempo realeAnalisi qPCRDigestione tissutaleKit SigmaAmplificazione PCRAnalisi della curva di fusioneProtocollo di genotipizzazione