Analisi di campioni di rizoma di Cyperi grezzi e lavorati mediante cromatografia liquida-spettrometria di massa tandem in ratti con dismenorrea primaria

Summary

Qui, viene presentata un'analisi comparativa di campioni grezzi e lavorati di rizoma di Cyperi (CR) utilizzando la spettrometria di massa tandem ad altissima prestazione per cromatografia liquida ad alta risoluzione (UPLC-MS / MS) nei ratti con dismenorrea primaria. Le variazioni dei livelli ematici dei metaboliti e dei costituenti del campione sono state esaminate tra ratti trattati con CR e CR trattati con aceto (CRV).

Abstract

Cyperi rhizoma (CR) è ampiamente usato in ginecologia ed è una medicina generale per il trattamento delle malattie delle donne in Cina. Poiché l'effetto analgesico della CR è potenziato dopo la lavorazione con aceto, la CR elaborata con aceto (CRV) viene generalmente utilizzata clinicamente. Tuttavia, il meccanismo con cui l'effetto analgesico è potenziato dalla lavorazione dell'aceto non è chiaro. In questo studio, la tecnica di spettrometria di massa tandem per cromatografia liquida ad altissima pressione (UPLC-MS/MS) è stata utilizzata per esaminare i cambiamenti nei livelli ematici dei costituenti esogeni e dei metaboliti tra ratti trattati con CR e ratti trattati con CRV con dismenorrea. I risultati hanno rivelato livelli diversi di 15 costituenti e due metaboliti nel sangue di questi ratti. Tra questi, i livelli di (-)-mirtenolo e acido [(1R,2S,3R,4R)-3-idrossi-1,4,7,7-tetrametilbiciclo[2.2.1]ep-2-il]acetico nel gruppo CRV erano considerevolmente più alti rispetto al gruppo CR. Il CRV ha ridotto il livello di prostanoidi della serie 2 e dei leucotrieni della serie 4 con attività proinfiammatorie, di aggregazione piastrinica e di vasocostrizione e ha fornito effetti analgesici modulando il metabolismo dell'acido arachidonico e dell'acido linoleico e la biosintesi degli acidi grassi insaturi. Questo studio ha rivelato che la lavorazione dell'aceto migliora l'effetto analgesico della CR e contribuisce alla nostra comprensione del meccanismo d'azione del CRV.

Introduction

La dismenorrea primaria (PD) è la condizione più diffusa in ginecologia clinica. È caratterizzata da mal di schiena, gonfiore, dolore addominale o disagio prima o durante le mestruazioni senza patologia pelvica nel sistema riproduttivo¹. Un rapporto sulla sua prevalenza ha mostrato che l'85,7% degli studenti soffre di PD². I contraccettivi orali a basso dosaggio sono la terapia standard, ma i loro effetti collaterali avversi, come la trombosi venosa profonda, hanno attirato una crescente attenzione³. La prevalenza della trombosi venosa profonda tra gli utilizzatori di contrac....

Protocol

Tutti gli esperimenti relativi agli animali sono stati condotti con l'approvazione del Comitato etico degli esperimenti dell'Istituto di MTC di Chongqing. In questo esperimento sono stati utilizzati ventiquattro ratti femmina di Sprague Dawley (SD) che avevano 8-10 settimane e pesavano 200 g ± 20 g.

1. Preparazione dell'estrazione

1. Calcolo
   1. Pianificare la somministrazione dell'estratto di CR o CRV a un gruppo di trattamento di sei ratti Sprague-Dawley (10 g/[kg∙giorno]) per 3 giorni. Utilizzare una concentrazione di estratto CR o CRV di 1 g / ml (1 ml dell'estratto è ottenuto da 1 g di erbe).
      NOTA: Il dosa....

Results

Analisi dell'esperimento modello di dismenorrea
Non c'è stata alcuna risposta di contorsione entro 30 minuti nel gruppo di controllo perché questi ratti non sono stati iniettati per via intraperitoneale con ossitocina ed estradiolo benzoato per causare dolore. I ratti nei gruppi modello, CR e CRV hanno mostrato sostanziali reazioni di contorcersi dopo l'iniezione di ossitocina. Questi risultati dimostrano l'efficacia della combinazione di estradiolo benzoato e ossitocina per indurre dismenorrea. Le di.......

Discussion

A causa della grande varietà e della diversa natura dei TCM, queste erbe a volte non funzionano nella pratica clinica, e questo può essere dovuto alla lavorazione e al decotto inappropriati dei TCM. I meccanismi della MTC stanno diventando più evidenti con l'uso della scienza e della tecnologia contemporanee^29,30. Questo studio mostra che sia la CR che la CRV hanno effetti terapeutici nei ratti modello PD e che l'effetto terapeutico del CRV è più sostanziale. Il .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetonitrile	Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA	197164
BECKMAN COULTER Microfuge 20	Beckman  Coulter, Inc.
Estradiolo benzoato	Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd	C10042616
acido formico	Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA	177799
LC 30A system	Shimadzu, Kyoto, Giappone	228-45162-46
Olio d'oliva	Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd	H25A11P111909
Ossitocina sintetica	Fornitore verificato - Zhejiang peptide biology Co., Ltd
Rat PGF2α Kit ELISA	Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd	202101
Rat PGFE2 Kit ELISA	Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd	EDL202006217
SPF Sprague-Dawley ratti	Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd	Numero di certificato SCXK (Hunan) 2019-0004
Tecan Infinite 200 PRO	Tecan Austria GmbH, Austria	1510002987
Sistema Triple TOF 4600	SCIEX, Framingham, MA, USA	BK20641402
acqua	Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA	152720