La somministrazione orale tramite sonda gastrica nei roditori può indurre angoscia associata alla contenzione. Abbiamo esplorato la somministrazione oromucosa/buccale di estratto di cannabis arricchito con CBD, in cui i ratti sono stati trattati per 15 giorni con l'estratto a 3 mg/kg/giorno. I trattamenti sono stati somministrati per via orale con una micropipetta, utilizzando una tecnica di tocco affettuoso per maneggiare gli animali.
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Articolo metodologico
Mucosa orale come metodo alternativo per la somministrazione di prodotti a base di cannabis nei roditori
In questo articolo
Sommario
Abstract
La somministrazione orale di farmaci in roditori da laboratorio come i ratti viene convenzionalmente eseguita utilizzando la tecnica del gavage. Nonostante l'efficacia, la sonda gastrica può indurre angoscia associata alla contenzione, soprattutto in seguito a ripetute manipolazioni di animali. Per mitigare questi effetti avversi e ridurre la morbilità associata ai metodi tradizionali, abbiamo esplorato la somministrazione oromucosa/buccale di estratto di cannabis arricchito con cannabidiolo (CBD). Con questo metodo, i ratti maschi sono stati trattati quotidianamente per 15 giorni con trigliceridi a catena media (MTC) derivati dall'olio di cocco o dall'estratto di cannabis arricchito con CBD. Ogni trattamento è stato somministrato individualmente mentre gli animali sono stati delicatamente immobilizzati utilizzando una tecnica di tocco affettuoso. La somministrazione ha comportato l'utilizzo di una micropipetta per applicare la formulazione oleosa direttamente nella mucosa orale. Il dosaggio è stato calcolato in base alla concentrazione di CBD nell'estratto di Cannabis, standardizzata a 3 mg/kg/die. Per garantire l'accuratezza, gli animali sono stati pesati quotidianamente, consentendo aggiustamenti della dose in base alle variazioni di peso durante il periodo di trattamento. Questo metodo offre un trattamento non invasivo e che riduce lo stress, migliorando potenzialmente il benessere animale in contesti sperimentali. Il trattamento con estratto di cannabis arricchito con CBD è risultato sicuro e l'analisi dell'ippocampo di questi animali ha mostrato alterazioni nei livelli di espressione delle proteine GluA1 e GFAP, che sono direttamente associate rispettivamente alla funzionalità del recettore glutammatergico e alla neuroinfiammazione. Ciò suggerisce che l'estratto di cannabis potrebbe essere applicato in condizioni patologiche in cui si osservano eccitotossicità glutammatergica e astrogliosi.
Introduzione
La somministrazione di medicinali e sostanze con potenziale terapeutico negli animali da laboratorio è ancora una componente fondamentale nel disegno sperimentale della ricerca preclinica. Sebbene i metodi comuni includano iniezioni intraperitoneali, sottocutanee o sonda orale, spesso presentano limitazioni nella loro capacità traslazionale a causa di problemi di benessere indotti dallo stress negli animali 1,2. Inoltre, queste vie di somministrazione non sempre riflettono la via che sarà raccomandata per l'uso nell'uomo, influenzando potenzialmente l'applicabilità dei risulta....
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Protocollo
La ricerca è stata condotta in conformità con gli standard etici. Tutte le procedure sono state approvate dal Comitato Etico sull'Uso degli Animali nella Ricerca (CEUA) del Centro di Scienze della Salute (CCS) dell'Università Federale di Rio de Janeiro (UFRJ); CEUA: 079/22 (codice protocollo 014/19, approvato il 27 marzo 2019).
1. Calcolo del dosaggio in base al peso dell'animale
- Prima di iniziare il protocollo di somministrazione, dividere i ratti Wistar maschi (Rattus norvegicus) all'età di 45-60 giorni dopo la nascita in gruppi di trattamento. Un gruppo ha ricevuto t....
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Risultati
La metodologia è stata precedentemente utilizzata dal nostro gruppo. Questo studio indaga gli effetti a lungo termine dell'estratto di cannabis arricchito con cannabidiolo, concentrandosi sulla crescita, sul comportamento e sui cambiamenti sinaptici. La somministrazione per mucosa orale di un estratto di cannabis arricchito con CBD alla dose di 3 mg/kg/die non ha influenzato negativamente la crescita degli animali dall'adolescenza alla prima età adulta. I parametri fisiologici chiave, tr.......
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Discussione
Il protocollo descritto offre un approccio raffinato alla somministrazione per mucosa orale di estratti di Cannabis nei ratti, presentando un notevole vantaggio di essere confortevole sia per l'operatore che, soprattutto, per l'animale, fornendo benessere, sicurezza e controllo preciso sulla dose somministrata per un assorbimento efficace. La via della mucosa orale è economica e relativamente sicura, e alcuni animali possono essere addestrati a cooperare volontariamente.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano che non sussistono conflitti di interesse in merito alla pubblicazione di questo articolo.
Ringraziamenti
Gli autori riconoscono il supporto del team presso la struttura per animali situata nel Laboratorio Intermedio di Biofisica Cellulare. L'apprezzamento è esteso anche al Comitato Etico per l'Uso degli Animali dell'Università Federale di Rio de Janeiro per la loro supervisione. Questo lavoro è stato finanziato dal Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), dalla Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ) e dal Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Estratto di cannabis arricchito con CBD | Progetto Farmacannabis - Università Federale di Rio de Janeiro (UFRJ) | x | Concentrazioni di cannabinoidi: CBD = 24,0 mg/mL; ?9-THC = 1,0 mg/mL; CBDA = 0,5 mg/mL; Non sono stati rilevati THCA e CBN. |
| Guanti | NUGARD | CA 41.485 | Materiale in gomma sintetica (nitrile) |
| Micropipetta | Labmate pro/LabMate+ | LMP-200 | 20-200ul |
| Soluzione oleosa di trigliceridi a catena media (MCT) | MCT; MTC cerebrale, Puravida | 7907981000102 | Uso come soluzione per veicolo |
| Scala | 123 util | 1783912 | La sensibilità minima e massima è rispettivamente di 1 g e 10 kg |
Riferimenti
- Miguelena Chamorro, B., Swaminathan, G., Mundt,, Paul, S. Towards more translatable research: Exploring alternatives to gavage as the oral administration route of vaccines in rodents for improved animal welfare and human relevance. Lab Animal. 52, 195-197 (2023).
- Vanhecke, D., Bugada, V., Steiner, R., Polić, B., Buch, T.
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Ristampe e permessi
