Il presente protocollo descrive l'ottimizzazione dei parametri sperimentali quando si utilizza la stimolazione atriale transesofagea per valutare la suscettibilità alla fibrillazione atriale nei topi.
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Articolo metodologico
Ottimizzazione della stimolazione atriale transesofagea per valutare la suscettibilità alla fibrillazione atriale nei topi
In questo articolo
Sommario
Abstract
Modelli murini di fattori di rischio genetici e acquisiti per la fibrillazione atriale (FA) si sono dimostrati preziosi nello studio dei determinanti molecolari della fibrillazione atriale. La stimolazione elettrica programmata può essere eseguita utilizzando la stimolazione atriale transesofagea come procedura di sopravvivenza, consentendo così test seriali nello stesso animale. Tuttavia, esistono numerosi protocolli di stimolazione, il che complica la riproducibilità. Il presente protocollo mira a fornire una strategia standardizzata per sviluppare parametri sperimentali specifici del modello per migliorare la riproducibilità tra gli studi. Vengono eseguiti studi preliminari per ottimizzare i metodi sperimentali per il modello specifico in esame, compresa l'età al momento dello studio, il sesso e i parametri del protocollo di stimolazione (ad esempio, modalità di stimolazione e definizione della suscettibilità alla fibrillazione atriale). È importante sottolineare che si presta attenzione ad evitare energie di stimolo elevate, in quanto ciò può causare la stimolazione del plesso gangliare con attivazione parasimpatica involontaria, manifestata da un blocco atrioventricolare (AV) esagerato durante la stimolazione e spesso associato all'induzione della fibrillazione atriale artifattuale. Gli animali che dimostrano questa complicanza devono essere esclusi dall'analisi.
Introduzione
La fibrillazione atriale (FA) rappresenta un ultimo percorso comune per molteplici fattori di rischio acquisiti e genetici. Per gli studi che indagano i meccanismi fisiopatologici del substrato della fibrillazione atriale, i modelli murini sono vantaggiosi data la facilità di manipolazione genetica e il fatto che, in generale, riproducono la suscettibilità alla fibrillazione atriale osservata nell'uomo per diversi fenotipi clinici 1,2,3. Tuttavia, i topi raramente sviluppano AF4 spontanea, rendendo necessario l'uso di studi provocatori sulla stimolazio....
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Protocollo
Questa procedura è stata approvata dal Vanderbilt Institutional Animal Care and Use Committee ed è coerente con la Guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio. Il protocollo è stato sviluppato utilizzando sia modelli murini genetici9 che10 (ad esempio, ipertensione) di suscettibilità alla fibrillazione atriale. L'operatore è stato cieco al fenotipo del topo in studio.
1. Selezione degli animali
- Per i modelli genetici, sottoporre i topi a stimolazione atriale bisettimanale (cioè ogni due settimane) come descritto di seguito (vedere il punto 6.) per determin....
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Risultati
Gli studi di stimolazione atriale transesofagea valutano le proprietà elettrofisiologiche dei linfonodi SA e AV determinando SNRT e AVERP, nonché la suscettibilità alla fibrillazione atriale6 (Figura 1). La registrazione ECG consente di misurare la durata dell'onda P, l'intervallo PR, la durata QRS e gli intervalli QT/QTc. La registrazione continua dell'ECG durante la stimolazione atriale rapida può fornire le seguenti misurazioni della vulnerabilità della fibrillazio.......
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Discussione
La stimolazione atriale transesofagea non solo consente studi seriali nello stesso animale, ma la sua durata è tipicamente più breve rispetto agli studi intracardiaci (~ 20 min), riducendo così al minimo l'uso di anestetico e i suoi effetti sui parametri elettrofisiologici.
È fondamentale ottimizzare inizialmente i metodi per ogni singolo modello murino. L'invecchiamento aumenta l'inducibilità della fibrillazione atriale nei topi normali18,19
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
La Figura 2 è stata creata con BioRender.com. Questo lavoro è stato sostenuto da sovvenzioni del National Heart, Lung, and Blood Institute presso il National Institutes of Health (HL096844 e HL133127); l'American Heart Association (2160035, 18SFRN34230125 e 903918 [MBM]); e il National Center for Advancing Translational Sciences del National Institute of Health (UL1 TR000445).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Elettrodi ECG da 27 G | ADInstruments | MLA1204 | |
| catetere per elettrodi ottapolari 2-F | NuMED | CIBercath Contenitore a | |
| carboni attivi | di analisi 931401 | ||
| ADInstruments | LabChart v8.1.13 | ||
| Amplificatore biologico | ADInstruments | FE231 | |
| Dati hardware di acquisizione | ADInstruments | PowerLab 26T | |
| Unguento per gli occhi | MWI Veterinary | NC1886507 | |
| Pad riscaldante | Braintree Scientific | DPIP | |
| Isoflurane | Piramal | 66794-017-25 | |
| Stimolatore | Bloom Associates | DTU-210 | |
| Stimulus Isolator | World Precision Instruments | Modello A365 |
Riferimenti
- Sumitomo, N., et al. Association of atrial arrhythmia and sinus node dysfunction in patients with catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia. Circulation Journal. 71 (10), 1606-1609 (2007).
- Fukui, A., et al.
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Ristampe e permessi
