Per sviluppare nuovi interventi terapeutici per la prevenzione e la gestione del mal di schiena, sono necessari modelli animali per esaminare i meccanismi e l'efficacia di queste terapie da una prospettiva traslazionale. Il presente protocollo descrive il test BMS, un metodo standardizzato per valutare la sensibilità meccanica posteriore nel ratto.
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Articolo metodologico
Valutazione della sensibilità meccanica nel ratto per l'indagine meccanicistica del mal di schiena cronico
In questo articolo
Sommario
Abstract
La lombalgia è la principale causa di disabilità in tutto il mondo, con drammatiche conseguenze personali, economiche e sociali. Per sviluppare nuove terapie, sono necessari modelli animali per esaminare i meccanismi e l'efficacia delle nuove terapie da una prospettiva traslazionale. Diversi modelli di roditori di mal di schiena sono utilizzati nelle indagini attuali. Sorprendentemente, tuttavia, nessun test comportamentale standardizzato è stato convalidato per valutare la sensibilità meccanica nei modelli di mal di schiena. Questo è fondamentale per confermare che gli animali con presunto mal di schiena presentano ipersensibilità locale agli stimoli nocicettivi e per monitorare la sensibilità durante gli interventi progettati per alleviare il mal di schiena. L'obiettivo di questo studio è quello di stabilire un test semplice e accessibile per valutare la sensibilità meccanica nella parte posteriore dei ratti. Una gabbia di prova è stata fabbricata appositamente per questo metodo; lunghezza x larghezza x altezza: 50 x 20 x 7 cm, con una rete in acciaio inossidabile sulla parte superiore. Questa gabbia di prova consente l'applicazione di stimoli meccanici sulla schiena. Per eseguire il test, la parte posteriore dell'animale viene rasata nella regione di interesse e l'area di test è contrassegnata per ripetere il test in giorni diversi, se necessario. La soglia meccanica viene determinata con filamenti di Von Frey applicati ai muscoli paraspinali, utilizzando il metodo up-down descritto in precedenza. Le risposte positive includono (1) contrazioni muscolari, (2) inarcamento (estensione della schiena), (3) rotazione del collo (4) grattarsi o leccare la schiena e (5) fuggire. Questo test comportamentale (Back Mechanical Sensitivity (BMS) test) è utile per la ricerca meccanicistica con modelli di roditori di mal di schiena per lo sviluppo di interventi terapeutici per la prevenzione e la gestione del mal di schiena.
Introduzione
La lombalgia (LBP) è la principale causa di disabilità in tutto il mondo, che ha conseguenze personali, economiche e sociali drammatiche 1,2,3,4. Ogni anno, circa il 37% della popolazione è affetta da LBP5. Il LBP di solito si risolve entro poche settimane, ma si ripresenta nel 24% -33% degli individui, diventando cronico nel 5% -10% dei casi2. Per comprendere i meccanismi e gli impatti del LBP e gli effetti di diversi interventi terapeutici, sono stati utilizzati diversi modelli animali di LBP....
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Protocollo
Il protocollo sperimentale è stato approvato dal comitato per la cura degli animali dell'Université du Québec à Trois-Rivières ed è conforme alle linee guida del Canadian Council on Animal Care e alle linee guida del Committee for Research and Ethical Issues dell'International Association for the Study of Pain (IASP). Il presente studio ha utilizzato sei ratti Wistar maschi (peso corporeo: 320-450 g; età: 18-22 settimane). Gli animali sono stati ottenuti da una fonte commerciale (vedi Tabella dei materiali). I dati di questi ratti provengono dal campione più ampio di uno studio precedente30.
1.....
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Risultati
Il metodo è stato utilizzato in uno studio precedente, in cui sono stati presentati dati completi e statistiche per confrontare la sensibilità meccanica tra CFA e ratti di controllo30. I dati individuali rappresentativi (media delle soglie sinistra e destra) di sei ratti inclusi nello studio precedente sono presentati nella Figura 3 e nella Tabella 1. Al basale, la sensibilità meccanica era simile tra i gruppi. L'iniezione intramuscolare di CFA nei mu.......
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Discussione
Passaggi critici
Il test BMS è un metodo semplice per valutare la sensibilità meccanica nella parte posteriore dei ratti, in un momento o ripetutamente nel corso di giorni o settimane, quando si prevedono cambiamenti (modelli di dolore) o dopo un intervento farmacologico o non farmacologico. I problemi critici del metodo includono la gabbia di prova, le cui dimensioni devono garantire che il ratto sia comodo ma non si muova troppo. La schiena dell'animale deve rimanere accessibile attraverso il soffit.......
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Dichiarazioni
Gli autori non dichiarano interessi o relazioni concorrenti che possano portare a conflitti di interesse.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto da una sovvenzione della Fondation Chiropratique du Québec e del Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (MP: grant #06659). Il contributo di HK è stato sostenuto dall'Université du Québec à Trois-Rivières (programma PAIR). Il contributo di BP è stato sostenuto dal Fonds de recherche du Québec en Santé (FRQS) e dalla Fondation Chiropratique du Québec. Il contributo di TP è stato sostenuto dal Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada. Il contributo di NE ed EK è stato sostenuto dalla Fondation Chiropratique du Québec. Il contributo di MP è stato sostenuto dalla FRQS.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Aerrano (isoflurano, USP) - Solo per uso veterinario | Baxter | NDC 10019-773-60 | Anestetico per inalazione ; DIN 02225875, per indurre l'anestesia |
| Coadiuvante di Freund completo (CFA) | Fisher Scientific | #77140 | Emulsione acqua-in-olio di adiuvante di Freund completo (CFA) con cellule uccise di Mycobacterium butyricum. |
| Peso corporeo maschile Wistar Rats | Charles River Laboratories | 320– 450 g; Età: 18-22 settimane. | |
| Penlon Sigma Delta Vaporizzatore | Penlon | 990-VI5K-SVEEK | Penlon Sigma Delta Vaporizzatore utilizzato per anestesia |
| Sharpie Pennarello indelebile | Sharpie | BC23636 | Pennarello indelebile, Fine Point, nero |
| Gabbia di prova | Su misura | Larghezza: 20 cm; Lunghezza: 50 cm; Altezza dal basso verso l'alto: 40 cm; Altezza dalla maglia inferiore alla parte superiore della gabbia: 7 cm; Spessore della parete: 5 mm; Maglia: filo da 1 mm con una distanza tra i fili di 8 mm | |
| Von Frey Filaments | Aesthesio, Valutatore sensoriale tattile preciso | 514000-20C | Filamenti da 0,07 g a 26 g |
| Wahl Professional Animal, Tosatrice per animali domestici senza fili ARCO, Trimmer Grooming | Wahl | Kit #8786-1201 | Rifinitore per peli di animali, per la rasatura, lama zero |
Riferimenti
- Hartvigsen, J., et al. What low back pain is and why we need to pay attention. Lancet. 391 (10137), 2356-2367 (2018).
- Manchikanti, L., Singh, V., Falco, F. J., Benyamin, R. M., Hirsch, J. A. Epidemiology of low back pain in adults. Neuromodulation. 17, Suppl 2 3-10 (2014).
- Urits....
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Ristampe e permessi
