Qui, proponiamo un protocollo per la somministrazione di lipopolisaccaridi intratracheali (LPS) tramite intubazione endotracheale orofaringea non invasiva. Questo metodo riduce al minimo il trauma della procedura chirurgica per l'animale e fornisce accuratamente LPS alla trachea e quindi ai polmoni.
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Articolo metodologico
Instillazione di lipopolisaccaridi intratracheali non invasivi nei topi
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il modello murino di danno polmonare acuto (ALI) indotto da lipopolisaccaride (LPS) o endotossina è ancora tra i modelli più comunemente usati negli studi sugli animali di danno polmonare acuto o infiammazione acuta. Gli attuali metodi più comunemente usati nei modelli murini di danno polmonare acuto sono un'iniezione intraperitoneale di LPS e tracheostomia per l'infusione tracheale di LPS. Tuttavia, il primo metodo manca di targeting polmonare e danneggia altri organi, e il secondo metodo induce traumi operativi, rischio di infezione e un basso tasso di sopravvivenza. Qui, raccomandiamo un metodo di intubazione endotracheale orofaringea non invasivo per l'instillazione di LPS nei topi. In questo metodo, LPS viene introdotto in modo non invasivo nella trachea attraverso la cavità orofaringea per essere instillato nel polmone con l'aiuto di un apparato per l'intubazione endotracheale. Questo metodo non solo assicura il targeting polmonare, ma evita anche danni e il rischio di morte negli animali. Ci aspettiamo che questo approccio diventi ampiamente utilizzato nel campo del danno polmonare acuto.
Introduzione
Il danno polmonare acuto (ALI) è una sindrome clinica comune. Sotto una varietà di fattori patogeni, la rottura della barriera fisiologica delle cellule epiteliali polmonari e delle cellule endoteliali vascolari porta ad un aumento della permeabilità alveolare, causando così una diminuzione della compliance polmonare, edema polmonare e grave ipossiemia1. La sindrome da distress respiratorio acuto (ARDS) è la forma più grave di ALI. L'infiammazione incontrollata e il danno da stress ossidativo sono considerati le principali cause di ALI eARDS 2 più grave. Quando le cellule epiteliali alveolari sono direttamente danneggiat....
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Protocollo
Il protocollo di sperimentazione animale è stato esaminato e approvato dal Comitato di gestione dell'Università di medicina tradizionale cinese di Chengdu (record n. 2021-11). Per il presente studio sono stati utilizzati topi maschi C57/BL (20-25 g, 6-8 settimane di età). I topi sono stati tenuti in una camera per animali ed erano liberi di bere e mangiare durante l'esperimento.
1. Preparazione
- Assicurarsi che la piattaforma di intubazione sia composta da una base, un montante, una graffetta, due elastici e alcune corde. Prendi una corda, passa la corda attraverso i due fori nella parte superiore del montante e le....
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Risultati
Il metodo proposto per l'instillazione di LPS nei topi è stato verificato valutando l'espressione della citochina infiammatoria TNF-α e il rapporto peso secco e umido polmonare 12 ore dopo l'instillazione di LPS. C'erano quattro gruppi nell'esperimento: controllo in bianco (senza alcun trattamento), intubazione chirurgica16, intranasale17,18 e intubazione orofaringea non invasiva (n = 6). Rispetto al gruppo.......
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Discussione
Inizialmente, abbiamo guardato all'interno della cavità orale per trovare la posizione della trachea19. Tuttavia, durante questo processo, abbiamo scoperto che la trachea dei topi C57 / BL è stretta, il che rende difficile trovare la posizione corretta con questo metodo senza l'aiuto di apparecchiature come un endoscopio20. Dopo ulteriori esplorazioni, abbiamo scoperto che la luce della lampada dell'intubatore poteva penetrare la superficie del corpo, consentendo all'operat.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China (No.: 81903902), dalla China Postdoctoral Science Foundation (No.: 2019M663457), dal Sichuan Science and Technology Program (No.: 2020YJ0172) e dallo Xinglin Scholar Research Premotion Project dell'Università di Chengdu TCM (No.: QJRC2022053).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Lipopolisaccaride | MERK | L4130 | LPS |
| SHANGHAI GAOGE INDUSTRY AND TRADE CO., LTD | Per fornire | ||
| cannula per topo | RWD Life Science | 803-03008-00 | Cannula per topo |
| Kit per intubazione per topo | RWD Life Science | 903-03027-00 | Compreso una base, un montante, un intubatore, una pinza chirurgica e alcuni stringhe |
| pipetta Pasteur | Biosharp scienze della vita | BS-XG-03 | Per verificare il successo dell'intubazione |
| Pentobarbital sodico | Beijing Chemical Co., Cina | 20220918 | Per anestetizzare i topi |
Riferimenti
- Xia, Y., et al. Protective effect of human amnion epithelial cells through endotracheal instillation against lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice. Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 33 (1), 7-11 (2017).
- Butt, Y., Kurdowska, A., Allen, T. C.
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Ristampe e permessi
