Utilizzo di un elettrodo bipolare per creare un modello murino per l'epilessia del lobo temporale mediante accensione elettrica dell'amigdala

Summary

L'amigdala svolge un ruolo chiave nell'epilessia del lobo temporale, che ha origine e si propaga da questa struttura. Questo articolo fornisce una descrizione dettagliata della fabbricazione di elettrodi cerebrali profondi con funzioni sia di registrazione che di stimolazione. Introduce un modello di epilessia del lobo temporale mediale originato dall'amigdala.

Abstract

L'amigdala è una delle origini più comuni delle convulsioni e il modello murino dell'amigdala è essenziale per l'illustrazione dell'epilessia. Tuttavia, pochi studi hanno descritto il protocollo sperimentale in dettaglio. Questo articolo illustra l'intero processo di creazione di modelli di epilessia elettrica di accensione dell'amigdala, con l'introduzione di un metodo di fabbricazione di elettrodi bipolari. Questo elettrodo può sia stimolare che registrare, riducendo le lesioni cerebrali causate dall'impianto di elettrodi separati per la stimolazione e la registrazione. Per scopi di registrazione dell'elettroencefalogramma a lungo termine (EEG), sono stati utilizzati collettori rotanti per eliminare l'interruzione della registrazione causata da grovigli di cavi e cadute.

Dopo stimolazione periodica (60 Hz, 1 s ogni 15 minuti) dell'amigdala basolaterale (AP: 1,67 mm, L: 2,7 mm, V: 4,9 mm) per 19,83 ± 5,742 volte, è stata osservata un'accensione completa in sei topi (definita come induzione di tre episodi continui di grado V classificati dalla scala di Racine). Un EEG intracranico è stato registrato durante l'intero processo di accensione e una scarica epilettica nell'amigdala della durata di 20-70 s è stata osservata dopo l'accensione. Pertanto, questo è un protocollo robusto per modellare l'epilessia proveniente dall'amigdala e il metodo è adatto per rivelare il ruolo dell'amigdala nell'epilessia del lobo temporale. Questa ricerca contribuisce a studi futuri sui meccanismi dell'epilessia del lobo temporale mesiale e di nuovi farmaci antiepilettogeni.

Introduction

L'epilessia del lobo temporale (TLE) è il tipo più diffuso di epilessia e ha un alto rischio di conversione in epilessia resistente ai farmaci. La chirurgia, come l'amigdaloippocampectomia selettiva, è un trattamento efficace per la TLE e l'epilettogenesi e l'ictogenesi della malattia sono ancora oggetto di indagine ^1,2. È stato dimostrato che la patogenesi della TLE si verifica non solo nell'ippocampo, ma anche ampiamente nell'amigdala ^3,4. Ad esempio, sia la sclerosi dell'amigdala che l'allargamento dell'amigdala sono stati frequentemente riportati c....

Protocol

Questo esperimento è stato approvato dal Comitato etico sperimentale sugli animali dell'ospedale Xuanwu, Capital Medical University. Tutti i topi sono stati tenuti nel laboratorio animale del Xuanwu Hospital, Capital Medical University. Questo protocollo è diviso in quattro parti. Le prime due parti introducono il metodo di costruzione dell'elettrodo e del circuito elettrico utilizzando un collettore rotante per collegare gli elettrodi e l'apparecchiatura di registrazione/stimolazione EEG. La terza parte descrive il metodo operativo di impianto dell'elettrodo e la quarta parte presenta i parametri di registrazione e stimolazione EEG utilizzati per il modello di epiles....

Results

L'elettrodo e il circuito consentono di registrare l'EEG e di funzionare come stimolazione (Figura 1); Questa configurazione evita la complessità di impiantare separatamente la registrazione e la stimolazione degli elettrodi e riduce al minimo i danni al tessuto cerebrale. L'applicazione di collettori rotanti consente il collegamento degli elettrodi con tutti i tipi di dispositivi.

Abbiamo eseguito un intervento chirurgico di impianto di elettrodi su sei topi adul.......

Discussion

L'epilessia è un gruppo di malattie con manifestazioni multiple e cause diverse¹⁸; Va notato che nessun singolo modello può essere utilizzato per tutti i tipi di epilessia e i ricercatori devono selezionare un modello appropriato per il loro studio specifico. Il presente studio introduce uno dei metodi più accessibili di fabbricazione degli elettrodi. Varie parti di questo metodo possono essere regolate per adattarsi a diverse condizioni sperimentali.

Questo metodo util.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alexa Fluor 488-coniugato Asino anti-coniglio IgG	invitrogen	A-21206
c-Fos anticorpo		ab222699
Trapano cranico	SANS	SA302
cemento dentale	NISSIN
Apparecchiature per la registrazione e la stimolazione EEG	Neuracle Technology (Changzhou) Co., Ltd	NSHHFS-210803
di stagno senza piombo	BAKON
Pin header / Femmina header	XIANMISI		spaziatura di 1,27 mm
Filo d'argento	A-M systems	786000
Anello di contatto	Senring Electronics Co., Ltd	SNM008-04
Filo di tungsteno	A-M systems	796000
ultrafine multi-stand	wire Shenzhen Chengxing wire e impianto	UL10064-FEP
	per cavi BAKON	BK881