In questo protocollo, è stato preparato un modello di osteoartrite del ginocchio utilizzando il metodo Videman modificato e sono dettagliate le procedure operative e le precauzioni dell'agopotomia. L'efficacia dell'acupotomia è stata dimostrata testando le proprietà meccaniche del quadricipite femorale e del tendine e le proprietà meccaniche e morfologiche della cartilagine.
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Articolo metodologico
Applicazione dell'agopotomia in un modello di osteoartrite del ginocchio nel coniglio
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'artrosi del ginocchio (KOA) è una delle malattie più frequenti nel reparto ortopedico, che riduce seriamente la qualità della vita delle persone con KOA. Tra i diversi fattori patogeni, lo squilibrio biomeccanico dell'articolazione del ginocchio è una delle principali cause di KOA. L'agopotomologia ritiene che il ripristino dell'equilibrio meccanico dell'articolazione del ginocchio sia la chiave per il trattamento della KOA. Studi clinici hanno dimostrato che l'agopotomia può ridurre efficacemente il dolore e migliorare la mobilità del ginocchio riducendo l'adesione, la contrattura dei tessuti molli e i punti di concentrazione dello stress nei muscoli e nei tendini intorno all'articolazione del ginocchio.
In questo protocollo, abbiamo utilizzato il metodo Videman modificato per stabilire un modello KOA immobilizzando l'arto posteriore sinistro in posizione diritta. Abbiamo delineato in dettaglio il metodo di intervento e le precauzioni relative all'agopotomia e valutato l'efficacia dell'agopotomia in combinazione con la teoria di "Modulare Muscoli e Tendini per Trattare i Disturbi Ossei" attraverso la rilevazione delle proprietà meccaniche del quadricipite femorale e del tendine, nonché della meccanica e della morfologia della cartilagine. I risultati mostrano che l'agopotomia ha un effetto protettivo sulla cartilagine regolando le proprietà meccaniche dei tessuti molli intorno all'articolazione del ginocchio, migliorando l'ambiente di stress della cartilagine e ritardando la degenerazione della cartilagine.
Introduzione
L'artrosi del ginocchio (KOA) è la forma più frequente di osteoartrite, spesso riconosciuta come una malattia dell'intera articolazione caratterizzata da degenerazione della cartilagine articolare, che si manifesta clinicamente con dolore, gonfiore e movimento limitato delle articolazioni colpite1. Secondo recenti statistiche epidemiologiche, nel 2020 la KOA avrebbe colpito 654,1 milioni di persone in tutto il mondo di età pari o superiore a 40 anni. La prevalenza e l'incidenza di KOA aumentano con l'età, sono più alte negli adulti di mezza età e negli anziani e colpiscono più donne che uomini2. È probabile che la prevalenza di KOA aumenti a causa dell'invecchiamento della popolazione e dell'epidemia di obesità in tutto il mondo, rappresentando una crescente minaccia per la salute pubblica globale. L'età, il sesso, l'obesità, i traumi e altri complicati fattori di rischio associati alla KOA hanno tutti un impatto diretto sull'instabilità del ginocchio, rendendo uno squilibrio biomeccanico nelle articolazioni del ginocchio una delle cause principali della KOA3.
In condizioni fisiologiche normali, l'articolazione del ginocchio si trova in uno stato di equilibrio meccanico, assicurando che i carichi meccanici nell'articolazione siano distribuiti uniformemente sulla cartilagine. Qualsiasi squilibrio meccanico nell'articolazione del ginocchio può portare a uno stress anomalo nella cartilagine, con conseguente degenerazione della cartilagine e l'insorgenza di KOA4. Il sistema muscolo-tendineo è il principale sistema dinamico che mantiene l'equilibrio meccanico dell'articolazione del ginocchio. Il movimento coordinato del sistema muscolo-tendineo estensore e flessore è in grado di distribuire uniformemente il carico generato dal movimento sulla superficie della cartilagine, evitando lo squilibrio metabolico delle sollecitazioni cartilaginee locali oltre il suo carico fisiologico che si traduce in perdita di cartilagine5. La diminuzione della forza muscolare è la causa principale del disturbo del movimento intramuscolare e del danno alla cartilagine, che può verificarsi prima della KOA sintomatica.
Il KOA può anche indurre l'inibizione muscolare artrosa (IMA), che si manifesta con debolezza muscolare e diminuzione della forza muscolare intorno al ginocchio6. Tra questi muscoli, il gruppo del quadricipite femorale funziona come l'unico estensore del ginocchio, una struttura importante per mantenere la stabilità dell'articolazione del ginocchio. Gli studi hanno dimostrato che una diminuzione dell'area della sezione trasversale del quadricipite e della forza muscolare è significativamente e positivamente correlata con la progressione del KOA7. Il declino della forza del quadricipite influisce sul modello di andatura, sulla stabilità del ginocchio, sui modelli di movimento e su molte altre funzioni. Inoltre, il declino della forza muscolare compromette la funzione tendinea, che si manifesta come una diminuzione della rigidità tendinea, del modulo elastico e di altre proprietà biomeccaniche8. Nella riparazione a lungo termine, possono verificarsi cambiamenti come l'adesione e la contrattura nei muscoli e nei tendini dell'articolazione del ginocchio, danneggiando le loro proprietà meccaniche, causando instabilità articolare e, infine, formando un circolo vizioso di cambiamenti patologici di KOA. È quindi fondamentale che il trattamento con KOA migliori le proprietà meccaniche del sistema muscolo-tendineo e ripristini l'equilibrio meccanico articolare.
Tra le cause di KOA, lo squilibrio biomeccanico è il principale fattore che induce il dolore al ginocchio, la disfunzione, le lesioni infiammatorie e la degenerazione della cartilagine9. Pertanto, la chiave per il trattamento della KOA è ripristinare l'equilibrio biomeccanico dell'articolazione del ginocchio. L'acupotomologia ritiene che l'eziologia e la patogenesi del KOA siano "squilibri meccanici". Quando le caratteristiche meccaniche dei tessuti molli intorno al ginocchio cambiano in modo anomalo, l'articolazione del ginocchio perde il suo equilibrio meccanico e l'ambiente di stress meccanico anomalo dell'articolazione accelera la degenerazione, causando una stimolazione infiammatoria che aggrava ulteriormente le aderenze dei tessuti molli, le contratture e l'ulteriore declino della stabilità articolare. Questo circolo vizioso alla fine si sviluppa in KOA. Allentando le aderenze e le contratture dei tessuti molli, oltre a ridurre la concentrazione di stress nei muscoli e nei tendini, l'agopotomia in combinazione con la teoria della "modulazione di muscoli e tendini per trattare i disturbi ossei" migliora la meccanica dei tessuti molli e "modula muscoli e tendini", bilanciando lo stress meccanico dell'articolazione, alleviando efficacemente la degenerazione della cartilagine e "trattando i disturbi ossei"10. In termini di selezione del modello animale, in base allo scopo di questo studio, abbiamo preparato il modello KOA con il metodo Videman modificato di immobilizzazione dell'estensione dell'arto posteriore sinistro.
Questo documento descrive in dettaglio la creazione del modello KOA utilizzando il metodo Videman modificato per l'immobilizzazione dell'estensione dell'arto posteriore sinistro e il metodo di funzionamento e le precauzioni dell'agopotomia. Dimostriamo l'efficacia dell'agopotomia testando le proprietà meccaniche del quadricipite, del femore e del tendine e rilevando i cambiamenti nello stress e nella morfologia della cartilagine articolare.
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Protocollo
Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati esaminati e approvati dal Comitato Etico Animale dell'Università di Medicina Cinese di Pechino (No. BUCM-4-2022010101-1097). In questo protocollo, 24 conigli neozelandesi maschi di 6 settimane sono stati ospitati in una condizione specifica, vale a dire 20-25 °C, 50-60% di umidità e un ciclo circadiano di 12 ore di luce/12 ore di buio, con libero accesso a una dieta regolare. I conigli sono stati anestetizzati e sacrificati combinando l'anestesia profonda e l'embolizzazione aerea. Il dolore è una delle caratteristiche patologiche tipiche della KOA ed è anche uno degli indicatori chiave utilizzati per valutare i modelli animali di KOA e i metodi di intervento, quindi non vengono utilizzati analgesici durante la preparazione del modello.
1. Il modello di coniglio KOA
- Anestetizzare i conigli con pentobarbital sodico al 3% (30 mg/kg) per via endovenosa al margine dell'orecchio. Per confermare il livello appropriato di anestesia, cercare un riflesso corneale significativamente indebolito o assente e l'assenza di dolore quando si blocca la pelle con una pinza emostatica. Durante l'anestesia, aggiungere 2-3 gocce di lubrificante sugli occhi dei conigli ogni 15 minuti per evitare che gli occhi dei conigli si secchino.
- Dopo l'anestesia, fissare ogni coniglio in posizione supina, tirando l'arto posteriore sinistro in una posizione completamente estesa.
- Fissare l'arto posteriore sinistro di ogni coniglio in posizione estesa.
- Come primo strato, usa del nastro adesivo per coprire la pelle del coniglio dall'inguine all'articolazione della caviglia.
- Come secondo strato, avvolgere un nastro biadesivo in schiuma largo 36 mm sopra il nastro medico e poi avvolgere una benda polimerica dall'inguine all'articolazione della caviglia. Assicurarsi che l'articolazione del ginocchio sia dritta a 180° e che l'articolazione della caviglia sia dorsiflessa di 60°.
- Come terzo strato, immobilizza le articolazioni con piccole stecche nella parte anteriore e posteriore delle articolazioni del ginocchio e della caviglia e avvolgi una rete d'acciaio attorno allo strato più esterno per proteggerti dai morsi. Esporre le dita dei conigli per osservare se la circolazione sanguigna è normale.
- Immobilizzare gli animali per 6 settimane per stabilire il modello KOA (Figura 1).
NOTA: 1) Durante la preparazione del modello, ispezionare gli stampi a giorni alterni. Se alcuni stampi sono allentati o staccati, anestetizzare i conigli e immobilizzare nuovamente gli arti posteriori sinistri in posizione estesa. 2) Stendere dei tappetini protettivi sul fondo delle gabbie per evitare che gli arti dei conigli si incastrino e causino lesioni.
2. Intervento di agopotomia
NOTA: Prima di iniziare l'intervento di agopotomia, anestetizzare i conigli con pentobarbital sodico al 3% (30 mg/kg) mediante iniezione endovenosa del margine auricolare.
- Determinare i punti di trattamento.
- Radere il pelo dell'articolazione del ginocchio dell'arto posteriore sinistro del coniglio.
- Palpare l'inserimento del tendine del muscolo femorale mediale dell'articolazione del ginocchio del coniglio, l'inserimento del tendine del retto femorale, l'inserimento del tendine del bicipite femorale e la borsa a zampa d'oca. Contrassegnare gli indurimenti patologici dei muscoli locali con un marcatore cutaneo sterile. Disinfettare l'articolazione del ginocchio tre volte con cicli alternati di iodoforo medico e alcol medico al 75%.
- Operazione di agopotomia
- Mantenere la lama per agopotomia parallela alla direzione di marcia parallela al tendine e all'asse longitudinale dell'arto.
- Usa il pollice della mano sinistra per premere sulla pelle entrando nel punto di marcatura e spostati lateralmente in modo che i vasi sanguigni e i nervi siano separati sul lato ventrale del pollice.
- Con l'impugnatura per agopotomia nella mano destra, premere rapidamente verso il basso con una piccola forza in modo che la lama per agopotomia passi istantaneamente attraverso la pelle. Far avanzare lentamente la lama per agopotomia fino agli indurimenti muscolari locali ed eseguire tagli longitudinali e oscillazioni laterali.
- Al termine dell'operazione di agopotomia, disinfettare nuovamente l'articolazione del ginocchio e applicare un cerotto.
- Eseguire questa operazione una volta alla settimana per 4 settimane (Figura 2).
NOTA: 1) Se non c'è indurimento o tessuto simile a un cordone ombelicale toccato all'inserzione del tendine del vasto mediale, del vasto laterale, del retto femorale, del bicipite femorale o della borsa anserina, l'ago per acupotomia deve essere utilizzato per rilasciare direttamente le loro inserzioni tendinee. 2) Durante l'intervento di agopotomia, non immobilizzare gli arti posteriori sinistri dei conigli nel gruppo di agopotomia e nel gruppo modello in posizione di estensione.
3. Modulo elastico del quadricipite femorale
NOTA: 1) Questo esperimento ha utilizzato lo strumento diagnostico ecografico con elastografia ad onde trasversali (SWE) in tempo reale per misurare il modulo elastico del quadricipite femorale in vivo in ciascun gruppo di conigli. 2) Il tester deve essere un ecografista esperto nel rilevamento degli ultrasuoni. Durante la misurazione, la sonda a ultrasuoni deve essere posizionata delicatamente sulla superficie cutanea del quadricipite per evitare tensioni muscolari locali. Le misurazioni devono essere effettuate quando l'animale è in uno stato tranquillo, senza lotte o attività. Se l'animale è attivo, attendere che si calmi prima di eseguire il test.
- Radere il pelo per esporre la pelle nella regione del quadricipite dell'arto posteriore sinistro.
- Utilizzare l'ecografia bidimensionale convenzionale per localizzare il quadricipite muscolo-addominale e determinare la regione di interesse (ROI), impostata a una profondità di 1-2 cm.
- Avviare la modalità SWE per l'ispezione.
- Impostare l'area di interesse in modo uniforme su un'area circolare con un diametro di 2 mm e l'area di interesse a ~0,5-1 cm di profondità dalla superficie della pelle.
- Utilizzare lo strumento diagnostico ad ultrasuoni per generare un impulso di forza di radiazione acustica per stimolare il tessuto muscolare e ottenere l'elastografia tissutale.
- Attendere 2-3 secondi affinché l'immagine si stabilizzi, quindi bloccarla. Attivare la funzione Q-BOX dello strumento per misurare il modulo di Young del muscolo quadricipite.
- Attendere che il sistema calcoli automaticamente i valori massimo, minimo e medio (unità: KPa) del modulo di Young del ROI. Seleziona tre ROI alla stessa profondità per tre misurazioni e prendi il valore medio per l'analisi statistica.
NOTA: Il tester deve essere un ecografista esperto nel rilevamento di ultrasuoni. Durante la misurazione, la sonda a ultrasuoni deve essere posizionata delicatamente sulla superficie cutanea del quadricipite per evitare tensioni muscolari locali. Le misurazioni devono essere effettuate quando l'animale è in uno stato tranquillo, senza lotte o attività. Se l'animale è attivo, attendere che si calmi prima di eseguire il test.
4. Misurare la forza di contrazione del quadricipite femorale
NOTA: Dopo la misurazione della forza di contrazione del quadricipite femorale, i conigli sono stati sottoposti a eutanasia mediante embolia gassosa in anestesia.
- Anestetizzare i conigli con pentobarbital sodico al 3% (30 mg/kg) per via endovenosa sul margine dell'orecchio. Per confermare che è stato raggiunto il livello appropriato di anestesia, cercare un riflesso corneale significativamente indebolito o assente e l'assenza di dolore quando si blocca la pelle con una pinza emostatica. Durante l'anestesia, aggiungere 2-3 gocce di lubrificante sugli occhi dei conigli ogni 15 minuti per evitare che gli occhi dei conigli si secchino.
- Esporre i muscoli quadricipiti e collegare il trasduttore di tensione.
- Tagliare la pelle sotto la rotula, lungo l'asse longitudinale dell'arto verso l'alto fino alla base della coscia, e continuare a tagliare la pelle verso l'alto di 3-4 cm. Staccare con cura la pelle e la fascia ed esporre il muscolo. Tagliare il legamento rotuleo e separare con cura i quadricipiti dalla giunzione iliaca, mantenendo i quadricipiti in connessione con l'iliacio.
- Legare le suture chirurgiche alla giunzione tendinea tra la rotula e il muscolo quadricipite. Allunga il muscolo per tutta la sua lunghezza nel suo stato naturale e poi attaccalo al trasduttore di tensione. Mantenere la linea di legatura sul muscolo in linea retta con la linea di legatura sul trasduttore di forza.
- Fissare il trasduttore di tensione alla staffa. Collegare la linea di acquisizione del segnale sul trasduttore di tensione al processore del sistema di acquisizione del biosegnale.
- Misura le prestazioni contrattili del muscolo quadricipite.
- Inserire gli elettrodi parallelamente all'addome del quadricipite ed evitare qualsiasi contatto tra gli elettrodi.
- Premere il pulsante dell'oscilloscopio. Regolare la posizione del trasduttore di forza sulla staffa per mantenere la linea di base a zero. Selezionare i parametri di stimolazione dello stimolatore con un'ampiezza d'onda di 5 ms e un ritardo di 10 ms.
- Utilizzare prima un singolo stimolo e regolare gradualmente l'intensità dello stimolo da zero con un incremento di 0,1 V ogni volta. Osservare i cambiamenti nella curva di contrazione muscolare e nell'ampiezza di contrazione fino a determinare l'ampiezza massima di contrazione singola (Pt) del quadricipite. Registralo per le statistiche successive.
- Usa uno stimolo a grappolo e usa l'ampiezza dello stimolo che induce la massima ampiezza di contrazione singola come linea di base per stimolare continuamente il muscolo e aumentare gradualmente la frequenza dello stimolo. Osservare i cambiamenti nella curva di contrazione muscolare fino a determinare l'ampiezza massima di contrazione (Pt) del quadricipite. Registralo per le statistiche successive.
NOTA: 1) Dopo ogni contrazione muscolare, il muscolo deve essere dato 30 secondi per rilassarsi con la soluzione tampone muscolare che gocciola continuamente sul muscolo. 2) Durante l'operazione, giudicare lo stato dell'anestesia monitorando il riflesso palpebrale, il ritmo respiratorio, il rilassamento muscolare e la risposta al pizzicamento della pelle dei conigli.
5. Le prestazioni meccaniche del tendine del quadricipite
- Pre-elaborazione: il giorno del test, misurare la lunghezza, la larghezza e lo spessore del tendine del quadricipite con un calibro a corsoio e installare uno speciale morsetto antiscivolo nella macchina per prove di fatica. Ripetere il carico e lo scarico 15 volte per la pre-elaborazione.
- Test di rilassamento da sforzo: utilizzare il sensore da 0 N a 100 N, allungarlo a una velocità di 5 mm/min fino a raggiungere la lunghezza richiesta, quindi iniziare a raccogliere dati. Impostare il tempo di acquisizione dei dati del computer da t (0), raccogliendo dati ogni 0,1 s, della durata di 1.800 s. Dopo aver raggiunto il tempo impostato, registrare i dati e le curve.
- Prova di trazione: utilizzare il sensore da 0 N a 100 N e allungarlo a una velocità di 5 mm/min fino al carico massimo fino a quando il provino non viene staccato. Dopo il test, calcolare lo spostamento massimo, il carico massimo e la rigidità del provino.
6. Pressione superficiale di contatto dell'articolazione e pressione per unità di area della cartilagine
- Fissare i campioni di femore e tibia su entrambi i lati in posizione diritta sull'apparecchio ed eseguire un test di precarico. Misura l'intervallo approssimativo dell'articolazione del ginocchio, taglia la carta sensibile alla pressione nella stessa forma e sigillala con pellicola trasparente.
- Posizionare la carta sensibile alla pressione sigillata tra le articolazioni della tibia e del femore ed eseguire un test di pressione sull'articolazione del ginocchio con una pressione di 5 mm/min e una pressione massima di 50 N. Mantenere la pressione per 2 minuti fino a raggiungere i 50 N quando la carta sensibile alla pressione è colorata in modo stabile.
- Dopo 2 minuti, rimuovere la carta sensibile alla pressione, fissare la superficie colorata su un foglio di carta formato A4 e acquisire le immagini con la scala da parte.
- Carica l'immagine sul computer. Utilizzare il software di riferimento per la misurazione dell'area e la misurazione multisegmento per le figure irregolari. Misurare la pressione all'interno e all'esterno delle articolazioni del femore e della tibia e registrare i risultati.
7. Colorazione Safranina O/Fast Green della cartilagine dell'articolazione del ginocchio
- Dopo la fine dell'intervento di agopotomia, prelevare i tessuti del complesso osseo cartilagine-subcondrale e incorporarli in paraffina. Affettare i blocchi di cera tissutale preparati e preparare i vetrini. Deparaffinare i vetrini di tessuto preparati con una soluzione di deceratura ambientale (I) e una soluzione di deceratura ambientale (II) per 15 minuti ciascuno; quindi, immergerli successivamente in xilene ed etanolo anidro (1:1), etanolo anidro (I), etanolo al 95%, etanolo all'85% ed etanolo al 75%, 2-5 minuti ogni passaggio; e infine, immergeteli in acqua distillata per 15 min.
- Eseguire la colorazione.
- Colorare i vetrini con la soluzione Fast Green per 1 min. Durante questo processo, estrarre i vetrini dalla soluzione e osservarli al microscopio fino a quando il tessuto non si colora di verde scuro.
- Separazione del colore: Sciacquare la soluzione Fast Green in eccesso con acqua ultrapura. Immergere rapidamente i vetrini in una soluzione di acido acetico all'1% per 5-10 secondi. Anche in questo caso, sciacquare il vetrino con acqua ultrapura.
- Colorare i vetrini in soluzione di Safranina O per 10-15 minuti fino a quando la cartilagine non si colora di rosso.
- Disidratare e chiarire il tessuto, sigillare i vetrini e osservarli al microscopio.
- Immergere i vetrini in etanolo al 75%, etanolo all'85%, etanolo al 95% ed etanolo al 100% per 3-5 secondi consecutivi.
- Immergere i vetrini in una soluzione decerante ambientale (I) e in una soluzione decerante ambientale (II) per 10 minuti consecutivi. Estrarre i vetrini e far cadere il mezzo resinoso neutro sulla parte anteriore dei vetrini, evitando il tessuto. Posiziona il bordo del vetro di copertura sul vetrino e poi appoggialo lentamente per coprire il balsamo neutro. Rimuovere l'aria ed evitare bolle d'aria. Pulisci lo xilene in eccesso e il balsamo neutro e lascialo riposare per una notte a temperatura ambiente.
- Osservare i vetrini al microscopio e acquisire le immagini. Per ogni gruppo, selezionare sei campioni di cartilagine del ginocchio di coniglio e selezionare in modo casuale quattro diversi campi di visualizzazione per ciascun campione da valutare. Valutare l'istologia della cartilagine di ciascun gruppo secondo il metodo Mankin (Tabella 1).
8. Analisi statistica
- Esprimere i dati come media ± deviazione standard (
± s). - Eseguire l'analisi unidirezionale della varianza (ANOVA) e il test dell'LSD per determinare la significatività statistica di confronti tra più gruppi.
- Si considerino le differenze statisticamente significative quando P < 0,05.
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Risultati
Risultati sperimentali delle proprietà meccaniche del quadricipite femorale e del tendine
Per valutare l'effetto dell'acupotomologia sulle proprietà meccaniche del quadricipite femorale nei conigli con KOA, abbiamo utilizzato rispettivamente l'ecografia elastica a onde trasversali in tempo reale e un trasduttore di tensione muscolare. Rispetto al gruppo di controllo, il modulo di Young del quadricipite femorale nel gruppo KOA è risultato diminuito (P < 0,05). Rispetto al gruppo KOA, il mod...
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Discussione
Un modello animale appropriato è uno dei fattori chiave per raggiungere gli obiettivi sperimentali e chiarire una specifica questione scientifica. Questo studio si basava sulle teorie di "Zongjin che controlla le ossa e lubrifica le articolazioni" e "squilibrio meccanico" in acupotologia, con l'obiettivo di spiegare la connotazione scientifica dietro il trattamento della KOA "modulando muscoli e tendini per trattare i disturbi ossei" nella terapia di agopotomia. In altre parole, l'agopotomia migliora l'ambiente meccanico...
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno conflitti di interesse da rivelare.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China (No.82074523,82104996).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Acupotomia | Beijing Zhuoyue Huayou Medical Devices Co., Ltd. | 0,4 x 40 mm | |
| Connect Cast Nastro di colata ortopedico | Suzhou Connect Medical Technology Co., Ltd. | KCP06 | 15,0 cm x 360 cm |
| Nastro biadesivo in schiuma | Deli Group Co., Ltd. | NO.30416 | 36 mm x 5 iarde x 2,5 mm |
| Soluzione di deceratura ambientale | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. | G1128 | |
| Etanolo assoluto | Beijing Hengkangda Medicine Co., Ltd. | ||
| Soluzione Fast Green | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. | G1031 | |
| Fast grenn FCF | Sigma, America | 2353-45-9 | |
| Macchina per prove di fatica | BOSE, America | Bose Electro Force 3300 | |
| Registratore fisiologico a quattro canali | Chengdu Instrumeny Frctory | RM-6420 | |
| FPD-305E | Fuji, Giappone | ||
| FPD-306E | Fuji, Giappone | ||
| Soluzione di ematossilina | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. | G1005 | |
| Disinfettante medico iodoforo | Shan Dong Lircon Medical Technology Co., Ltd. | ||
| Nastro medico | Shandong Rongjian Sanitary Products Co., Ltd. | 200402 | 1,5 x 500 cm |
| Chengdu Instrumeny Frctory | JH-2204005, 50 g | ||
| Prescale | Fuji, Giappone | ||
| Strumento diagnostico ecografico SWE in tempo reale | SuperSonic Imagine SA, Francia | SuperSonic Imagine AixPlorer | |
| Rhamsan gum | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. | ||
| Safranine O | Sigma,America | 477-73-6 | |
| Safranine O soluzione | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. | G1015 | |
| Pacchetto statistico per le scienze sociali (SPSS) | IBM, America |
Riferimenti
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Ristampe e permessi
