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Articolo metodologico

Modello bilaterale di ischemia-riperfusione renale per danno renale acuto nei topi

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DOI:

10.3791/65838

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2 febbraio 2024

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* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Il modello di danno da ischemia-riperfusione (IRI) può essere utilizzato in diverse fasi dello sviluppo del danno renale acuto (AKI), specialmente durante la progressione da AKI a malattia renale cronica (CKD). Qui, descriviamo la procedura per lo sviluppo del modello IRI nei topi tramite un approccio trans-addominale, bloccando i peduncoli renali tramite una clip vascolare per indurre il danno ischemico.

Abstract

Il danno renale acuto (AKI) è definito come un rapido declino della funzione renale, in cui la disfunzione renale persistente progredisce gradualmente verso la malattia renale cronica (CKD) a causa della perdita irreversibile di nefroni e della loro riparazione disadattiva. Negli ultimi anni, l'incidenza dell'AKI è aumentata per quanto riguarda diverse eziologie, tra cui deplezione di volume, sepsi, nefrotossicità, lesioni muscolari e traumi maggiori, in cui la lesione da ischemia-riperfusione (IRI) rappresenta la maggior parte degli episodi. Lo sviluppo del modello IRI nei topi è indotto dal clampaggio chirurgico dei peduncoli renali, che fornisce strumenti potenti e controllabili per modelli preclinici di AKI. È importante sottolineare che il modello IRI viene implementato in diverse fasi dello sviluppo dell'AKI, in particolare nei processi da AKI a CKD. Nonostante il modello IRI sia ampiamente praticato in molti laboratori, una serie di variabili influenzano ancora i risultati di questo modello. Qui, descriviamo la procedura di sviluppo del modello IRI per fornire un metodo ripetibile e affidabile ai ricercatori per esplorare la patogenesi sottostante nello sviluppo di AKI e la progressione di AKI in CKD.

Introduzione

Il danno renale acuto (AKI) è una sindrome clinica grave con morbilità e mortalità significative, definite come un aumento della creatinina sierica di ≥ 0,3 mg/dL (26,5 μM/L) entro 48 ore o un aumento della creatinina sierica a ≥ 1,5 volte il basale entro 7 giorni, o volume delle urine < 0,5 mL/kg/h per 6 ore1, 2,3. Nonostante decenni di ricerca, manca una terapia efficace per l'AKI in grado di alleviare il danno renale o accelerare il recupero renale e una percentuale considerevole di pazienti con AKI progredisce verso la malattia renale cro....

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Protocollo

Topi maschi C57BL/6J di 8 settimane di età e del peso di 25 g sono stati utilizzati per stabilire il modello AKI mediante ischemia-riperfusione bilaterale. Come da studi precedenti, manteniamo la temperatura corporea a circa 36,5 °C-37 °C e la durata dell'ischemia renale è di 30 minuti nell'intervento IRI12,13. Erano necessari un totale di 6 topi per ogni gruppo e i topi azionati da sham fungevano da controlli. Gli esperimenti sugli animali in questo studio sono stati approvati dal Comitato Istituzionale per la Cura e l'Uso degli Animali (IACUC) dell'Università di Zhejiang per....

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Risultati

Stato del rene durante l'intervento chirurgico

La caratteristica dell'ischemia di successo è che il rene cambia gradualmente da rosso a viola intenso entro 1-2 minuti e la riperfusione di successo è caratterizzata dal rene che passa gradualmente dal viola intenso al rosso entro 1-2 minuti.

Istologia del rene dopo l'intervento chirurgico

L'HE e la colorazione con acido periodico di Schiff (PAS) sono i modi.......

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Discussione

In questo articolo, abbiamo fornito una procedura dettagliata sul modello IRI renale, evidenziando successivamente che si tratta di un modello robusto per la progressione di AKI e AKI a CKD. Inoltre, dimostriamo l'impatto dei due principali criteri di danno renale, tra cui l'istologia e la funzione renale.

Diversi punti chiave nelle procedure chirurgiche devono essere enfatizzati per un modello ripetibile e affidabile. Per la chirurgia addominale, si consiglia.......

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Dichiarazioni

Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interesse.

Ringraziamenti

Esprimiamo il nostro apprezzamento a tutti i partecipanti per la loro collaborazione nel presente studio. Questo studio è stato supportato dal finanziamento della Zhejiang Provincial Natural Science Foundation of China (LZ22H050001) e dal programma provinciale di Zhejiang per la coltivazione di talenti di salute innovativa di alto livello a Weiqiang Lin.

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Tagliacapelli per animaliFEIYUBIO19-7002
Siringhe da 1 mlLongreenSR60061
EtanoloMacklinE885996
GarzaFEIYUBIO19-5022
Sistema di monitoraggio omeotermicoWarmmate40 x 50
Porta aghiDKBTCZQ-00160
SpalmatoreRWDR22029-03
Soluzione salina sterileBiosharpBL158A
Forbici per tessutiDKBTDC-YKJ1002
Pinzette per tessutiDKBTDK079904
Clip vascolareStrumenti per la scienza18055-02
Sutura VicrylShanghai Jinhuan4 -0 

Riferimenti

  1. Al-Jaghbeer, M., Dealmeida, D., Bilderback, A., Ambrosino, R., Kellum, J. A. Clinical decision support for in-hospital AKI. J Am Soc Nephrol. 29 (2), 654-660 (2018).
  2. Kellum, J. A., Lameire, N. KDIGO AKI Guideline Work Group. Diagnosis, evaluat....

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Ristampe e permessi

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