Un team dedicato può offrire alle pazienti Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser la possibilità di eseguire la stimolazione ovarica controllata e la crioconservazione degli ovociti al momento della vaginoplastica laparoscopica.
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Articolo metodologico
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Un team dedicato può offrire alle pazienti Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser la possibilità di eseguire la stimolazione ovarica controllata e la crioconservazione degli ovociti al momento della vaginoplastica laparoscopica.
Nei pazienti con sindrome di Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser (MRKHS) che sono programmati per vaginoplastica laparoscopica e hanno un desiderio di maternità biologica, proponiamo che venga eseguito un concomitante prelievo laparoscopico degli ovociti per la crioconservazione. Il prelievo ovocitario viene effettuato all'inizio della laparoscopia. Vengono posizionati trocar destro e sinistro da 5 mm, attraverso i quali viene utilizzato un ago di aspirazione dell'ovulo da 17 G per la puntura delle ovaie destra e sinistra, rispettivamente. Per facilitare l'esposizione dei follicoli, le ovaie vengono mobilitate e trattenute con una pinza laparoscopica.
Quando si aspirano più follicoli vicini l'uno all'altro, la punta dell'ago viene trattenuta nell'ovaio per ridurre il numero di volte in cui la corteccia ovarica viene trafitta e a causa del rischio intrinseco di sanguinamento. I passaggi successivi sono invariati rispetto alla tecnica modificata laparoscopica Davydov per vaginoplastica. Prima dell'intervento chirurgico, la stimolazione ovarica controllata viene eseguita con un protocollo antagonista dell'ormone di rilascio dell'ormone gonadotropina (Gn-RH) e la procedura concomitante di prelievo degli ovociti e vaginoplastica è programmata 36 ore dopo il trigger finale della maturazione follicolare. Il liquido follicolare viene raccolto nelle stesse provette sterili da 10 ml utilizzate durante il prelievo transvaginale degli ovociti e trasferito in un blocco riscaldante (37 °C) al laboratorio di riproduzione assistita, dove gli ovociti maturi (metafase II) vengono vitrificati.
In questo caso, una serie di 23 donne con MRKH, ovociti sono stati recuperati con successo e crioconservati in tutte le pazienti; La vaginoplastica è stata successivamente condotta senza modifiche e le cure postoperatorie ospedaliere e ambulatoriali (giorno della rimozione del catetere urinario, giorno della dimissione ospedaliera, uso del dilatatore e comfort al follow-up) sono rimaste inalterate. Una complicanza postoperatoria si è verificata in un paziente (febbre che si è sviluppata il giorno 5 dopo l'intervento chirurgico e rilevamento del liquido intraperitoneale all'ecografia transaddominale) e si è risolta dopo un trattamento conservativo. Piuttosto che eseguire vaginoplastica chirurgica e ritardare il prelievo degli ovociti nei pazienti MRKH, questo approccio combina entrambe le procedure in un'unica laparoscopia, riducendo così al minimo l'invasività chirurgica e i rischi anestesiologici.
Con un'incidenza di circa 1 su 4-10.000 donne, MRKHS è la causa del 15% dei casi di amenorrea primaria. La MRKHS è caratterizzata dall'assenza congenita del segmento superiore della vagina e dell'utero, mentre le anomalie del tratto urinario e scheletrico sono associate in modo variabile. Più specificamente, di solito è presente una volta vaginale con una profondità di 1-2 cm e si possono trovare due corna uterine rudimentali1.
In passato, l'interesse medico primario nel MRKHS era quello di consentire un normale rapporto sessuale, che generalmente richiede la costruzione di una neovagina con approcci non chirurgici o....
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Il comitato etico locale presso il centro di riferimento terziario per MRKHS (IRCCS Ospedale Universitario San Raffaele, Milano, Italia) è stato informato e approvato il protocollo prima della sua attuazione nel luglio 2017. Tutti i pazienti o i tutori hanno dato il consenso informato firmato per il prelievo laparoscopico degli ovociti e la crioconservazione durante la vaginoplastica e per l'uso di dati clinici / di laboratorio anonimizzati per scopi scientifici.
1. Composizione del team
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La Tabella 2 include i dati di stimolazione ovarica delle pazienti, mentre i principali esiti chirurgici e funzionali sono descritti nella Tabella 3. Le procedure laparoscopiche concomitanti di prelievo degli ovociti e vaginoplastica sono state combinate con successo in tutte le pazienti. Sono stati recuperati in media 11,4 ± 5,4 (media ± DS) ovociti e 9,6 ± 4,3 ovociti MII sono stati crioconservati (Tabella 3). Nella nostra esperienza con la crioconservazione degli ovoc.......
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Questo protocollo riduce l'invasività nel trattamento della MRKHS combinando le procedure di vaginoplastica e recupero degli ovociti. A tal fine, è fondamentale che venga designato un team dedicato per garantire che i tempi della COS, la procedura chirurgica e la vitrificazione degli ovociti siano programmati in modo efficiente.
I pazienti MRKHS per i quali questo metodo laparoscopico combinato dovrebbe essere più vantaggioso sono quelli in cui un recupero transvaginale sarebbe considerato tec.......
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Gli autori non hanno alcun conflitto di interessi da rivelare.
Non sono stati ricevuti finanziamenti specifici per questo lavoro.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Procedura di recupero degli ovociti< | |||
| u>Equipment | |||
| CO2 O2 Incubatore | Sanyo | ||
| Thermo | Scientific | ||
| Cappa a flusso laminare | Cooper Surgical | ||
| Incubatrice portatile | Stereomicroscopio chirurgico | ||
| Nikon | |||
| Materiali di consumo | |||
| 14 mL di polistirene Tubo a fondo tondo | Falcon | 352057 | |
| Piastra a 4 pozzetti | Nunc | 144444 | |
| 60 mm Piastra Petri | Nunc | FA9150270 | |
| 90 mm Petri piatto | Nunc | FA9150360 | |
| Siero Umano Albumina 100 mg/ml in Soluzione Fisiologica (5%) | Origio | 3001 | |
| Olio minerale per coltura embrionale | Origio | 4008 | |
| One Well Dish | Oosafe | OOPW-CW05 | |
| Quinn' s Advantage Terreno di concimazione SAGE | Origio | 1020 | |
| Quinn' s Advantage medium con HEPES | Origio | 1024 | |
| Pipette sterili in vetro pasteur< | |||
| strong>Denudazione degli ovociti | |||
| Equipment | |||
| CO2 O2 Incubatrice | Sanyo | ||
| Flexipet manico regolabile set | Cook | G18674 | |
| Incubatore | Thermo Scientific | ||
| Cappa a flusso laminare | Stereomicroscopio chirurgico | ||
| Cooper Nikon | |||
| Consumabili | |||
| 4 pozzetti | piatto Nunc | 144444 | |
| CSCM (Coltura singola continua) mezzo | Fujifilm irvine Scientific | 90165 | |
| Albumina umana 100 mg/mL in soluzione salina normale (5%) | Origio | 3001 | |
| Hyaluronidase | Fujifilm Irvine Scientific | 90101 | |
| Coltura IVF Piastra di Petri da 60 mm | Nunc | FA9150270 | |
| Olio minerale per coltura embrionale | Origio | 4008 | |
| One Well Dish | Oosafe | OOPW-CW05 | |
| Quinn' s Advantage medium con HEPES | Origio | 1024 | |
| Integratore sostitutivo del siero | Fujifilm irvine Scientific | 99193 | |
| Pipette | |||
| Stripping puntali per pipette (140 μ m) | Cook | K-FPIP-1140-10BS-5 | |
| Stripping puntali per pipette (170 μ m) | Cook | K-FPIP-1170-10BS-5 | |
| Vitrificazione di ovociti | |||
| 35 mm Piastra di Petri | NUNC | 150255 | |
| 60 mm Piastra di Petri | NUNC | 150270 | |
| Piastra di Petri da 90 mm | NUNC | 150360 | |
| Contenitore per Rack di raffreddamento | Kitazato | ||
| Cryodevice/cryotop | Kitazato | 81111 | |
| Timer | |||
| Flexipet | COOK | K- 1000 | |
| Gilson Pipetman | Gilson F123601 | ||
| Stampante da laboratorio LabXpert | Brady | XSL-86-461 | |
| Punte 20-200 &; L | Thermo Scientific | 2160G | |
| Punte 2-20 &; L | Thermo Scientific | 2139-HR | |
| Visotubes | Cryo Bio System | 20 | |
| Kit di congelamento per vetrificazione | Fujifilm Irvine Scientific | 90133-SO | |
| Kit di disgelo per vetrificazione | Fujifilm Irvine Scientific | 90137-SO |
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