Sono state condotte due serie di valutazioni per valutare l'efficacia dell'etichettatura dell'agone giovanile: studi preliminari nel 2020 e uno studio a lungo termine nel 2021. Valutazioni preliminari di laboratorio sono state condotte presso il PNNL nel novembre 2020 per determinare un metodo preferito per impiantare l'agone americano con un nuovo microtrasmettitore acustico. I prototipi di trasmettitori (n = 4, P1-P4) sono stati accoppiati con diverse posizioni di marcatura (gastrica, pettorale, pelvica e dorsale) per un totale combinato di 4 trattamenti di localizzazione acustica (n = 40 pesci per trattamento, Tabella 1). Tutti i pesci di prova sono stati assegnati in modo casuale a una vasca di trattamento e di contenimento. I pesci di prova sono stati tenuti in 2 vasche di contenimento con un numero uguale di pesci di ciascun trattamento (cioè 20 pesci per trattamento) per vasca per 14 giorni. Per i primi 2 giorni della valutazione, gli aloni sono stati tenuti in acqua salata salmastra (7,5 ppt) e lasciati riprendersi dall'etichettatura e dalla manipolazione. Quindi i serbatoi sono stati passati all'acqua dolce a flusso continuo per il resto del periodo di valutazione.
Per la valutazione preliminare, i pesci marcati e i controlli con pinne tagliate variavano in dimensioni comprese tra 50 e 80 mm di lunghezza della forcella. La sopravvivenza del giovane alosa e la ritenzione del tag sono risultate più elevate per i pesci impiantati tramite un'incisione pettorale rispetto alle altre tecniche di marcatura (Figura 3). Ulteriori valutazioni pilota hanno anche dimostrato che le tecniche di gestione come i trasferimenti da acqua ad acqua e la detenzione dei pesci in acqua salata salmastra prima e dopo eventi stressanti, come l'etichettatura, erano fondamentali per aumentare i tassi di sopravvivenza.
Utilizzando i protocolli di marcatura e manipolazione di successo della valutazione preliminare, nel 2021 è stato condotto uno studio di laboratorio presso il PNNL per valutare la sopravvivenza a lungo termine di 60 giorni e la ritenzione del tag di giovani aloni americani impiantati con un trasmettitore acustico utilizzando il metodo di marcatura dell'incisione pettorale. La valutazione a lungo termine ha utilizzato il trasmettitore fittizio P5 (Figura 4), un prototipo migliorato simile per forma e dimensioni al progetto P1 utilizzato nella valutazione preliminare. Le dimensioni e il peso medi del dummy P5 erano di 7,6 mm di lunghezza × 2,3 mm di diametro e un peso in aria di 0,058 g (deviazione standard 0,002 g), il che ha comportato un carico di tag del <1%. Il prototipo di trasmettitore acustico con componenti funzionali (Figura 4) ha dimensioni di 7,6 mm di lunghezza x 2,0 mm di diametro e un peso in aria di 0,050 g.
Al momento del test, il giovane alosa americana utilizzato nella valutazione a lungo termine era stato tenuto in cattività per 4 mesi. Mentre l'esperimento è stato progettato per avere un numero uguale di pesci da trattamento e di controllo tenuti in due vasche per un periodo di 60 giorni, il numero di aloni rimanenti al momento della marcatura era basso. Pertanto, più shad sono stati assegnati in modo casuale al gruppo di trattamento marcato rispetto al gruppo di controllo per ottenere una migliore comprensione dell'efficacia a lungo termine della tecnica di marcatura su shad. Ciascuna delle due vasche conteneva 27 pesci da trattamento e 9 o 10 pesci di controllo. Tuttavia, poiché la sopravvivenza dal serbatoio A (13,8%) è stata significativamente peggiore rispetto al serbatoio B (78,4%; Test esatto di Fisher, p < 0,001) e non c'è stata alcuna differenza di sopravvivenza tra i gruppi marcati e di controllo all'interno di ciascun serbatoio, solo i risultati per il serbatoio B sono inclusi qui.
Gli shad (lunghezza forcella 69-105 mm; peso 3,9-11,7 g) sono stati marcati con il trasmettitore P5 utilizzando l'incisione pettorale (n = 27) o assegnati al gruppo di controllo (n = 10). I pesci di controllo sono stati manipolati utilizzando le stesse procedure, tra cui il posizionamento sul cuscinetto chirurgico per ~ 20 secondi, ma non hanno ricevuto una clip per pinne o un'incisione né sono stati impiantati con un trasmettitore. Dopo l'etichettatura, entrambi i gruppi di trattamento sono stati tenuti in acqua salata salmastra (7,5 ppt) per 1 giorno e poi sono passati all'acqua fluviale per il resto dello studio. La sopravvivenza a 60 giorni è stata dell'81,5% per il gruppo marcato e del 70% per i controlli non marcati (Figura 5). La sopravvivenza per i pesci marcati in questa valutazione è stata definita sia come sopravvivenza che come mantenimento dei tag perché l'espulsione dei tag non può essere differenziata da un evento di mortalità in uno studio di telemetria. Non c'è stata alcuna differenza significativa nella sopravvivenza tra i due gruppi (test esatto di Fisher, P = 0,884); Tuttavia, la capacità di rilevare una differenza è stata del 38,4% a causa delle piccole dimensioni del campione. Sebbene la capacità di rilevare una differenza tra i trattamenti fosse bassa, i risultati della valutazione a lungo termine mostrano che questo protocollo di manipolazione e marcatura può essere utilizzato con moderato successo per impiantare l'agone americano con trasmettitori acustici.

Figura 1: Serbatoio di recupero post-marcatura riempito con acqua salata salmastra. Un sistema di trasporto aereo fornisce ossigeno al serbatoio statico. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figura 2: Impianto di un trasmettitore acustico di un giovane shad americano. Giovane shad americano (A) con un'incisione pettorale e (B) con il trasmettitore P5 fittizio inserito nell'incisione. Si noti che la bocca dell'agone è parzialmente immersa nell'acqua che scorre dal tubo blu. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figura 3: Percentuale di sopravvivenza su una valutazione preliminare di 14 giorni con un gruppo di controlli non marcati e quattro gruppi marcati di giovani di aloni americani. I trattamenti marcati consistevano in quattro posizioni di marcatura (gastrica, pettorale, pelvica e dorsale) ciascuna abbinata a un prototipo di trasmettitore unico (P1-P4). La sopravvivenza del pesce marcato è stata definita sia come sopravvivenza che come conservazione del tag. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figura 4: Trasmettitori acustici e fittizi per l'etichettatura di giovani shad americani. (A) Microtrasmettitore acustico funzionale e (B) il prototipo di trasmettitore fittizio P5, che è stato utilizzato nello studio di sopravvivenza in laboratorio 60 d. Si noti che i numeri da 4 a 7 sul righello rappresentano i centimetri. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figura 5: Percentuale di sopravvivenza dell'agone americano in uno studio a lungo termine di 60 giorni. Gli shad giovani sono stati sbloccati (Controlli senza marcatura; linea continua) o marcati (Tagged [P5 pettorale]; linea tratteggiata) con un trasmettitore fittizio. La sopravvivenza del gruppo marcato è stata definita sia come sopravvivenza che come ritenzione del tag. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
| Tipo di tag | Posizione del tag | N | Lunghezza forcella (mm) | Peso medio dell'etichetta (DS; g) | Carico tag (%) | Sopravvivenza (%) | Tempo medio per taggare/ritagliare (s) |
| Gamma | Media (DS) |
| P1 | Gastrico | 40 | 50 - 76 | 60 (6.0) | 0.058 (0.003) | 1.5 - 5.2 | 45 | 12 |
| P2 | Pettorale | 40 | 50 - 78 | 60 (7.3) | 0.039 (0.001) | 1.0 - 3.2 | 80 | 23 |
| P3 | Pelvico | 40 | 50 - 70 | 58 (5.3) | 0.039 (0.001) | 1.0 - 4.1 | 55 | 26 |
| P4 | Dorsale | 40 | 50 - 80 | 61 (6.8) | 0.088 (0.004) | 0 | 60 | 57 |
| Controllo | NA (Clip) | 40 | 50 - 80 | 59 (5.7) | NA | 0 | 92.5 | 14 |
Tabella 1: Marcatura e informazioni di sopravvivenza per l'agone americano impiantato con trasmettitori prototipo (P1-P4) o marcato con clip per pinne caudali superiori e caudali inferiori (controllo) come parte della valutazione preliminare. La posizione del tag per il gruppo di controllo non è applicabile (NA) poiché questi pesci hanno ricevuto solo clip per pinne (Clip). Si noti che il tipo di tag P4 era un design a galleggiamento neutro. La deviazione standard (SD) della media è indicata tra parentesi.