Articolo metodologico

Elettromiografia a fibra singola stimolata (SFEMG) per la valutazione della trasmissione della giunzione neuromuscolare in modelli di roditori

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DOI:

10.3791/66452

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8 marzo 2024

 ,  , 
1NextGen Precision Health, University of Missouri, 2Department of Physical Medicine and Rehabilitation, University of Missouri, 3Department of Neurology, University of Missouri, 4Department of Medical Pharmacology and Physiology, University of Missouri

In questo articolo

Sommario

In questo studio, dimostriamo un raffinato protocollo di elettromiografia a fibra singola (SFEMG) per consentire la misurazione in vivo della trasmissione della giunzione neuromuscolare (NMJ) in modelli di roditori. Viene descritto un approccio graduale alla tecnica SFEMG per consentire la quantificazione della variabilità e del fallimento della trasmissione NMJ nel muscolo gastrocnemio di ratto.

Abstract

Come collegamento finale tra il sistema nervoso e il muscolo, la trasmissione alla giunzione neuromuscolare (NMJ) è fondamentale per la normale funzione motoria. L'elettromiografia a fibra singola (SFEMG) è una tecnica clinicamente rilevante e sensibile che misura le risposte al potenziale d'azione di una singola fibra muscolare durante le contrazioni volontarie o le stimolazioni nervose per valutare la trasmissione della NMJ. La valutazione e la quantificazione della trasmissione NMJ coinvolge due parametri: jitter e blocking. Il jitter si riferisce alla variabilità dei tempi (latenza) tra potenziali d'azione consecutivi a fibra singola (SFAP). Il blocco indica l'impossibilità della trasmissione NMJ di avviare una risposta SFAP. Sebbene la SFEMG sia un test ben consolidato e sensibile in ambito clinico, la sua applicazione nella ricerca preclinica è stata relativamente rara. Questo rapporto delinea i passaggi e i criteri impiegati nell'esecuzione di SFEMG stimolato per quantificare il jitter e il blocco nei modelli di roditori. Questa tecnica può essere utilizzata in studi preclinici e clinici per ottenere informazioni sulla funzione NMJ nel contesto della salute, dell'invecchiamento e della malattia.

Introduzione

L'elettromiografia a fibra singola (SFEMG) è stata inizialmente sviluppata da Stålberg ed Ekstedt negli anni '60 per identificare e analizzare i potenziali d'azione delle singole fibre muscolari, principalmente per studiare l'affaticamento muscolare1. La SFEMG è la tecnica clinica più sensibile per la valutazione della trasmissione della giunzione neuromuscolare (NMJ)2. La SFEMG viene condotta registrando selettivamente i potenziali d'azione a fibra singola (SFAP)3. La trasmissione della NMJ può essere compromessa a causa di fattori come l'invecchiamento 4,5 e vari disturbi neuromuscolari come la miastenia grave e la sclerosi laterale amiotrofica6. Inoltre, condizioni come l'ischemia, le fluttuazioni di temperatura e l'uso di agenti bloccanti neuromuscolari possono causare carenze nella trasmissione di NMJ, manifestate da un aumento della variabilità della trasmissione di NMJ e da occorrenze di fallimento di NMJ2.

Esistono due approcci alla registrazione della SFEMG: SFEMG stimolata e volontaria. La SFEMG volontaria comporta la registrazione di SFAP da due NMJ forniti dallo stesso assone motore utilizzando un elettrodo ad ago concentrico inserito nel muscolo da testare durante l'attivazione volontaria7. Di conseguenza, la SFEMG volontaria richiede la collaborazione del soggetto e può valutare solo le unità motorie a bassa soglia (quelle attivate durante le contrazioni deboli)3. La SFEMG stimolata utilizza una coppia di elettrodi stimolanti per stimolare gli assoni motori durante la registrazione delle SFAP con un elettrodo ad ago SFEMG inserito nel muscolo da testare7.

Sia nella SFEMG volontaria che in quella stimolata, il jitter e il blocco sono i due parametri utilizzati per valutare e quantificare la trasmissione NMJ8. Il jitter descrive la variabilità della temporizzazione (latenza) tra SFAP consecutivi. Durante la SFEMG volontaria, il jitter viene quantificato valutando le differenze di latenza tra una coppia di SCAP (forniti dallo stesso assone motore) durante da 50 a 100 scariche consecutive. Durante la SFEMG stimolata, il jitter viene quantificato valutando le differenze di latenza tra i tempi di stimolazione e l'insorgenza della SFAP durante 50-100 scariche consecutive. Il blocco indica l'incapacità della trasmissione NMJ di innescare una risposta SFAP e può essere quantificato come la presenza o l'assenza di ciascuna coppia di SFAP durante SFEMG volontario o per ogni NMJ durante SFEMGstimolato 2,7.

Sebbene sia un test consolidato e sensibile in ambito clinico, SFEMG è stato applicato solo raramente nella ricerca preclinica 4,5,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18 . In questo rapporto, descriviamo l'approccio all'esecuzione e all'analisi delle registrazioni SFEMG in modelli preclinici di roditori. Inoltre, presentiamo dati rappresentativi che evidenziano risultati rappresentativi su SFEMG che indicano una compromissione della trasmissione NMJ in seguito alla somministrazione di un agente bloccante neuromuscolare non depolarizzante, il rocuronio.

Protocollo

Tutti i protocolli sono stati approvati ed eseguiti in conformità con le normative stabilite dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali presso l'Università del Missouri.

1. Preparazione degli animali e somministrazione dell'anestesia

  1. Indossare adeguati dispositivi di protezione individuale.
  2. Prima della procedura, misurare il peso del ratto per determinare la dose appropriata per i farmaci basati sul peso e le impostazioni del ventilatore.
  3. Indurre l'anestesia con isoflurano inalato al 3%-5%. Una volta stabilito un livello adeguato di anestesia, posizionare il ratto in posizione prona e mantenere l'anestesia con l'1%-3% di isoflurano inalato.
  4. Verificare l'adeguatezza della profondità dell'anestesia premendo delicatamente il cuscinetto del piede dell'arto posteriore con una pinza per osservare l'assenza di una risposta di ritiro.
  5. Mantenere la temperatura corporea a 37 °C.
  6. Applicare un unguento a base di petrolio approvato dal veterinario sugli occhi per prevenire la secchezza. Monitora la profondità dell'anestesia osservando la frequenza respiratoria e valutando le risposte di astinenza quando applichi pressione al cuscinetto del piede usando una pinza.
  7. Radere l'arto posteriore da valutare con un tagliacapelli. Dopo un'adeguata epilazione, utilizzando del nastro adesivo, posizionare l'arto da studiare con la caviglia fissata a circa 90° di dorsiflessione, il ginocchio in estensione e l'anca in abduzione.
  8. Monitorare continuamente la respirazione e la frequenza cardiaca del ratto durante l'intero esperimento.
    NOTA: Un aumento della frequenza cardiaca è comunemente usato come indicatore di una profondità anestesiologica inadeguata.
  9. Somministrare isoflurano per l'eutanasia del ratto, con una dose del 5% o superiore, fino a quando la respirazione non si è interrotta per almeno 3 minuti. Confermare l'eutanasia per decapitazione.

2. Posizionamento e configurazione dell'elettrodo

NOTA: La trasmissione NMJ del nervo sciatico e del muscolo gastrocnemio viene valutata utilizzando il sistema elettromiografico (EMG). Fare riferimento alla Tabella dei materiali.

  1. Inserire un paio di aghi monopolari isolati da 28 G per stimolare il nervo sciatico con il catodo nella regione dell'arto posteriore prossimale, mentre l'anodo è più prossimalmente all'interno del tessuto sottocutaneo che si sovrappone all'osso sacro.
  2. Assicurarsi che gli elettrodi stimolanti non siano posizionati nelle immediate vicinanze del nervo sciatico o eccessivamente profondi per evitare danni diretti al nervo sciatico o ad altre strutture adiacenti.
  3. Posizionare un elettrodo di terra monouso sull'arto posteriore o sulla coda controlaterale.
  4. Posizionare con cautela un elettrodo ad ago da 25 mm calibro 27 specificamente progettato per EMG a fibra singola, dotato di una superficie di registrazione in materiale platino-iridio nel muscolo gastrocnemio destro. Assicurarsi che gli elettrodi SFEMG siano sterilizzati in autoclave prima di ogni utilizzo per mantenere la sterilità.
  5. Inserire l'elettrodo ad ago SFEMG in parallelo con le fibre muscolari del gastrocnemio per catturare i potenziali d'azione a fibra singola (SFAP).
  6. Evitare danni muscolari durante l'inserimento e la manovra dell'ago SFEMG all'interno del muscolo.

3. Procedura di elettromiografia a fibra singola stimolata (SFEMG)

  1. Applicare una stimolazione a corrente costante al nervo sciatico destro a una frequenza di 10 Hz utilizzando un intervallo di intensità di 0,3-10 mA e una durata dell'impulso di 0,1 ms.
  2. Configurare le impostazioni del filtro all'interno di un filtro a bassa frequenza di 1 kHz e di un filtro ad alta frequenza di 10 kHz. Regola il guadagno da 200 μV a 1000 μV per divisione per facilitare la visualizzazione dei potenziali. Impostare la velocità di scansione a 500 μs per divisione.
  3. Regola l'intensità dello stimolo per attivare e isolare gli SFAP per la registrazione e la successiva analisi.
    1. Per identificare e analizzare una risposta come SFAP, assicurarsi che siano soddisfatti i criteri specifici indicati di seguito: assicurarsi che il tempo di salita dal picco di base alla fase negativa sia inferiore a 500 μs, che l'ampiezza minima (da picco basale a negativo) sia di almeno 200 μV e che la risposta mostri costantemente un comportamento tutto o niente (dimensioni e forma stabili tra le risposte).
      NOTA: È essenziale che le risposte ricorrenti mostrino fasi ascendenti coerenti senza tacche o punti di flesso. Si noti che l'ultimo criterio è fondamentale per distinguere un segnale di qualità dalla somma di più segnali.
  4. Calcolare il jitter, o variabilità della latenza SFAP (tempo tra la stimolazione e la fase di salita del picco negativo di SFAP) tra scariche consecutive, a seguito di almeno 50 stimolazioni (50-100 stimolazioni), e valutare e quantificare il blocco.
    NOTA: Il blocco può essere valutato come la presenza o l'assenza in ciascuna sinapsi o come la percentuale di stimolazioni che non riescono a innescare la generazione di potenziali d'azione di una singola fibra. Il jitter viene calcolato utilizzando la seguente equazione7 (il jitter viene in genere calcolato automaticamente dai sistemi di elettromiografia clinica):
    Diagramma della formula di jitter MCD; Metodo per calcolare il jitter in microsecondi utilizzando intervalli tra impulsi.
    MCD = Valore medio della differenza consecutiva
    IPI = Intervallo interpotenziale
  5. Ripetere la procedura per ulteriori risposte SFAP. In media, valutare 10 sinapsi di ciascun animale per calcolare il jitter e successivamente determinare i valori medi per animale.
  6. Escludere dalle analisi gli SFAP con jitter inferiore a 4 μs per evitare l'inclusione di potenziali che potrebbero essere stati evocati dalla stimolazione muscolare diretta11.
  7. Quando si registrano potenziali che mostrano un blocco intermittente, aumentare l'intensità dello stimolo per verificare che il fallimento della SFAP non sia attribuibile alla stimolazione submassimale.

Risultati

Per dimostrare un aumento del jitter e del blocco nel contesto del fallimento della trasmissione NMJ, la SFEMG stimolata è stata eseguita con e senza somministrazione endovenosa di rocuronio. Il rocuronio è un agente bloccante neuromuscolare ad azione intermedia e non depolarizzante, ampiamente utilizzato in ambito clinico per indurre la paralisi muscolare durante interventi chirurgici o procedure mediche. Funziona legandosi in modo competitivo ai recettori nicotinici dell'acetilcolina all'NMJ19. Prima della somministrazione di rocuronio, il ratto adulto wild-type (Sprague Dawley) è stato preparato e anestetizzato come descritto nel paragrafo 1. A causa della paralisi indotta dal rocuronio, è stato utilizzato un supporto ventilatorio invasivo per ottenere dati rappresentativi (in contrasto con l'approccio tipico per l'anestesia durante le registrazioni SFEMG descritte sopra nella sezione 1). È stato posizionato un tubo endotracheale e la ventilazione è stata mantenuta a 60 respirazioni/min utilizzando una modalità a pressione controllata con una pressione di 17 mmHg e una pressione positiva di fine espirazione di 3 cm H2O mentre erogava isoflurano al 2%-3%. Una volta raggiunto il supporto ventilatorio e l'anestesia, sono stati registrati potenziali d'azione di singole fibre con e senza trattamento con rocuronio (bolo di 0,05 mg/kg di bromuro di rocuronio per via endovenosa). La Figura 1 mostra tre registrazioni rappresentative del potenziale d'azione a fibra singola dallo stesso NMJ in un ratto adulto. La Figura 1A mostra la morfologia tipica di un potenziale d'azione di una singola fibra (dopo una singola stimolazione) con un tempo di salita inferiore a 500 μs dalla linea di base al picco negativo e un'ampiezza minima (picco-picco) di almeno 200 μV. La Figura 1B mostra le caratteristiche di un aumento del jitter e del blocco intermittente dopo l'iniezione di rocuronio. La Figura 1C mostra la normalizzazione del jitter e del blocco dalla stessa sinapsi dopo la risoluzione del blocco NMJ. Per semplicità di visualizzazione, le Figure 1B, C mostrano solo le risposte dopo 9 stimolazioni consecutive. Inoltre, per una migliore comprensione, la Figura 2 mostra un ulteriore esempio di tre potenziali d'azione sovrapposti a singola fibra osservati dopo 10 stimolazioni consecutive, rivelando un aumento del jitter e del blocco.

Per quantificare l'impatto del rocuronio sulla trasmissione di NMJ utilizzando SFEMG stimolato, sono state effettuate registrazioni da 5 NMJ senza alcun trattamento e da 5 NMJ dopo la somministrazione di rocuronio e sono state analizzate per jitter e blocco (Figura 3). Dopo il rocuronio, il jitter (Figura 3A) e il blocco (Figura 3B) sono aumentati in modo significativo.

Grafici del potenziale d'azione a fibra singola che mostrano l'andamento della latenza e dell'ampiezza; Risultati dell'analisi del jitter.
Figura 1: Tre registrazioni elettromiografiche rappresentative a fibra singola dalla stessa giunzione neuromuscolare (NMJ). (A) Esempio di potenziale d'azione di una singola fibra a seguito di una singola stimolazione nervosa che mostra i criteri per l'ampiezza (dal basale al picco negativo di almeno 200 μV) e il tempo di salita (dal basale al picco negativo inferiore a 500 μs) per l'accettazione come potenziale a fibra singola. (B) Esempio di potenziali d'azione sovrapposti a fibra singola dopo 9 stimolazioni consecutive che mostrano un aumento del jitter e del blocco che indicano una ridotta trasmissione NMJ dopo somministrazione di rocuronio (jitter: 68,35 μs). (C) Esempio di potenziali d'azione sovrapposti a fibra singola dopo 9 stimolazioni consecutive che mostrano jitter ridotto e nessun blocco, indicando la normalizzazione della trasmissione NMJ dopo la risoluzione del trattamento con rocuronio (jitter: 21,7 μs). Tracce rappresentative di SFEMG rivelano potenziali d'azione di singole fibre muscolari registrate da una sinapsi sana senza blocco e jitter normale in vista sovrapposta. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Grafico dell'ampiezza del potenziale d'azione a fibra singola; latenza vs ampiezza; evento di stimolazione bloccato.
Figura 2: Tre potenziali d'azione a fibra singola sovrapposti (SFAP) registrati dopo stimolazioni consecutive durante la somministrazione di rocuronio. Tre potenziali d'azione a fibra singola sovrapposti (SFAP) sono stati registrati dopo 10 stimolazioni consecutive durante la somministrazione di rocuronio, indicando un aumento del jitter e del blocco. I valori di jitter per A, B e C erano rispettivamente di 24,3 μs, 46,9 μs e 88,7 μs. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

grafici a barre NMJ jitter e blocco della trasmissione; ritardo medio, percentuale di stimolazione; dati di ricerca.
Figura 3: Valutazione dell'elettromiografia a fibra singola della trasmissione della giunzione neuromuscolare (NMJ) dopo il trattamento con un agente bloccante NMJ non depolarizzante. (A) Durante la somministrazione di rocuronio (0,05 mg/kg), SFEMG ha mostrato una maggiore variabilità della trasmissione (jitter) rispetto alla condizione sana (non trattata: 12,9 μs, IC 95% [7,2-16,9 μs] rispetto a rocuronio: 40,70 μs, IC 95% [34,7-70,7 μs]) (test di Mann Whitney: p = 0,0079). (B) La percentuale di stimolazioni con blocco NMJ da ciascuna sinapsi su SFEMG è stata aumentata rispetto alla condizione sana (non trattata: 0%, IC 95% [0-0%] rispetto a rocuronio: 31%, IC 95% [14,0-59,0%]) (test di Mann Whitney: p = 0,0079). Tutte le misurazioni (jitter e percentuali di stimolazioni con blocco NMJ) sono state ottenute da un singolo ratto, n = 5 sinapsi non trattate e n = 5 sinapsi dopo il trattamento con rocuronio. I dati mostrati come mediana ±intervallo di confidenza al 95%. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Discussione

SFEMG è comunemente usato per i test diagnostici in pazienti con sospette forme autoimmuni, acquisite e genetiche della malattia NMJ. SFEMG è considerato il test più sensibile per la diagnosi del disturbo NMJ, miastenia gravis20,21. La stimolazione nervosa ripetitiva (RNS) è un altro metodo più comunemente utilizzato nei test diagnostici clinici e prevede la stimolazione di un nervo periferico con un treno di stimoli e la quantificazione della risposta sommata del potenziale d'azione muscolare composto del muscolo innervato 5,22. RNS ha costantemente dimostrato di avere una sensibilità significativamente inferiore rispetto a SFEMG23,24. Il vantaggio di SFEMG risiede nella capacità di valutare selettivamente le singole fibre muscolari e quantificare non solo il fallimento della trasmissione NMJ (blocco) ma anche la variabilità (jitter)2,25,26. Sebbene sia un test consolidato e sensibile in ambito clinico, lo SFEMG è stato applicato solo raramente nella ricerca preclinica 4,5,9,10,11,12,13,14,15,16 . I modelli animali di malattie neuromuscolari svolgono un ruolo fondamentale nel determinare i meccanismi alla base delle malattie umane e nello sviluppo di interventi terapeutici. La capacità di applicare misure di esito e biomarcatori, come SFEMG, a diverse specie può semplificare e accelerare la transizione di promettenti scoperte precliniche in studi clinici sull'uomo27. Ad esempio, uno studio multicentrico in Giappone si è concentrato sulla definizione di valori di riferimento per SFEMG utilizzando aghi concentrici in soggetti umani sani. Lo studio ha indicato che i valori di cut-off raccomandati per la MCD individuale erano 58,8 μs per SFEMG stimolato nel muscolo estensore comunicale delle dita (EDC)28. È interessante notare che il muscolo gastrocnemio non è comunemente sottoposto a SFEMG, con l'EDC che è il muscolo più vicino studiato in questo contesto. Di conseguenza, è stato osservato che i valori di jitter che abbiamo ottenuto dai ratti erano inferiori a quelli riportati negli studi clinici. Queste discrepanze suggeriscono che la distribuzione del fattore di sicurezza varia a seconda del muscolo e della specie in esame.

In questo rapporto, presentiamo un approccio graduale all'applicazione di SFEMG stimolato nei roditori, comprese le fasi per la preparazione degli animali, il posizionamento degli elettrodi, la registrazione del potenziale d'azione a fibra singola e le analisi. Inoltre, presentiamo dati rappresentativi in un modello indotto di fallimento NMJ (somministrazione di rocuronio) per aiutare a dimostrare chiaramente i concetti di aumento del jitter e del blocco, nonché il concetto tutto o niente di un potenziale d'azione di una singola fibra nella registrazione SFEMG. In precedenza, in uno studio sperimentale, un ratto senza l'agente bloccante mostrava una variazione minore di MCD (circa 10 μs) senza blocco nei primi 3000 s. Al contrario, un ratto iniettato con 0,08 mg/Kg di vecuronio ha mostrato un aumento del jitter dopo 200 s, portando a un blocco di circa 500 s, con una MCD iniziale di circa 50 μs, coerente con i nostri risultati17. Stabilire il dosaggio corretto di rocuronio nei ratti è stato essenziale per raggiungere il livello mirato di blocco neuromuscolare, mitigando al contempo le potenziali complicanze. Mentre vari studi hanno impiegato dosaggi compresi tra 0,1 mg/kg e 5 mg/kg per indurre la paralisi muscolare 17,29,30, abbiamo optato per un dosaggio di 0,05 mg/kg. Questa scelta si allinea con il riconoscimento che la compromissione della NMJ inizia prima dell'insorgenza della paralisi muscolare.

L'acquisizione di risposte al potenziale d'azione di una singola fibra utilizzando SFEMG comporta diversi passaggi cruciali. In particolare, l'ottenimento di registrazioni selettive richiede la pratica per eseguire diverse attività contemporaneamente, tra cui fornire adeguatamente la stimolazione nervosa e acquisire risposte adeguate. Durante le registrazioni, l'elettrodo di registrazione SFEMG viene inserito con cura e regolato con movimenti piccoli e costanti per ridurre al minimo i traumi muscolari e migliorare la resa. Una volta identificato un potenziale d'azione, è necessario effettuare piccole regolazioni della stimolazione e della posizione dell'elettrodo di registrazione per ottimizzare l'ampiezza e la "nitidezza" del potenziale d'azione della singola fibra (breve tempo di salita). Una volta identificato un potenziale e ottimizzati l'ampiezza e il tempo di salita, i movimenti degli elettrodi devono essere ridotti al minimo per garantire la stabilità delle risposte "tutto o niente". Il posizionamento stabile degli elettrodi è fondamentale, in quanto anche piccoli spostamenti nella posizione dell'ago di registrazione possono comportare fluttuazioni nelle caratteristiche del potenziale d'azione, tra cui forma, ampiezza e latenza. È importante assicurarsi che i potenziali d'azione siano stabili e conformi all'aspetto tutto o niente. La variabilità delle risposte può essere correlata al movimento dell'elettrodo o alla sovrapposizione di più potenziali d'azione a fibra singola da diversi NMJ. Insieme, questi fattori svolgono un ruolo chiave nel raggiungimento della riproducibilità e della misurazione stabile del potenziale d'azione 2,26. Inoltre, escludere dalle analisi gli SFAP con jitter inferiore a 4 μs è un approccio prudente per garantire l'affidabilità dei risultati. Questo criterio rigoroso aiuta a evitare l'inclusione di potenziali che potrebbero potenzialmente essere artefatti indotti dalla stimolazione muscolare diretta, migliorando così l'accuratezza della valutazione11. Un altro fattore importante negli studi sul jitter di stimolazione è la stimolazione subliminale, in particolare in condizioni patologiche, dove molti picchi hanno apparentemente aumentato il jitter. È essenziale fare affidamento sull'operatore per garantire che l'intensità dello stimolo superi la soglia per tutti questi picchi, poiché questa determinazione non può essere effettuata retrospettivamente31.

La tecnica SFEMG stimolata descritta in questo manoscritto utilizza un elettrodo SFEMG specializzato piuttosto che un elettrodo ad ago per elettromiografia concentrica standard. Il nostro elettrodo SFEMG presenta una superficie di registrazione di 0,0005 mm2, in contrasto con la superficie di registrazione di circa 0,019 mm2 di un elettrodo ad ago per elettromiografia concentrica standard di dimensioni pediatriche. Questa distinzione è cruciale, in quanto gli elettrodi ad ago concentrici più grandi, con una minore selettività a causa delle loro superfici di registrazione più ampie, possono essere adatti per SFEMG volontari per catturare coppie di potenziali d'azione apparenti a fibra singola. Tuttavia, nella SFEMG di stimolazione, in cui più assoni o unità motorie sono spesso stimolati contemporaneamente, l'impiego di elettrodi ad ago concentrici più grandi diventa più impegnativo7.

È necessario considerare alcune limitazioni. È anche importante sottolineare che la SFEMG non può accertare il meccanismo alla base di un difetto nella trasmissione neuromuscolare come si può ottenere con registrazioni intracellulari eseguite ex vivo27. Un'altra considerazione essenziale riguardo alla SFEMG è la sua limitazione nella registrazione selettiva da specifici tipi di fibre muscolari. Di conseguenza, è probabile che le registrazioni SFEMG rappresentino una miscela variabile di diversi tipi di fibre muscolari5.

Dichiarazioni

W. David Arnold ha ricevuto finanziamenti per la ricerca da NMD Pharma e Avidity Biosciences ed è consulente per NMD Pharma, Avidity Biosciences, Dyne Therapeutics, Novartis, Design Therapeutics e Catalyst Pharmaceuticals.

Ringraziamenti

Gli autori desiderano ringraziare il Dr. Martin Brandhøj Skov di NMD Pharma per i suoi preziosi consigli sul dosaggio del rocuronio e Arash Karimi del Dipartimento di Ingegneria Biomedica della Stony Brook University per la sua assistenza nei calcoli. Questo studio è stato supportato in parte da finanziamenti da NIH a WDA (R01AG067758 e R01AG078129).

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
  Elettrodo ad ago a fibra singola riutilizzabile da 27 g Elettrododi registrazione a fibra singolaTechnomed202860-000
Siringa in vetro da 2 mlKent Scientific CorporationSOMNO-2ML
Cavo staccabileTechnomed202845-0000per collegare l'elettrodo del registratore alla macchina elettrodiagnostica
Elettrodo a disco monouso da 2" x 2" con elettrocateteriCadwell302290-000elettrodo di terra
aghi monopolari monouso 28 GTechnomed202270-000elettrodi stimolanti il catodo e l'anodo
dell'ago EMG (scatola dell'interruttore Amp/stim)Cadwell190266-200per collegare gli elettrodi monopolari allo stimolatore elettrodiagnostico
Helping Hands clip a coccodrillo con base in ferroRadio Shack64-079Mantenimento del posizionamento degli elettrodi di registrazione 
Isoflurano (flacone da 250 ml)Piramal HealthcareNA
siringa per irrigazione a punta curva monojectCovidien81412012utilizzato per l'applicazione del gel per elettrodi
Sistema di monitoraggio fisiologico PhysioSuite con riscaldamento omeotermico RightTempKent Scientific CorporationPS-RTInclude un cuscinetto riscaldante a infrarossi, una sonda rettale e una sonda di temperatura
del pad Pro trimmer Pet Kit per la toelettaturaOster078577-010-003tosatrici per depilazione
Tubi endotracheali per ratti (16 G)Kent Scientific Corporation
Rocoronium BromideSigmaPHR2397-500MGagente bloccante neuromuscolare
Sierra Summit Sistema EMGCadwell Industries, Inc., Kennewick, WANAsistema elettrodiagnostico portatile
SomnoSuite Low-Flow Sistema di anestesia digitaleKent Scientific CorporationSOMNOInclude adattatore per tappo del flacone anti-fuoriuscita e anti-vapore; Tubo adattatore a Y; filtro per spazzino al carbone
Unguento oftalmico veterinario a base di petrolio Puralube26870applicato durante l'anestesia per evitare lesioni corneali
cavo

Riferimenti

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