Qui, presentiamo un metodo mininvasivo e diretto per campionare il sangue durante il sonno in contesti clinici.
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Articolo metodologico
* These authors contributed equally
Qui, presentiamo un metodo mininvasivo e diretto per campionare il sangue durante il sonno in contesti clinici.
I ritmi fisiologici, compresi i ritmi diurni e circadiani, svolgono un ruolo fondamentale per la salute, con disturbi sempre più legati alle malattie cardiovascolari e al diabete di tipo 2. Questi ritmi sono strettamente legati ai cicli sonno-veglia, poiché i cambiamenti nei tempi o nella durata del sonno possono alterare i ritmi diurni e circadiani, interrompendo così l'omeostasi fisiologica. Ulteriori fattori, come la tempistica di comportamenti come l'assunzione di cibo e/o l'attività fisica, possono modulare i ritmi di 24 ore in modi che supportano la salute o promuovono il rischio di malattie croniche.
Nonostante il crescente riconoscimento dell'importanza dei ritmi biologici, l'ottenimento di campioni di sangue seriali necessari per chiarire i modelli nei fattori circolanti rimane una sfida significativa nella ricerca clinica. I metodi di prelievo di sangue di routine possono essere dannosi per il sonno, alterando potenzialmente il sonno e i ritmi biologici e influenzando successivamente le variabili di interesse. Ciò sottolinea la necessità di approcci minimamente invasivi che consentano la valutazione dei processi biologici 24 ore su 24 senza disturbare il sonno o i ritmi biologici.
Per affrontare queste sfide, molti gruppi clinici e di ricerca impiegano una tecnica nota come metodo di campionamento del sangue "attraverso il muro". Questo approccio utilizza tubi estesi collegati a un catetere a permanenza, infilati attraverso una parete o una parete divisoria in una posizione esterna alla stanza del partecipante. Consentendo la raccolta del sangue senza dover entrare nella stanza, questo metodo riduce al minimo le interruzioni, preservando così l'integrità dei profili 24 ore delle variabili circolanti di interesse e disturbando minimamente il sonno.
Qui, forniamo una descrizione dettagliata del metodo di prelievo del sangue attraverso la parete e ne dimostriamo la fattibilità e l'efficacia nella raccolta di campioni di sangue durante le opportunità di sonno programmate. Vengono presentati i dati rappresentativi di uno studio clinico e vengono discusse ulteriori considerazioni, tra cui l'impatto di un prelievo di sangue difficile sull'architettura del sonno.
I ritmi diurni e circadiani sono cicli biologici coinvolti nella regolazione dei processi fisiologici, metabolici e comportamentali nell'arco delle 24 ore. I ritmi diurni sono modelli biologici che seguono un ciclo giorno/notte e sono guidati da segnali ambientali o comportamentali. Al contrario, i ritmi circadiani sono vicini ai cicli di 24 ore in biologia guidati da una rete intrinseca di orologi molecolari, indipendenti da segnali esterni (nota: una spiegazione dettagliata degli orologi circadiani va oltre lo scopo di questo articolo; i lettori interessati sono indirizzati a Cox et al.1 per ulteriori informa....
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I metodi descritti in questo documento sono utilizzati nei protocolli attualmente approvati dall'Institutional Review Board della Colorado State University e dal Colorado Multiple Institutional Review Board. Dati rappresentativi sono stati derivati da tali studi per i quali è stato ottenuto il consenso informato scritto prima della partecipazione. Tutte le forniture e le attrezzature utilizzate sono elencate nella Tabella dei Materiali. Nella discussione vengono presentate ulteriori considerazioni sul metodo.
1. Impostazione e fissaggio della linea di prolunga
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Melatonina 24 ore su 24 utilizzando il prelievo di sangue attraverso la parete durante il sonno
Il metodo sopra descritto consente di valutare i modelli di 24 ore di fattori circolanti che altrimenti non verrebbero rilevati da un singolo campione temporale. La melatonina, un ormone spesso misurato mediante prelievo di sangue attraverso la parete, funge da surrogato più ampiamente accettato per valutare il ritmo dell'orologio circadiano centrale, che risiede nel nucleo.......
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Il metodo di campionamento del sangue attraverso la parete qui presentato è ampiamente utilizzato nel sonno e nella ricerca circadiana per raccogliere il sangue durante il sonno con il minimo disturbo dei partecipanti. Le procedure descritte, tra cui la preparazione, l'impostazione e l'uso della linea di estensione, hanno ampie applicazioni sia in ambito clinico che di ricerca. Utilizzando questa tecnica, i ricercatori possono ottenere con successo campioni di sangue per un periodo di 24.......
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Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Questa ricerca è stata supportata in parte da T32HL149646 a GSM e R01DK125653 e R01HL168081 a JLB. Vorremmo anche ringraziare Stephanie Laing RN, BSN, un'infermiera di ricerca professionale presso il Colorado Clinical & Translational Sciences Institute (CCTSI) e il Centro di ricerca traslazionale clinica dell'Università del Colorado Anschutz Medical Campus per aver esaminato i metodi e fornito approfondimenti e modifiche alla versione finale di questo manoscritto.
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