Questo studio esamina l'associazione tra l'espressione del gene MLH1 nel sangue periferico e nel cancro del colon, utilizzando un approccio caso-controllo per confrontare i livelli di espressione nei pazienti e nei controlli sani abbinati.
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Articolo metodologico
Questo studio esamina l'associazione tra l'espressione del gene MLH1 nel sangue periferico e nel cancro del colon, utilizzando un approccio caso-controllo per confrontare i livelli di espressione nei pazienti e nei controlli sani abbinati.
L'omologo 1 di MutL (MLH1) è un componente del complesso eterodimerico MutLα che rileva e corregge le discrepanze base-base e i loop di inserzione/delezione causati dalla mancata incorporazione di nucleotidi. In assenza della proteina MLH1, la frequenza dei disallineamenti non riparati aumenta, con conseguente cancro d'organo. L'attuale studio ha cercato di quantificare l'espressione del gene MLH1 e la sua relazione con l'invasione tumorale (T) e l'invasione linfonodale (N) in campioni di sangue di pazienti con cancro del colon-retto (CRC). I campioni di sangue sono stati ottenuti da 36 pazienti con CRC. L'RNA è stato estratto e il cDNA è stato sintetizzato utilizzando un kit. I primer sono stati costruiti utilizzando l'approccio della giunzione esone-esone e i geni MLH1 e β-actina sono stati testati 3 volte utilizzando la reazione a catena della polimerasi in tempo reale (Real-Time PCR). Per analizzare i dati è stato utilizzato un software di analisi dell'espressione genica e un t-test è stato utilizzato per esaminare l'espressione di MLH1 e la sua connessione con le variabili T e N. In questo studio sono stati inclusi 36 pazienti con carcinoma colorettale, di cui 15 (41,6%) donne e 21 (58,4%) uomini, con un'età media di 57,35 ± 4,22 anni e nella fascia di età 26-87 anni. I risultati hanno mostrato che il rapporto di espressione del gene MLH1 nei pazienti è diminuito rispetto a quello negli individui sani e la diminuzione dell'espressione genica nelle diverse fasi della malattia è stata significativa. I risultati di questo studio hanno dimostrato che la riduzione dell'espressione genica di MLH1 ha un ruolo efficace nello sviluppo del CRC.
Il cancro del colon (CRC) è uno dei tipi più comuni di cancro. È la quarta causa di morte correlata al cancro in tutto il mondo1. Il CRC è più frequente nei maschi che nelle femmine ed è da tre a quattro volte più comune nei paesi industrializzati che nei paesi in via di sviluppo. Il tasso di incidenza standardizzato per età (globale) per 1 x 105 di incidenza di CRC è di 19,7 in entrambi i sessi, 23,6 negli uomini e 16,3 nelle femmine2. Studi epidemiologici hanno dimostrato forti associazioni ambientali e di stile di vita con il CRC. L'obesità, la carne rossa/lavorata, il taba....
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Una ricerca caso-controllo è stata condotta presso l'Affiliated Hospital 2 dell'Università di Nantong tra aprile 2021 e maggio 2023. Impegnarsi con il dipartimento amministrativo dell'ospedale per stabilire il quadro di studio. L'approvazione etica è stata ottenuta presentando la proposta di studio al Comitato Etico dell'Università di Nantong. Sono state seguite linee guida etiche per garantire la riservatezza e il consenso informato.
1. Reclutamento dei pazienti e disegno dello studio
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In questo studio, 36 pazienti con cancro del colon sono stati esaminati per l'espressione del gene MLH1 nel sangue periferico e la sua relazione con il cancro del colon. L'analisi delle variabili demografiche ha mostrato che 15 pazienti (41,6%) erano donne e 21 pazienti (58,4%) erano uomini. L'età media dei pazienti era di 57,35 ± 4,22 anni e la fascia di età era di 26-87 anni. Lo stato dell'indice di massa corporea (BMI) dei pazienti ha mostrato che 14 pazienti (38,8%) avevano un BMI normale (18,5 e 24,9 kg/m
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Questo studio è stato condotto con l'obiettivo di indagare l'espressione del gene MLH1 . In questo studio, è stato dimostrato che il livello di espressione del gene MLH1 era diminuito nelle persone malate rispetto alle persone sane. Sulla base di studi sul cambiamento di piega, è stato dimostrato che l'espressione del gene MLH1 in stadio II, stadio III e stadio IV nelle persone malate rispetto alle persone sane ha avuto una diminuzione significativa.
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Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interesse.
Vorremmo esprimere la nostra gratitudine e il nostro apprezzamento a tutti coloro che ci hanno aiutato a completare questa impresa di ricerca.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Attrezzatura per elettroforesi su gel di agarosio | Bio-Rad | Mini-Sub Cell GT | Utilizzato per controllare la qualità dell'RNA |
| Acido etilendiamminotetraacetico (EDTA) | Sigma-Aldrich | E9884 | Utilizzato come anticoagulante per campioni di sangue |
| Spettrofotometro NanoDrop | ThermoFisher Scientific | ND-2000 | utilizzato per determinare la purezza dell'RNA |
| Macchina per PCR in tempo reale | Applicata Biosystems | A34322 | Utilizzato per reazioni RT-PCR |
| Kit di estrazione dell'RNA | Intron Biotechnology Co | #Cat 17061 | Utilizzato per l'estrazione di RNA da campioni di sangue |
| Kit SYBR Green PCR | Thermo Fisher Scientific | 4309155 | Reagenti utilizzati per esperimenti RT-PCR |
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