Nel presente protocollo, è stata sviluppata un'induzione della stenosi uretrale nei ratti Wistar, seguita da una ricostruzione uretrale con un innesto di mucosa vestibolare. Sono stati eseguiti un uretrogramma retrogrado e una valutazione laser Doppler, convalidando la ricostruzione uretrale (dopo la formazione della stenosi) e il posizionamento dell'innesto.
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Articolo metodologico
Induzione della stenosi uretrale seguita da uretroplastica dell'innesto della mucosa buccale in un modello di ratto
In questo articolo
Sommario
Abstract
La ricostruzione uretrale è un'importante area di competenza per gli urologi. La mucosa vestibolare è considerata l'opzione migliore quando è necessario l'innesto uretrale, anche se in alcuni casi è inappropriata o deve essere ottimizzata per riparare una determinata stenosi. Pertanto, lo sviluppo di procedure innovative e la valutazione del loro presunto successo in modelli sperimentali è fondamentale per soddisfare le esigenze cliniche. Con questo obiettivo, questo studio descrive un protocollo in cui la stenosi uretrale è stata indotta dall'elettrocauterizzazione nei ratti Wistar. La ricostruzione uretrale è stata eseguita 1 settimana dopo con un innesto di mucosa vestibolare, prelevato dal labbro inferiore e posizionato in modo onlay ventrale. Un uretrogramma ha mostrato un miglioramento significativo del diametro uretrale dopo l'uretroplastica rispetto al rispettivo valore dopo l'induzione della stenosi. Inoltre, il posizionamento dell'innesto è stato valutato mediante analisi di perfusione sanguigna utilizzando laser Doppler. Come previsto, un'area blu scuro corrispondeva all'innesto di mucosa buccale non vascolarizzata. Questa procedura può simulare con successo il normale processo fisiopatologico di lesione uretrale e modulazione tissutale, nonché la ricostruzione uretrale utilizzando un innesto di mucosa vestibolare in modo riproducibile e fungere da base per la ricerca futura basata sull'ingegneria tissutale o sugli innesti uretrali.
Introduzione
La ricostruzione uretrale è una delle principali sfide per i chirurghi urologici nella gestione delle lesioni uretrali nel contesto di stenosi, traumi o difetti congeniti1. Con intento curativo, l'uretroplastica è il trattamento di scelta per la maggior parte dei pazienti, con difetti uretrali lunghi (>2 cm) e anteriori che richiedono una qualche forma di uretroplastica sostitutiva2. Molti tessuti sono stati utilizzati come sostituti uretrali, tra cui innesti cutanei a pieno spessore o a spessore diviso di aree genitali o extragenitali, mucosa della parete vescicale o della mucosa vestibolare diffusa2
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Protocollo
Tutte le procedure sugli animali sono state eseguite in conformità alla direttiva 2010/63/UE. Le procedure sono state approvate dall'Ente istituzionale per il benessere degli animali, autorizzato dalla DGAV, l'autorità portoghese competente per la protezione degli animali (numero di licenza 0421/000/000/2021). Per il presente studio sono stati utilizzati ratti maschi Wistar Han IGS (Crl:WI(Han) (400-500 g) a 12-14 settimane di età. Gli animali sono stati ottenuti da una fonte commerciale (vedi Tabella dei materiali).
1. Preparazione delle soluzioni
- Soluzione anestetica
- Riempire una siringa ....
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Risultati
Un totale di 12 ratti Wistar maschi, del peso di 400-500 g e di 12-14 settimane, sono stati utilizzati per l'induzione della stenosi uretrale. Un uretrogramma retrogrado (RUG1) è stato eseguito 1 settimana dopo8, confermando il successo della tecnica. Il diametro uretrale è stato misurato in millimetri a livello dell'induzione della stenosi. Successivamente, è stata eseguita un'uretroplastica con innesto di mucosa vestibolare nella faccia ventrale dell'uretra di ratto. Gli stessi ratti sono stati .......
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Discussione
L'uretroplastica con innesti di mucosa vestibolare è una pietra miliare nella ricostruzione uretrale. Tuttavia, dovrebbero essere sviluppate procedure innovative per ottimizzare quelle già descritte e stabilirne di nuove, come i materiali di ingegneria tissutale e gli innesti biologici, per ridurre le complicanze e la morbilità. Sono state pubblicate diverse procedure per stabilire modelli preclinici e definire le tecniche chirurgiche. Souza et al.1 hanno condotto uno studio su 12 conigli neozelan.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Ringraziamo João Leitão, capo del dipartimento di Radiologia del Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte, e Catia Fernandes, tecnico del dipartimento di Radiologia del Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte, per la loro collaborazione nella realizzazione degli uretrogrammi.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Atipamezolo | OrionPharma | L'ANTISEDANO (atipamezolo) è indicato per l'inversione degli effetti sedativi e analgesici. | |
| Buprenorfina | RichterPharma | La buprenorfina è un derivato dell'alcaloide oppioide tebaina, un analgesico più potente (25-40 volte) e di lunga durata rispetto alla morfina. | |
| Carl Zeiss Opmi-1 FC Microscopio Chirurgico Stereo | Microscopia Carl Zeiss, Germania | OPMI 1 FC di ZEISS simboleggia qualità, precisione e affidabilità. Il sistema manuale è facile da usare e offre immagini ad alta fedeltà con le leggendarie ottiche ZEISS. | |
| Carprofen | Zoetis | Il carprofene è un farmaco antinfiammatorio (FANS) non steroideo appartenente alla classe dell'acido propionico. | |
| Catetere 22 G. x 1'' | B Braun | Introcan Safety | Catetere IV di etilene propilene fluorurato (FEP) con costruzione più solida per accesso arterioso. |
| Enrofloxacina | Bayer | L'enrofloxacina è un antibiotico fluorochinolonico. | |
| Fentanil | Braun | 3644960 | Il fentanyl è un potente analgesico oppioide sintetico. |
| Flumazenil | Fresenius Kabi | L'antagonista benzodiazepino è utilizzato per l'inversione completa o parziale degli effetti sedativi causati dalle benzodiazepine. | |
| Cauterizzazione ad alta temperatura | Fiab | F7244 | Cauteri usa e getta, sterili, alta temperatura (1200 °C; C), punta fine da 28 mm. |
| Gel Instillagel | Farco-pharma | Lubrificante a base di cellulosa con proprietà anestetiche locali e disinfettanti. | |
| Iopromide | Bayer | Mezzo di contrasto iniettabile non ionico, con iodio. | |
| Sistema di imaging laser Doppler (imager a perfusione moorLDI2-HIR e software dedicato) | MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, Regno Unito | 5710 | I modelli di angiogenesi utilizzano immagini Doppler laser per valutare la perfusione sanguigna negli arti posteriori, uno dei quali è legato chirurgicamente. Un software dedicato alla misurazione e al confronto consente di definire le regioni di interesse per la valutazione del flusso sanguigno sull'arto ischemico rispetto a quello non ischemico, stabilendo un "rapporto di reperfusione" che può essere valutato tutte le volte che necessario e per diversi giorni sullo stesso soggetto. |
| Gel Occhi Lubrithal | Dechra | Gel per gli occhi usato negli animali per prevenire la secchezza oculare durante l'anestesia. Azione lubrificante e idratante su cornea e congiuntiva. | |
| Maschi di ratti Wistar Han IGS (Crl:WI(Han)) | Charles River Laboratories, Spagna | Dodici o quattordici settimane | |
| Metedomidina | Virbac | 037/01/07RFVPT | La medetomidina è un farmaco sintetico utilizzato come anestetico chirurgico. |
| Midazolam | Labesfal | I farmaci a base di benzodiazepini vengono utilizzati per l'anestesia e la sedazione procedurale. | |
| Sistema di Angiografia Monoplan | Philips Medical Systems | Azurion 7 M20 | Un sistema radiografico fluoroscopico diagnostico stazionario progettato specificamente per ottimizzare la capacità degli utenti di valutare visivamente e quantitativamente l'anatomia e la funzione dei vasi sanguigni del cuore, del cervello e di altri organi, nonché del sistema linfatico. |
| Pinze per zanzare | Henry Schein | 102-4346 | Pinza emostatica Hartman-Mosquito in acciaio inossidabile curva da 3-1/2" |
| Portaago | Henry Schein | 100-2570 | Portaago Mayo-Hegar, acciaio inox, 14 cm |
| Portaago per aghi oftalmici | Asico | AE-6143 | Barranquero portaago più delicato senza bloccaggio |
| Pentobarbital Sodio | Ecuphar | Il sodio pentobarbitale è il sale di sodio del pentobarbital utilizzato per l'eutanasia. | |
| Pinze appuntite | Esculap | BD335R | Microforceps, punta da 0,30 mm |
| Polysorb 6.0 | Medtronic (Covidien) | UL-101 | Sutura Assorbibile Sintetica Rivestita mirava a ridurre la reazione infiammatoria nei tessuti, seguita da un incapsulamento graduale della sutura tramite tessuto connettivo fibroso. |
| Providone-Iodio | Mylan | Povidone-iodio 10% è un farmaco antisettico, usato come disinfettante prima e dopo l'intervento. | |
| Scalpell Blade nº 11 | B Braun | BB511 | Acciaio al carbonio, sterile |
| Forbici a Molla | Henry Schein | 600-4826 | Forbici chirurgiche 31 castroviejo |
| Pinze chirurgiche | Esculap | BD33R | Microforceps, punta da 0,20mm |
| Forbici chirurgiche | Esculap | MA873R | Forbici Micro Iris, punte curve per schegge |
| SurgiPro 7.0 | Medtronic (Coviden) | VP-702-X | Sutura monofilamento non assorbibile in polipropilene indicata per l'uso nella legatura generale dei tessuti molli. |
Riferimenti
- Souza, G. F., Calado, A. A., Delcelo, R., Ortiz, V., Macedo, A. Histopathological evaluation of urethroplasty with dorsal buccal mucosa: an experimental study in rabbits. International Brazilian Journal of Urology. 34 (3), 345-354 (2008).
- Andrich, D. E., Mundy, A. R.
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Ristampe e permessi
