A causa della complessa anatomia, un protocollo di dissezione e raccolta costantemente riproducibile per campioni cardiaci può essere difficile da implementare. Questo manoscritto presenta gli elementi chiave di alcuni protocolli standard di dissezione cardiaca, evidenziando sia gli approcci di esame grossolano che i siti di campionamento comunemente utilizzati per l'esame istopatologico.
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Articolo metodologico
Tecniche di dissezione e campionamento istologico del cuore in modelli animali di grandi dimensioni per malattie cardiovascolari
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'esame e il campionamento standard sono elementi chiave per la riproducibilità e il successo degli studi sperimentali sulle malattie cardiovascolari condotti su animali di grossa taglia. Considerando la complessa anatomia del cuore, le differenze interspecie e i tipi di reazioni compensative e patologiche, i protocolli coerenti sono difficili da implementare. L'utilizzo di protocolli di dissezione multipli è solitamente adattato per adattarsi all'esperienza del prosettore e le preferenze personali continuano ad essere una fonte di variabilità sperimentale e interosservatore. Qui, l'obiettivo è quello di presentare le principali caratteristiche anatomiche e punti di riferimento, i protocolli di dissezione e gli standard di campionamento istologico del cuore in alcune specie comunemente usate (tra cui cani, maiali, ruminanti e gatti) come modelli di malattie cardiovascolari.
Qui vengono presentati due protocolli standard di esame lordo. In primo luogo, il metodo di afflusso-deflusso, che segue la direzione fisiologica del flusso sanguigno attraverso il cuore e i grandi vasi (frequentemente usato in cani, ruminanti e maiali), e in secondo luogo, la tecnica di dissezione a quattro camere (esemplificata nei gatti). Entrambe le tecniche possono essere adattate a qualsiasi specie in determinate circostanze sperimentali. I protocolli di campionamento comprendono tutte le aree di interesse (nodo senoatriale, ventricoli, setto interventricolare, atri, valvole e aorta) e, se correttamente eseguiti, migliorano sia la riproducibilità che l'affidabilità degli studi sperimentali.
Introduzione
A causa della complessa anatomia e del rigore precoce, che possono interferire con la valutazione dello spessore della parete cardiaca, l'esame grossolano del cuore è impegnativo e soggetto a diversi errori tecnici o di interpretazione. Ciò è amplificato dalle variazioni morfologiche interspecifiche e dal fatto che molte patologie cardiache cliniche e importanti (compresi i primi casi di malattie coronariche, fibrosi, arterite e amiloidosi) non sono associate ad alcun cambiamento grossolano, essendo, in sostanza, patologie istologiche. Un protocollo standardizzato di dissezione e prelievo istologico dei campioni può portare coerenza tra gli osservatori e, allo stesso ....
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Protocollo
Il protocollo sperimentale ha ricevuto l'accordo bioetico (n. 311 dal 2022) ed è stato approvato dal Comitato di Bioetica dell'Università di Scienze Agrarie e Medicina Veterinaria di Cluj-Napoca, in conformità con la legislazione nazionale (legge n. 43 del 2014) ed europea (direttiva UE n. 63 del 2010). Vedere la tabella dei materiali per i dettagli su tutti i materiali e gli strumenti utilizzati in questo protocollo.
1. Protocollo necroscopico
NOTA: Si raccomanda di utilizzare lo stesso protocollo necroscopico per tutte le specie presentate a causa del più facile accesso quando vi....
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Risultati
Questo protocollo è stato utilizzato per visualizzare le caratteristiche anatomiche e raccogliere campioni per l'esame istologico del cuore in quattro diverse specie (cane, gatto, maiale e mucca). Il protocollo necroscopico è stato ripetuto in ciascuna delle specie sopra menzionate, ma illustrato solo nei cani. Il protocollo necroscopico inizia con un ampio esame esterno del corpo (Figura 1A) (compresa la pelle, i linfonodi esplorabili e la mucosa esterna), misurando il peso complessivo e se.......
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Discussione
Quando si esegue il protocollo corrente, è necessario considerare attentamente diversi passaggi critici per ottenere risultati coerenti. Negli animali giovani, le misurazioni cardiache sono diverse da quelle degli adulti (compreso lo spessore della parete ventricolare) e, in generale, il cuore rappresenta una percentuale maggiore del peso corporeo11,12. Il grado di ipertrofia ventricolare può essere quantificato applicando una formula di peso generale, il rapport.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno conflitti di interesse da rivelare.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Soluzione salina allo 0,9% | B. BRAUN MELSUNGEN AG | Per lavare tutto il sangue e i coaguli di sangue dal cuore. | |
| 10% formalina tamponata neutra (NBF) | Q Percorso | 11699404 | Materiali per la raccolta di campioni istopatologici. |
| Pinza per taglio osseo | HELEN SRL | LS109HV | Robusto strumento per il taglio osseo. |
| Tagliere | Ambition | 86304 | Per una più facile manipolazione, e taglio degli organi. |
| Soluzione decalcificante | Thermo Scientific TBD-2 | 6764004 | miscela 1:1 di acido formico all'8% e acido cloridrico. |
| Fotocamera digitale | Canon Inc. | PowerShot SX540 HS | Per la documentazione fotografica e videografica. |
| Pinze | MKD-Medicale | 15-430 | Strumenti di dissezione. |
| Cassette istologiche | Q Path | 720-2215 | Materiali per la raccolta di campioni istopatologici. Dimensioni: 3 &volte; 2,5 &volte; 0,4 cm |
| Coltello | TEHNO FOOD COM SERV SRL | D2006/15 | Lama affilata per il taglio dei tessuti molli. |
| Guanti in lattice | MKD-Medicale | SANTEX-S | Dispositivi di protezione. |
| Maschera | MKD-Medicale | 21221 | Dispositivi di protezione. |
| Piastre di Petri | MKD-Medicale | 0598-1V | Materiali per la raccolta di campioni di test ausiliari. |
| Recipienti in plastica | Corning Gosselin | TP200-02 | Materiali per la raccolta di campioni istopatologici. |
| Bilancia | ESPERANZA | MEEKS008 | Per pesare gli organi. |
| Bilancia | bianca Offerte | 72 | Per pesare i soggetti. |
| Bisturi | MKD-Medicale | 10322E | Lama affilata per il taglio dei tessuti molli. |
| Forbici | MKD-Medicale | 13-260 | Strumenti di dissezione. |
| Scrub | MKD-Medicale | 410100-52 | Dispositivi di protezione. |
| Siringhe | MKD-Medicale | 10573EU | Materiali per la raccolta di campioni di test ausiliari. |
Riferimenti
- Ashworth, M. Pathology of Heart Disease in the Fetus, Infant and Child: Autopsy, Surgical and Molecular Pathology. , Cambridge University Press. Cambridge. (2019).
- Barone, R. Anatomie Comparée des Mammifères Domestiques: Angiologie. Vigot, , Lyon. (2011).
- Basso,....
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Ristampe e permessi
