Presentato qui è una procedura chirurgica per la legatura permanente dell'arteria coronaria sinistra nei topi. Questo modello può essere utilizzato per studiare la fisiopatologia e la risposta infiammatoria associata dopo infarto miocardico.
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Articolo metodologico
Legatura coronaria sinistra: un modello chirurgico murino di infarto miocardico
In questo articolo
Sommario
Abstract
La cardiopatia ischemica e il successivo infarto miocardico (IM) sono una delle principali cause di mortalità negli Stati Uniti e in tutto il mondo. Al fine di esplorare i cambiamenti fisiopatologici dopo infarto miocardico e progettare trattamenti futuri, sono necessari modelli di ricerca di IM. La legatura permanente dell'arteria coronaria sinistra (LCA) nei topi è un modello popolare per studiare la funzione cardiaca e il rimodellamento ventricolare post MI. Qui descriviamo un modello di MI murino chirurgico meno invasivo, affidabile e riproducibile mediante legatura permanente dell'LCA. Il nostro modello chirurgico comprende un'anestesia generale facilmente reversibile, un'intubazione endotracheale che non richiede una tracheotomia e una toracotomia. L'elettrocardiografia e la misurazione della troponina devono essere eseguite per garantire l'infarto miocardico. L'ecocardiografia al giorno 28 dopo l'infarto miocardico discernerà la funzione cardiaca e i parametri di insufficienza cardiaca. Il grado di fibrosi cardiaca può essere valutato dalla colorazione tricromatica di Masson e dalla risonanza magnetica cardiaca. Questo modello di MI è utile per studiare le alterazioni fisiopatologiche e immunologiche dopo l'infarto miocardico.
Introduzione
Le malattie cardiovascolari sono una delle principali preoccupazioni per la salute pubblica che mietono 17,9 milioni di vite ogni anno, rappresentando il 31% della mortalità globale1. Il tipo più diffuso di anomalia cardiovascolare è la malattia coronarica e l'infarto miocardico (MI) è una delle principali manifestazioni della malattia coronarica2. L'infarto miocardico è solitamente causato dall'occlusione trombotica di un'arteria coronaria dovuta alla rottura di una placca vulnerabile3. L'ischemia risultante provoca profondi cambiamenti ionici e metabolici nel miocardio interessato, nonché una ra....
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Protocollo
Il presente protocollo di studio è stato esaminato e approvato dall'Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) dell'Università di Pittsburgh. Per questi esperimenti sono stati utilizzati otto topi femmina C57BL / 6J di 1 anno del peso di 24-30 g. Circa il 100% e almeno l'80% dei topi sono sopravvissuti rispettivamente nelle prime 24 ore e 28 giorni.
1. Preparazione e intubazione endotracheale dei topi
- Preriscaldare uno sterilizzatore a sfere (vedere Tabella dei materiali) a 250 °C e posizionarvi strumenti chirurgici autoclavati per alcuni minuti.
- Anestetizzare il topo in una cam....
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Risultati
La Figura 1 mostra i segnali rappresentativi attivi dell'ECG e della respirazione durante la valutazione ecocardiografica dei topi sham (Figura 1A) e MI (Figura 1B). La verifica dei segnali attivi ECG e respirazione è importante prima di acquisire i dati ecocardiografici. La Figura 2 mostra la misurazione ecocardiografica dei parametri funzionali cardiaci dopo 28 giorni dopo la legatur.......
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Discussione
Il modello murino di infarto miocardico sta guadagnando popolarità nei laboratori di ricerca cardiovascolare e questo studio descrive un modello di infarto miocardico riproducibile e clinicamente rilevante. Questo protocollo migliora il processo di legatura LCA in diversi modi. Per cominciare, si evita l'uso di anestetici pre-operatori iniettabili come xilazina / ketamina o pentobarbital di sodio14,15. È stata utilizzata solo l'anestesia con isoflurano, che aiuta.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno alcun conflitto di interessi da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato da sovvenzioni del National Institute of Health (R01HL143967, R01HL142629, R01AG069399 e R01DK129339), AHA Transformational Project Award (19TPA34910142), AHA Innovative Project Award (19IPLOI34760566) e ALA Innovation Project Award (IA-629694) (a PD).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Ago per catetere 22 G | Exel INT | 26741 | Toracentesi |
| Ago per catetere 24 G | Exel INT | 26746 | Intubazione endotracheale |
| 4-0 sutura in nylon | Covetrus | 29263 | Sutura dei muscoli e della pelle |
| 8-0 sutura in nylon | S& T | 3192 | Legatura di LAD |
| Vaporizzatori anestetici | Vet equip | VE-6047 | Supporto anestetico |
| Monitor fisiologico animale | Fujifilm | VEVO 3100 | Monitoraggio della frequenza cardiaca, della frequenza respiratoria e della temperatura corporea |
| Soluzione di betadina | PBS salute animale | 11205 | Antispetico |
| Buprenorfina | Covetrus | 55175 | Analgesico |
| Microscopio sezionatore | OMANO | OM2300S-V7 | Binocolo |
| Rasoio elettrico | Wahl | 79300-1001M | Gel |
| elettrodi | Parker Laboratories | W60698L | Gel elettricamente conduttivo |
| Etanolo | Decon Laboratories | 22-032-601 | Pinze disinfettanti |
| FST | 11065-07 | Acciaio inossidabile | |
| Garza | Curity | CAR-6339-PK | |
| Lampada termica | Satco | S4998 | Cura post-operatoria |
| Termoforo | Kent scientific | Surgi-M | Controllo della temperatura |
| Sterilizzatore a perline calde | Germinatore 500 | 11503 | Sterilizzazione dello strumento chirurgico |
| Isoflurano | Covetrus | 29405 | Anestesia |
| Masson’ s kit di colorazione tricromica | Thermoscientific | 87019 | Misurazione della fibrosi cardiaca |
| Micro porta aghi | FST | 12500-12 | Micro forbici in acciaio inossidabile |
| FST | 15000-02 | ||
| Unguento oftalmico | Dechra | Puralube Vet | Lubrificante oculare sterile |
| Gel di scansione | Parker Laboratories | Aquasonic 100 | Gel acquoso per la trasmissione degli ultrasuoni |
| Forbici | FST | 14060-11 | |
| Laringoscopio per piccoli animali | Penn-Century | Model LS-2-M | Illuminazione dell'orofaringe |
| Ventilatore per piccoli animali | Apparecchio Harvard | 557058 | Supporto per ventilatore |
| Luce chirurgica | Cole parmer | 41723 | Larghezza dell'illuminatore (in): 7 |
| Piattaforma di imaging preclinico Vevo 3100 | Fujifilm | VEVO 3100 | Ecocardiografia |
| Software VevoLAB | Fujifilm | VevoLAB 3.2.6 | Analisi dei dati dell'ecocardiografia |
Riferimenti
- Virani, S. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2021 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 143 (8), 254(2021).
- Mendis, S., et al. World Health Organization defi....
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Ristampe e permessi
