Il presente protocollo descrive la caratterizzazione ecocardiografica della morfologia e della funzione ventricolare destra in un modello di ratto di ipertensione arteriosa polmonare.
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Articolo metodologico
Valutazione ecocardiografica completa della funzione del ventricolo destro in un modello di ratto di ipertensione arteriosa polmonare
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'ipertensione arteriosa polmonare (PAH) è una malattia progressiva causata dalla vasocostrizione e dal rimodellamento delle piccole arterie nei polmoni. Questo rimodellamento porta ad un aumento della resistenza vascolare polmonare, a un peggioramento della funzione ventricolare destra e alla morte prematura. Le terapie attualmente approvate per la PAH mirano in gran parte alle vie vasodilatatorie polmonari; tuttavia, le recenti modalità terapeutiche emergenti si concentrano su altri nuovi percorsi coinvolti nella patogenesi della malattia, incluso il rimodellamento del ventricolo destro (RV). Le tecniche di imaging che consentono la valutazione longitudinale di nuove terapie sono molto utili per determinare l'efficacia di nuovi farmaci negli studi preclinici. L'ecocardiografia transtoracica non invasiva rimane l'approccio standard per valutare la funzione cardiaca ed è ampiamente utilizzata nei modelli di roditori. Tuttavia, la valutazione ecocardiografica del RV può essere difficile a causa della sua posizione anatomica e struttura. Inoltre, mancano linee guida standardizzate per l'ecocardiografia nei modelli preclinici di roditori, rendendo difficile effettuare una valutazione uniforme della funzione RV tra gli studi in diversi laboratori. Negli studi preclinici, il modello di danno monocrotalino (MCT) nei ratti è ampiamente utilizzato per valutare l'efficacia del farmaco per il trattamento della PAH. Questo protocollo descrive la valutazione ecocardiografica del RV in ratti PAH naïve e indotti da MCT.
Introduzione
La PAH è una malattia progressiva definita come una pressione arteriosa polmonare media a riposo superiore a 20 mmHg1. I cambiamenti patologici nella PAH includono il rimodellamento dell'arteria polmonare (PA), la vasocostrizione, l'infiammazione e l'attivazione e la proliferazione dei fibroblasti. Questi cambiamenti patologici portano ad un aumento della resistenza vascolare polmonare e, di conseguenza, al rimodellamento ventricolare destro, all'ipertrofia e al fallimento2. La PAH è una malattia complessa che coinvolge la diafonia tra diverse vie di segnalazione. I farmaci attualmente approvati per il trattamento della ....
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Protocollo
Tutti gli esperimenti in questo protocollo sono stati eseguiti seguendo le linee guida per la cura degli animali dell'Università dell'Illinois a Chicago, Chicago Institutional Animal Care and Use Committee. I ratti maschi di Sprague Dawley (SD) pesavano tra 0,200-0,240 kg al momento dell'iniezione di MCT; Tuttavia, il protocollo descritto in questo articolo può essere utilizzato con un intervallo di peso corporeo più ampio. Gli animali sono stati ottenuti da una fonte commerciale (vedi Tabella dei materiali).
1. Disegno dello studio
- Animali
- Ottenere ratti SD maschi e consentire loro di accl....
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Risultati
In questo studio, i ratti trattati con MCT sono stati utilizzati come modello di IPA. L'analisi ecocardiografica è stata eseguita il giorno di studio 23 dopo la somministrazione di MCT e tutte le misurazioni e i calcoli rappresentavano medie di tre cicli consecutivi. I parametri ecocardiografici ottenuti da ratti di controllo (veicolo: acqua deionizzata) e trattati con MCT (60 mg/kg) sono mostrati nella Tabella 1.
Le immagini rappresentative della vista PLAX nei ratti trattati.......
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Discussione
La valutazione ecocardiografica del RV è un prezioso strumento di scoperta per lo screening dell'efficacia di nuovi trattamenti in modelli animali di PAH. Una caratterizzazione approfondita della struttura e della funzione del RV è necessaria come nuovi bersagli nel trattamento del rimodellamento dei RV con indirizzo PAH 4,14. Questo studio descrive un protocollo dettagliato che consente la caratterizzazione di successo della struttura e della funzione del camper.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato da NHLBI K01 HL155241 e AHA CDA849387 assegnato all'autore P.C.R.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Iniezione di cloruro di sodio allo 0,9% USP | Baxter | 2B1324 | |
| Rotoli di cotone intrecciato | 4MD Medical Solutions RIHD201205 | ||
| Agente depilante | Wallgreens | Nair Hair Remover | |
| Elettrodo gel | Parker Laboratories | 15-60 | |
| Sistema di immagini ecografiche ad alta frequenza e stazione di imaging | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Vevo 2100 | |
| Isoflurano | MedVet | RXISO-250 | |
| Maschio sprague Dawley ratti | Charles River Laboratories | CD 001 | CD IGS Ratti (Crl:CD(SD)) |
| Monocrotalina (MCT) | Sigma-Aldrich | C2401 | |
| Sonda di temperatura rettale | Fisioterapia | RET-3 | |
| Camere di induzione sigillate | Scivena Scientific | RES644 | Taglia 3 L |
| Trasduttore a ultrasuoni array a stato solido | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Trasduttore Vevo MicroScan MS250S | |
| Calibri digitali in acciaio inossidabile Calibri | digitali VWR | 62379-531 | |
| Gel per ultrasuoni | Laboratori Parker | 11-08 | |
| Software Vevo Lab | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Versione 5.5.1 |
Riferimenti
- Galie, N., McLaughlin, V. V., Rubin, L. J., Simonneau, G. An overview of the 6th World Symposium on Pulmonary Hypertension. European Respiratory Journal. 53 (1), 1802148(2019).
- Tyagi, S., Batra, V. Novel therapeutic approaches of pulmonary arterial hyp....
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Ristampe e permessi
