Per valutare efficacemente la funzione vascolare ovarica e comprenderne il ruolo nella fisiologia e nella patologia ovarica, gli approcci non invasivi in vivo sono essenziali per catturare i cambiamenti in tempo reale senza interrompere il normale flusso sanguigno. L'ecografia Doppler è uno strumento consolidato e non invasivo per valutare il flusso sanguigno ovarico nelle specie più grandi, ma la sua applicazione è stata limitata nei topi, che sono uno dei modelli animali più utilizzati per la ricerca in biologia ovarica, come l'ovulazione. L'ovulazione è un processo strettamente regolato che dipende dalla maturazione follicolare coordinata stimolata dall'ormone follicolo-stimolante, seguita da un picco preovulatorio dell'ormone luteinizzante (LH) che porta alla rottura della parete del follicolo e al rilascio di ovociti per la fecondazione. Il picco di LH innesca anche una serie di cambiamenti strutturali e funzionali nel sistema vascolare ovarico (rimodellamento vascolare), come l'angiogenesi e la costrizione dei capillari nel sito di rottura follicolare poco prima dell'ovulazione. Inoltre, un rapido aumento del flusso sanguigno ovarico a seguito del picco di LH è stato riportato in più specie, ma non nei topi. Questo protocollo utilizza l'ecografia Doppler per visualizzare la vascolarizzazione ovarica murina e quantificare i parametri emodinamici. Il protocollo qui presentato riporta metodi dettagliati per il priming ormonale, l'anestesia, il posizionamento del topo, l'identificazione dell'ovaio e della sua vascolarizzazione utilizzando la potenza e il color Doppler e la misurazione della velocità del flusso sanguigno e dei parametri di resistenza. Questo metodo consente la valutazione longitudinale in tempo reale della funzione vascolare ovarica in topi vivi, fornendo un potente strumento per studiare la funzione vascolare ovarica sia in contesti fisiologici che patologici.