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Articolo metodologico

Filamento rivestito in silicone artigianale per topi modelli di occlusione dell'arteria cerebrale media

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DOI:

10.3791/67002

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9 agosto 2024

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In questo articolo

Sommario

Questo protocollo descrive un metodo semplice per la creazione di filamenti rivestiti per il modello di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) nei topi utilizzando silicone, suture di nylon e aghi per siringa. Questo metodo consente la produzione di filamenti con un diametro costante e varie lunghezze di avvolgimento del silicone su misura per le esigenze sperimentali.

Abstract

Con l'invecchiamento della popolazione globale, l'ictus ischemico è diventato la seconda causa di disabilità e mortalità in tutto il mondo, ponendo un onere immenso sia sulla società che sulle famiglie. Sebbene trattamenti come la trombolisi endovenosa e gli interventi endovascolari possano migliorare sostanzialmente gli esiti per i pazienti con ictus ischemico acuto, solo una piccola percentuale di individui beneficia di queste terapie. Per far progredire la nostra comprensione della malattia e scoprire trattamenti più efficaci, i ricercatori sviluppano e perfezionano continuamente modelli animali. Tra questi, il modello di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) si distingue come il modello più comunemente utilizzato nella ricerca sulle malattie cerebrovascolari. Il filamento utilizzato in questo modello è fondamentale per il suo sviluppo. Questo protocollo delinea un metodo per creare filamenti con diametri coerenti e lunghezze variabili di rivestimento in silicone. Il modello MCAO prodotto utilizzando questo metodo nei topi C57 ha dimostrato un elevato successo e coerenza, offrendo uno strumento prezioso per indagini su misura nelle malattie cerebrovascolari ischemiche.

Introduzione

L'ictus è una delle cause più diffuse di mortalità e disabilità in tutto il mondo. Gli ictus ischemici ed emorragici sono i principali tipi di evento cerebrovascolare, con ictus ischemici che rappresentano circa l'87% dei casi 1,2,3. Attualmente, esistono due modalità di trattamento per i pazienti con ictus ischemico: terapia farmacologica con attivatore tissutale ricombinante del plasminogeno (rtPA) e trombectomia meccanica. Tuttavia, la finestra terapeutica ristretta e gli ampi criteri di esclusione limitano l'applicazione di questi trattam....

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Protocollo

Tutte le procedure per gli animali hanno aderito alle procedure sperimentali e agli standard approvati dal Comitato Istituzionale per la Cura e l'Uso degli Animali dell'Ospedale Provinciale del Popolo dello Shanxi (numero di approvazione: 2024 Comitato Etico Medico Provinciale n. 64). I topi utilizzati in questo esperimento erano topi maschi C57BL/6, di 8-10 settimane, del peso di 24-26 g. I dettagli dei reagenti e delle attrezzature utilizzate sono elencati nella Tabella dei materiali.

1. Preparazione del filamento

  1. Marcatura del filamento originale: avvolgere l....

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Risultati

Nella creazione del modello MCAO, gli strumenti principali utilizzati per fabbricare i filamenti e i filamenti finiti sono mostrati nella Figura 3. Dopo la produzione del filamento, il modello MCAO viene stabilito inserendo il filamento attraverso l'arteria carotide esterna, con la durata dell'operazione registrata. Il successo della modellazione è definito da un punteggio Longa di 1-3 4 ore dopo il ritiro del filamento. Il peso corporeo viene monitorato quotidianamente dopo l'operazione. I .......

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Discussione

Questo studio dimostra un metodo semplice ed economico per la fabbricazione del filamento, confermando la sua fattibilità nella creazione di un modello MCAO. La lunghezza del rivestimento in silicone del filamento può essere regolata in base alle esigenze sperimentali, offrendo ulteriore flessibilità. La preparazione di un embolo filamentoso da 5 mm ha raggiunto un tasso di successo del 100% senza alcuna insorgenza di emorragia subaracnoidea (SAH) nei topi. Nel gruppo che utilizzava embo.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato sostenuto dalla Wu Jieping Medical Foundation (320.6750.161290).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Siringa da 10 mlHaidike Medical Products Co., Ltd.Strumento per la produzione di filamenti
2,3,5-Trifeniltetrazolio cloruro (TTC)Sigma-AldrichG3005Colorante per colorazione TTC Piastra di
coltura a 24 pozzettiCorning CLS3527Recipiente per colorazione TTC
Ago per siringa da 26 GHaidike Medical Products Co., Ltd.Strumento per la produzione di filamenti
4% paraformaldeideServicebioG1101Fissazione tissutale
6-0 sutura in nylonHaidike Medical Products Co., Ltd.Materiali per la produzione di filamenti
Sistema di anestesia per isofluranoRwd Life Science Co., Ltd.R610 Animale anestetizzato
Generatore di elettrocoagulazione bipolareYirun Medical Instrument Co., Ltd.ZG300Attrezzatura per chirurgia
Bagno d'acqua a temperatura costanteSpring  Fornitore verificato - Instrument Co., Ltd.HH-M6TTC colorazione
unguento per gli occhiGuangzhouH44023098farmaceutico Materiale per la chirurgia
coperta termicaZH Biomedical Instrument Co., Ltd.Mantenere la temperatura corporea
IsofluraneRwd Life Science Co., Ltd.R510-22-10Animale anestetizzato
MeloxicamBoehringer-IngelheimJ20160020Analgesia per animale
Morsetto arterioso microchirurgicoShanghai Jinzhong Surgical Instruments Co., Ltd.W40130Strumento per chirurgia
Pinze a pinza emostatica microchirurgicaShanghai Jinzhong Surgical Instruments Co., Ltd.M-W-0022Strumento per chirurgia
Set di strumenti microchirurgiciRwd Life Science Co., Ltd.SP0009-R Attrezzaturaper chirurgia
Termometro per topiHubei Dasjiaer BiotechnologyFT3400Monitoraggio intraoperatorio della temperatura
Pentobarbital sodicoSigma-AldrichP3761Rasoio animale soppresso
Joyu ElettrodomesticiPHC-920Attrezzatura per chirurgia
Sigillante siliconicoKafuterK-704Materiali per la produzione di filamenti
StereomicroscopioRwd Life Science Co., Ltd.77001SAttrezzatura per chirurgia
Filo di sutura con ago (3-0)Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.F404SUS302Attrezzature per chirurgia
Fornitore verificato -

Riferimenti

  1. Collaborators GBDS. Global, regional, and national burden of stroke and its risk factors, 1990-2019: A systematic analysis for the global burden of disease study 2019. Lancet Neurol. 20 (10), 795-820 (2021).
  2. Kleindorfer, D. O., et al.

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