La pupillometria, una tecnica semplice e non invasiva, viene proposta come metodo per determinare le soglie uditive in animali udenti normali e modelli animali di varie patologie uditive.
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Articolo metodologico
La pupillometria, una tecnica semplice e non invasiva, viene proposta come metodo per determinare le soglie uditive in animali udenti normali e modelli animali di varie patologie uditive.
L'esposizione al rumore è una delle principali cause di perdita dell'udito neurosensoriale. I modelli animali di perdita dell'udito indotta dal rumore hanno generato informazioni meccanicistiche sulle patologie anatomiche e fisiologiche sottostanti della perdita dell'udito. Tuttavia, mettere in relazione i deficit comportamentali osservati negli esseri umani con perdita dell'udito e i deficit comportamentali nei modelli animali rimane difficile. Qui, la pupillometria è proposta come un metodo che consentirà il confronto diretto dei dati comportamentali animali e umani. Il metodo si basa su un paradigma stravagante modificato - abituando il soggetto alla presentazione ripetuta di uno stimolo e presentando in modo intermittente uno stimolo deviante che varia in qualche modo parametrico dallo stimolo ripetuto. La premessa fondamentale è che se il cambiamento tra lo stimolo ripetuto e deviante viene rilevato dal soggetto, innescherà una risposta di dilatazione della pupilla che è più grande di quella suscitata dallo stimolo ripetuto. Questo approccio è dimostrato utilizzando un compito di categorizzazione della vocalizzazione nelle cavie, un modello animale ampiamente utilizzato nella ricerca uditiva, compresi gli studi sulla perdita dell'udito. Presentando le vocalizzazioni di una categoria di vocalizzazione come stimoli standard e una seconda categoria come stimoli strani incorporati nel rumore a vari rapporti segnale-rumore, è dimostrato che l'entità della dilatazione della pupilla in risposta alla categoria oddball varia monotonamente con il rapporto segnale-rumore. Le analisi della curva di crescita possono quindi essere utilizzate per caratterizzare il decorso temporale e la significatività statistica di queste risposte di dilatazione della pupilla. In questo protocollo vengono descritte procedure dettagliate per acclimatare le cavie all'installazione, condurre la pupillometria e valutare / analizzare i dati. Sebbene questa tecnica sia dimostrata in cavie con udito normale in questo protocollo, il metodo può essere utilizzato per valutare gli effetti sensoriali di varie forme di perdita dell'udito all'interno di ciascun soggetto. Questi effetti possono quindi essere correlati con misure elettrofisiologiche concomitanti e osservazioni anatomiche post-hoc.
Il diametro della pupilla (PD) può essere influenzato da un ampio numero di fattori e la misurazione del PD che cambia nel tempo è nota come pupillometria. Il PD è controllato dal muscolo sfintere dell'iride (coinvolto nella costrizione) e dal muscolo dilatatore dell'iride (coinvolto nella dilatazione). Il muscolo costrittivo è innervato dal sistema parasimpatico e comporta proiezioni colinergiche, mentre il dilatatore dell'iride è innervato dal sistema simpatico che coinvolge proiezioni noradrenergiche e colinergiche 1,2,3. Lo stimolo più noto per indurre cambiamenti di PD è....
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Per tutte le procedure sperimentali, ottenere l'approvazione dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali (IACUC) e aderire alle linee guida NIH per la cura e l'uso di animali da laboratorio. Negli Stati Uniti d'America, i medici generici sono inoltre soggetti alle normative del Dipartimento dell'Agricoltura degli Stati Uniti (USDA). Tutte le procedure di questo protocollo sono state approvate dall'Università di Pittsburgh IACUC e hanno aderito alle linee guida NIH per la cura e l'uso di animali da laboratorio. Per questo esperimento, sono stati utilizzati tre GP maschi wildtype, pigmentati tra i 4 ei 10 mesi di età, con ~ 600-1.000 g di peso.
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La pupillometria è stata eseguita in tre GP pigmentati maschili, del peso di ~ 600-1.000 g nel corso degli esperimenti. Come descritto in questo protocollo, per stimare le soglie di categorizzazione del call-in-noise, è stato utilizzato un paradigma stravagante per la presentazione dello stimolo. Nel paradigma oddball, i richiami appartenenti a una categoria (whines) incorporati nel rumore bianco in un dato SNR sono stati impiegati come stimoli standard (Figura 2A), e le chiamate da un'altra categoria (wheeks) incorporat.......
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Questo protocollo dimostra l'uso della pupillometria come metodo non invasivo e affidabile per stimare le soglie uditive in animali che ascoltano passivamente. Seguendo il protocollo qui descritto, sono state stimate le soglie di categorizzazione del rumore di chiamata nei medici generici con udito normale. Le soglie stimate utilizzando la pupillometria sono risultate coerenti con quelle ottenute utilizzando l'addestramento operante62. Rispetto alla formazione operativa, tuttavia, il protocollo di.......
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Gli autori non hanno conflitti di interesse da rivelare.
Questo lavoro è stato sostenuto dal NIH (R01DC017141), dalla Pennsylvania Lions Hearing Research Foundation e dai fondi dei Dipartimenti di Otorinolaringoiatria e Neurobiologia dell'Università di Pittsburgh.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Scheda di uscita analogica | Measurement Computing Corporation, Norton, MA | PCI-DDA02/12 | |
| Schiuma anecoica | Sonex One, Pinta Acoustic, Minneapolis, MN | ||
| Microfono a condensatore | Behringer, Willich, Germania | C-2 | |
| Microfono a campo libero | Bruel & Kjaer, Danimarca) | Tipo 4940 | |
| Matlab | Mathworks, Inc., Natick, MA | versione 2018a | |
| Telecamera remota monoculare e sistema di illuminazione | Arrington Research, Scottsdale, AZ | MCU902 | Array di LED a infrarossi + fotocamera con filtro a infrarossi |
| Dispositivo I/O multifunzione | National Instruments, Austin, TX | PCI-6229 | |
| Processore di interfaccia neurale | Ripple Neuro, Salt Lake City, UT | SCOUT | |
| Sensore di movimento piezoelettrico | SparkFun Electronics, Niwot, CO | SEN-10293 | |
| Valvola a manicotto | Cole-Palmer Instrument Co., Vernon Hills, IL | EW98302-02 | |
| Attenuatore programmabile | Tucker-Davis Technologies, Alachua, FL | PA5 | |
| Tubi in silicone | Cole-Parmer | ~3 mm | |
| Camera di attenuazione del suono | IAC Acoustics | ||
| Altoparlante full-range | Tang Band, Taipei, Taiwan | W4-1879 | |
| Amplificatore stereo | Tucker-Davis Technologies, Alachua, FL | SA1 | |
| Da tavolo - CleanTop Controllo ottico | delle vibrazioni TMC / Ametek, Peabody, MA | ||
| Viewpoint software | ViewPoint, Arrington Research, Scottsdale, AZ |
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