Method Article

Ottimizzazione della tecnologia di lavorazione dell'olio di montone Epimedii folium e test del suo effetto sullo sviluppo embrionale del pesce zebra

DOI:

10.3791/65096

⸱

March 17th, 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Chongqing Academy of Chinese Materia Medica, 2Bioengineering College of Chongqing University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In questo protocollo, la tecnologia di lavorazione dell'olio di montone di Epimedii folium (EF) è stata ottimizzata applicando una metodologia sperimentale di superficie di progettazione-risposta Box-Behnken ed è stato studiato preliminarmente l'effetto dell'EF grezzo e ottimizzato estratto dall'acqua sullo sviluppo embrionale del pesce zebra.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Come medicina tradizionale cinese (MTC), Epimedii folium (EF) ha una storia in medicina e cibo che ha > 2.000 anni. Clinicamente, l'EF elaborato con olio di montone è spesso usato come medicinale. Negli ultimi anni, le segnalazioni di rischi per la sicurezza e reazioni avverse di prodotti che utilizzano EF come materia prima sono gradualmente aumentate. L'elaborazione può migliorare efficacemente la sicurezza della MTC. Secondo la teoria TCM, la lavorazione dell'olio di montone può ridurre la tossicità dell'EF e migliorare il suo effetto tonificante sui reni. Tuttavia, mancano ricerche e valutazioni sistematiche della tecnologia di trattamento dell'olio di montone EF. In questo studio, abbiamo utilizzato la metodologia sperimentale della superficie di progettazione-risposta Box-Behnken per ottimizzare i parametri chiave della tecnologia di lavorazione valutando il contenuto di più componenti. I risultati hanno mostrato che la tecnologia ottimale di lavorazione dell'olio di montone di EF era la seguente: riscaldare l'olio di montone a 120 °C ± 10 °C, aggiungere l'EF grezzo, saltarlo delicatamente a 189 °C ± 10 °C fino a quando non è uniformemente lucido, quindi rimuoverlo e raffreddarlo. Per ogni 100 kg di EF, devono essere utilizzati 15 kg di olio di montone. Le tossicità e le teratogenicità di un estratto acquoso di EF grezzo e olio di montone sono state confrontate in un modello di sviluppo dell'embrione di zebrafish. I risultati hanno mostrato che il gruppo di erbe grezze aveva maggiori probabilità di causare deformità del pesce zebra e la sua concentrazione EF letale semi-massima era inferiore. In conclusione, la tecnologia ottimizzata di lavorazione dell'olio di montone era stabile e affidabile, con una buona ripetibilità. Ad una certa dose, l'estratto acquoso di EF era tossico per lo sviluppo di embrioni di zebrafish e la tossicità era più forte per il farmaco grezzo che per il farmaco trasformato. I risultati hanno mostrato che la lavorazione dell'olio di montone ha ridotto la tossicità dell'EF grezzo. Questi risultati possono essere utilizzati per migliorare la qualità, l'uniformità e la sicurezza clinica dell'EF trattato con olio di montone.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Epimedii folium (EF) è le foglie essiccate di Epimedium brevicornu Maxim., Epimedium sagittatum (Sieb. et Zucc.) Maxim., Epimedium pubescens Maxim., o Epimedium koreanum Nakai. EF può essere usato per trattare l'osteoporosi, la sindrome della menopausa, noduli al seno, ipertensione, malattia coronarica e altre malattie1. Come medicina tradizionale cinese (MTC), EF ha una storia in medicina e cibo di oltre 2.000 anni. Grazie al suo basso prezzo e al notevole effetto di tonificare i reni, è ampiamente usato in medicinali e alimenti salutari. L'EF viene lavorato saltando in padella con olio di montone, un proces....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutti gli esperimenti relativi agli animali sono stati condotti con l'approvazione del Comitato etico degli esperimenti dell'Istituto di MTC di Chongqing (numero di certificato di revisione etica degli animali da laboratorio: ZJS2022-03).

1. Determinazione dei componenti bioattivi

NOTA: La specie utilizzata in questa ricerca era Epimedium sagittatum, e i campioni sono stati raccolti nella contea di Fengdu, Chongqing. Il campione è stato identificato come una parte secca fuori terra di E. sagittatum (Sieb. et Zucc.) Massima. dai ricercatori dell'Istituto di Medicina Biologica, Isti....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Risultati dell'indagine metodologica
È stata osservata una relazione lineare tra la concentrazione di icariina, EA, EB, EC, BI e le aree di picco cromatografiche (vedere Tabella 3). I valori RSD% (n = 6) delle aree di picco cromatografiche di icariina, EA, EB, EC e BI erano rispettivamente 0,28%, 1,22%, 0,65%, 1,67% e 1,06%, indicando che la precisione delle misurazioni HPLC era buona. I valori RSD% (n = 6) dei contenuti di icariina, EA, EB, EC e BI erano rispettivamente 1,59%, 1,46%,.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Variabili indipendenti e determinazione dei loro livelli
La tecnologia di elaborazione EF è descritta solo nell'edizione 2020 della Farmacopea cinese e nelle specifiche locali di elaborazione della medicina cinese pubblicate da 26 province, comuni e regioni autonome in tutto il paese1. La descrizione prevede i seguenti passaggi: prendere l'olio di montone e riscaldarlo per scioglierlo, aggiungere brandelli EF, saltare in padella a fuoco lento fino a quando non è uniforme e luci.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gli autori non dichiarano conflitti di interesse.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Questo lavoro è supportato dal Basic Scientific Research Business Project della Chongqing Academy of Traditional Chinese Medicine (numero di progetto: jbky20200013), dal Performance Incentive Guidance Project degli istituti di ricerca scientifica di Chongqing (numero di progetto: cstc2021jxjl 130025) e dal progetto di costruzione della disciplina chiave della Commissione sanitaria municipale di Chongqing di Chinese Materia Medica Processing.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
AcetonitrileFisher197164
Baohuoside figure-materials-1 (Bfigure-materials-2 ) Fornitore verificato - Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-20042402
Colonna cromatograficaWaters CorporationSimmetria C18
Design Software espertoStat- Ease Inc., Minneapolis, MNVersione di prova8.0.6.1
RivelatoreWaters Corporation2998
DisintegratoreHefei Rongshida Small Household Appliance Co., Ltd.S-FS553
Bilancia analitica elettronicaMettler-Toledo International Inc.
Epimedin A (EA)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-21112118
Epimedin B (EB)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-20080403
Epimedin C (CE)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-20080310
EtanoloChongqing Chuandong Chemical ( Group ) Co., Ltd.
SoftwareGraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA6.02
Cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC)Waters Corporation2695
IcariinChengdu Glip Biotechnology Co., Ltd.
MethanolChongqing Chuandong Chemical (Group) Co., Ltd.
Membrana microporosaTianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd.0,22μ m
Olio di montoneKuoshan Zhiniu Fresh Food Store20211106
Office Excel software per ufficioMicrosoftOffice Excel 2021
Farmacopea setaccioShaoxing Shangyu Huafeng Hardware Instrument Co., Ltd.R40/3
Macchina per acqua puraChongqing Andersen Environmental Protection Equipment Co., Ltd.AT Sro 10A
Carta da filtro qualitativaShanghai Leigu Instrument Co., Ltd.Stereomicroscopio da 18 cm
Carl Zeiss, Oberkochen, GermaniaStemi 2000
Pulitore ad ultrasuoniBranson Ultrasonics (Shanghai) Co., Ltd.BUG25-12
ZebrafishChina Zebrafish Resource Center (CZRC)Il ceppo
MS205DU201808012109140120171101 AB

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chinese Pharmacopoeia Commission. Chinese Pharmacopoeia. Volume I. , China Medical Science and Technology Press. Beijing, China. (2020).
  2. Wang, X. T. Collection of Traditional Chinese Medicine Processing Methods. , Nanchang Science and Technology Press. Jiangxi, China. (1998).
  3. Chen, L. L., Jia, X. B., Jia, D. S.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Epimedii FoliumMutton Oil ProcessingResponse Surface MethodBox Behnken DesignZebrafish Embryo DevelopmentHPLC AnalysisToxicity AssessmentChinese Medicine PreparationIcariin ContentTeratogenicity Testing

Related Articles