È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

Articolo metodologico

Misurazioni di microdurezza su dente e osso alveolare in modelli di malattia orale dei roditori

2K visualizzazioni

⸱

DOI:

10.3791/66583

⸱

26 aprile 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

La microdurezza è una proprietà meccanica e un parametro informativo per la valutazione della fisiopatologia dei tessuti duri. Qui, dimostriamo un protocollo standardizzato (preparazione del campione, lucidatura, superficie piana e siti di indentazione) per l'analisi della microdurezza nell'osso dentale e alveolare in modelli di malattia orale dei roditori, vale a dire, fluorosi dentale e riassorbimento osseo parodontale indotto dalla legatura.

Abstract

La proprietà meccanica, la microdurezza, viene valutata nello smalto dentale, nella dentina e nell'osso nei modelli di malattie orali, tra cui la fluorosi dentale e la parodontite. La micro-CT (μCT) fornisce informazioni di imaging 3D (volume e densità minerale) e la microscopia elettronica a scansione (SEM) produce immagini di microstruttura (prisma dello smalto e lacuna-canalicolare ossea). A complemento dell'analisi strutturale mediante μCT e SEM, la microdurezza è uno dei parametri informativi per valutare come i cambiamenti strutturali alterano le proprietà meccaniche. Nonostante sia un parametro utile, gli studi sulla microdurezza dell'osso alveolare nelle malattie orali sono limitati. Ad oggi, sono stati segnalati metodi di misurazione della microdurezza divergenti. Poiché i valori di microdurezza variano a seconda della preparazione del campione (lucidatura e superficie piana) e dei siti di indentazione, protocolli diversi possono causare discrepanze tra gli studi. La standardizzazione del protocollo di microdurezza è essenziale per una valutazione coerente e accurata nei modelli di malattia orale. Nel presente studio, dimostriamo un protocollo standardizzato per l'analisi della microdurezza nei denti e nell'osso alveolare. I campioni utilizzati sono i seguenti: per il modello di fluorosi dentale, gli incisivi sono stati raccolti da topi trattati con/senza acqua contenente fluoro per 6 settimane; per il modello di riassorbimento osseo parodontale indotto dalla legatura (L-PBR), le ossa alveolari con riassorbimento osseo parodontale sono state raccolte da topi legati sul 2° molare mascellare. A 2 settimane dalla legatura, la mascella è stata raccolta. La durezza Vickers è stata analizzata in questi campioni secondo il protocollo standardizzato. Il protocollo fornisce materiali e metodi dettagliati per l'inclusione della resina, la lucidatura seriale e i siti di indentazione per incisivi e alveolari. Per quanto ne sappiamo, questo è il primo protocollo standardizzato di microdurezza per valutare le proprietà meccaniche del dente e dell'osso alveolare nei modelli di malattia orale dei roditori.

Introduzione

La durezza è una delle proprietà meccaniche (ad esempio, elasticità, durezza, viscoelasticità e comportamento alla frattura) ed è comunemente usata per caratterizzare la capacità di resistere alla deformazione da compressione e alla frattura di un'area locale di un materiale. Il test di durezza dell'indentazione statica è il metodo più utilizzato, inclusa la durezza Vickers e la durezza Knoop1. Il test di durezza Vickers viene implementato premendo un penetratore di diamante nella superficie sotto un carico di prova fisso. Il penetratore è a forma piramidale, con una base quadrata e un angolo di 136° tra le facce opposte. Viene misurata la lung....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Protocollo

Tutte le procedure descritte in questo protocollo sono state eseguite in conformità con le linee guida e i regolamenti per l'uso di animali vertebrati approvati dall'Institutional Animal Care Use Committee (IACUC) dell'Università di Augusta e della Nova Southeastern University, accreditata dall'Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International (AAALAC). Si noti che il Dr. Suzuki è stato impiegato presso l'Università di Augusta dove sono stati completati gli esperimenti sulla fluorosi dentale del topo.

1. Estrazione di incisivi mandibolari in un modello murino di fluorosi dentale

  1. ....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

Modello di fluorosi dentale: la Figura 1 mostra immagini μCT rappresentative degli incisivi nei topi di controllo e trattati con fluoro. Nel controllo (Figura 1B-D), la regione cervicale ha mostrato una densità minerale dello smalto (EMD) inferiore di 1,188 g/cm3 (Figura 1B) rispetto al centro (1,924 g/cm3) e alla punta (1,819 g/cm3; Figura 1C, D.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Discussione

La microdurezza viene eseguita per valutare le proprietà meccaniche dei tessuti duri come denti e ossa. Ad oggi, sono stati segnalati metodi di misurazione della microdurezza divergenti. La maggior parte delle informazioni di misurazione, in particolare le preparazioni dei campioni e i siti di indentazione, sono probabilmente insufficienti. Questo studio si è concentrato sul protocollo di microdurezza per lo smalto e l'osso alveolare nei modelli di fluorosi dentale e malattie parodontali. Per ottenere risultati coerenti .......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Dichiarazioni

Gli autori dichiarano di non avere alcun conflitto di interessi.

Ringraziamenti

La ricerca riportata in questa pubblicazione è stata supportata da JSPS KAKENHI JP21K09915 (MO) e dal National Institute of General Medical Sciences; T34GM145509 (MM) e l'Istituto Nazionale di Ricerca Dentale e Craniofacciale; R01DE025255 e R21DE032156 (XH); R01DE029709, R21DE028715 e R15DE027851 (TK); R01DE027648 e K02DE029531 (MS).

....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Sutura di seta intrecciata 6-0Teleflex
Canica Sistema di chirurgia per piccoli animaliKent Scientific Corporation SURGI 5001
CarbiMet PSA 120/P120Buehler30080120
CarbiMet PSA 60/P60Buehler36080060
CarbiMet PSA 600/P1200Buehler36080600
Castroviejo Micro Ago hilderF.S.T12060-01
Epofix impostazione a freddo incorporamento resinamicroscopia elettronica ScienzaCAT-1237
Fisherbrand 112xx Series Advanced Ultrasonic Cleaner FisherBrandFB11201
Dieta per roditori senza fluoroBio ServF1515  AIN-76A, 1/2" Pellet
in-vivo microCT Skyscan 1176Bruker
Isomet 1000 Sega di precisioneBuehlerMA112180
Lapping film 0.3µ mMaruto instrument co, LTD. Giappone26-4203Alternativa 
A3-0.3 SHT, 3M USA
Pellicola per lappatura 1µ mMaruto instrument co, LTD. Giappone26-4206Alternativa
A3-1 SHT, 3M USA
Pellicola per lappatura 12µ mMaruto instrument co, LTD. Giappone26-4211Alternativa
A3-12 SHT, 3M USA
Pellicola per lappatura 3µ mMaruto instrument co, LTD. Giappone26-4204Alternativa
A3-3 SHT, 3M USA
Pellicola per lappatura 9µ mMaruto instrument co, LTD. Giappone26-4201Alternativa
A3-9 SHT, 3M USA
Microscopio selvatico Leica LeicaLEIC M690
Metaserv 2000 Smerigliatrice a velocità variabile lucidatriceBuehlerNo: 557-MG1-1160
MicroCut PSA 1200/P2500Buehler36081200
MicroCut PSA P4000Buehler36084000
Tester di microdurezza, ALPHA-MHT-1000Z PACE Technologies
SamplKups   1 polliceBuehlerNo: 209178
fluoruro di sodioFisher ScientificS299-100
West cott Stitch ForbiceJEDMEDCat. #25-1180
ZooMed Repti Thern Riscaldatore sottoserbatoio (U.T.H)Zoo Med Laboratories, Inc.RH-4

Riferimenti

  1. Broitman, E. Indentation hardness measurements at macro-, micro-, and nanoscale: A critical overview. Tribol Lett. 65 (1), 23(2017).
  2. Lee, M. J., et al. Sirt6 activation ameliorates inflammatory bone loss in ligature-induce....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Ristampe e permessi

Esplora altri articoli

Test di microdurezzamicrodurezza dentalemodelli orali di roditorifluorosi dentalemalattia parodontaledurezza Vickersinclusione in resinalucidatura serialemicroscopia elettronica a scansione