Perfezionamento tecnico di un modello murino bilaterale di ischemia-riperfusione renale per la ricerca sul danno renale acuto

Summary

Questo studio ha stabilito un protocollo incentrato sul perfezionamento tecnico di un modello murino di ischemia-riperfusione renale bilaterale per la ricerca sul danno renale acuto.

Abstract

L'arresto cardiaco rappresenta un grande onere per la salute pubblica. Il danno renale acuto (AKI) è un marcatore avverso nei sopravvissuti all'arresto cardiaco a seguito del ritorno della circolazione spontanea (ROSC) dopo una rianimazione cardiopolmonare riuscita. Al contrario, il recupero della funzione renale dall'AKI è un predittore di esiti neurologici favorevoli e di dimissione dall'ospedale. Tuttavia, manca un intervento efficace per prevenire il danno renale causato dall'arresto cardiaco dopo ROSC, suggerendo che sono necessarie ulteriori strategie terapeutiche. L'ipoperfusione renale e la riperfusione sono due meccanismi fisiopatologici che causano l'AKI dopo l'arresto cardiaco. I modelli animali di AKI indotta da ischemia-riperfusione (IR-AKI) di entrambi i reni sono paragonabili a quelli dei pazienti con AKI dopo ROSC in un contesto clinico. Tuttavia, l'IR-AKI di entrambi i reni è tecnicamente difficile da analizzare perché il modello è associato a un'elevata mortalità e a un'ampia variazione del danno renale, che può influenzare l'analisi. Sono stati scelti topi leggeri, posti in anestesia generale con isoflurano, sottoposti a chirurgia con approccio dorsolaterale e la loro temperatura corporea mantenuta durante l'operazione, riducendo così il danno tissutale e stabilendo un protocollo di ricerca IR-AKI renale acuto riproducibile.

Introduction

L'arresto cardiaco si verifica più di 80.000 volte all'anno negli Stati Uniti ^1,2. Il tasso di mortalità per arresto cardiaco è estremamente alto 3,4,5,6. L'AKI è un importante fattore di rischio associato a un'elevata mortalità e a scarsi esiti neurologici nei pazienti con arresto cardiaco dopo ROSC 7,8,9,10,11,12,13.

Protocol

Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati condotti in conformità con la Guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio, pubblicata dal National Institutes of Health degli Stati Uniti (pubblicazione NIH n. 85-23, rivista nel 1996). Il protocollo di studio è stato approvato e in conformità con le linee guida del Comitato Istituzionale per la Cura e l'Uso degli Animali presso l'Università Cattolica di Fu-Jen. Vedere la Tabella dei materiali per i dettagli su tutti i materiali e gli strumenti utilizzati in questo protocollo.

1. Preparare i topi

1. Selezionare topi maschi C57BL/6 di ....

Results

La qualità della chirurgia renale bilaterale IR-AKI deve essere valutata prima di ulteriori analisi microscopiche o molecolari. Durante l'intervento chirurgico, l'ischemia renale deve essere confermata osservando se il rene ha cambiato colore da rosa a rosso scuro subito dopo che il peduncolo renale è stato bloccato con una clip microvascolare (Figura 1). Dopo l'intervento chirurgico, il danno renale causato dalla chirurgia IR-AKI può essere ulteriormente convalidato con alcuni microlitri di.......

Discussion

Il protocollo bilaterale IR-AKI proposto è adatto per studiare il meccanismo di ipoperfusione e riperfusione di entrambi i reni. Il protocollo suggerisce che i topi leggeri, l'anestesia generale con isoflurano, un approccio dorsolaterale all'intervento chirurgico e il mantenimento della temperatura corporea durante l'operazione mitigano le difficoltà tecniche associate, riducano la durata dell'intervento chirurgico e aumentino la coerenza della procedura per la ricerca IR-AKI renale bilaterale acuta.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Sutura assorbibile, 6-0	Ethicon	J510G-BX
Soluzione di betadine	Shineteh Strument
Carprofen	Sigma	PHR1452
Batuffoli di cotone	Shineteh Strument
Graefe Forcipe	Fine Science Tools	11051-10
Termoforo	Shineteh Strument
Isoflurano	Piramal Critical Care Inc.	26675-46-7
Moria Vessel Clamp	Fine Science Tools	18320-11
Olsen-Hegar porta aghi	Fine Science Tools	12002 - 12
Saline	Shineteh Strument
Scalpello lame Shinva		s2646
Macchina per anestesia per piccoli animali	Sheng-Cing Instruments Co.	STEP AS-01
Forbici per tessuti	Fine Science Tools	14072 - 10