Articolo metodologico

Ecografia Doppler per l'imaging dal vivo e la quantificazione della funzione vascolare ovarica nei topi

DOI:

10.3791/69169

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14 novembre 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Animal Science, Cornell University, 2Biotechnology Resource Center Imaging Facility, Cornell University

In questo articolo

Sommario

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I cambiamenti nel flusso sanguigno ovarico durante il periodo preovulatorio sono essenziali per l'ovulazione. L'ecografia Doppler è stata utilizzata nell'uomo e negli animali di grossa taglia per valutare l'emodinamica e la perfusione ovarica. Viene presentato un protocollo per l'applicazione dell'ecografia Doppler per valutare l'emodinamica ovarica durante le fasi preovulatorie e periovulatorie nei topi.

Abstract

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Per valutare efficacemente la funzione vascolare ovarica e comprenderne il ruolo nella fisiologia e nella patologia ovarica, gli approcci non invasivi in vivo sono essenziali per catturare i cambiamenti in tempo reale senza interrompere il normale flusso sanguigno. L'ecografia Doppler è uno strumento consolidato e non invasivo per valutare il flusso sanguigno ovarico nelle specie più grandi, ma la sua applicazione è stata limitata nei topi, che sono uno dei modelli animali più utilizzati per la ricerca in biologia ovarica, come l'ovulazione. L'ovulazione è un processo strettamente regolato che dipende dalla maturazione follicolare coordinata stimolata dall'ormone follicolo-stimolante, seguita da un picco preovulatorio dell'ormone luteinizzante (LH) che porta alla rottura della parete del follicolo e al rilascio di ovociti per la fecondazione. Il picco di LH innesca anche una serie di cambiamenti strutturali e funzionali nel sistema vascolare ovarico (rimodellamento vascolare), come l'angiogenesi e la costrizione dei capillari nel sito di rottura follicolare poco prima dell'ovulazione. Inoltre, un rapido aumento del flusso sanguigno ovarico a seguito del picco di LH è stato riportato in più specie, ma non nei topi. Questo protocollo utilizza l'ecografia Doppler per visualizzare la vascolarizzazione ovarica murina e quantificare i parametri emodinamici. Il protocollo qui presentato riporta metodi dettagliati per il priming ormonale, l'anestesia, il posizionamento del topo, l'identificazione dell'ovaio e della sua vascolarizzazione utilizzando la potenza e il color Doppler e la misurazione della velocità del flusso sanguigno e dei parametri di resistenza. Questo metodo consente la valutazione longitudinale in tempo reale della funzione vascolare ovarica in topi vivi, fornendo un potente strumento per studiare la funzione vascolare ovarica sia in contesti fisiologici che patologici.

Introduzione

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L'ovaio è un organo altamente vascolarizzato e i cambiamenti ciclici, strutturali e funzionali strettamente regolati nella sua vascolarizzazione (rimodellamento vascolare) sono essenziali per la normale fisiologia ovarica, compreso lo sviluppo dei follicoli, l'ovulazione e la formazione del corpo luteo 1,2,3,4. Il rimodellamento vascolare comprende una serie di processi coordinati come i cambiamenti nella permeabilità vascolare, l'angiogenesi, la vasodilatazione, la vasocostrizione e i cambiamenti nel flusso sanguigno (emodinamica). Questi processi consentono all'ovaio di regolare rapidamente l'afflusso di sangue in risposta ai segnali ormonali durante il ciclo estrale 1,2,3,5,6,7,8,9. Le interruzioni del rimodellamento vascolare e del flusso sanguigno ovarico compromettono l'ovulazione e sono implicate in disturbi della fertilità come la sindrome dell'ovaio policistico 2,3,10,11. Allo stesso modo, è stato dimostrato che l'obesità interrompe l'angiogenesi e riduce l'espressione di mediatori vascolari come l'endotelina-212,13. Inoltre, la sindrome da iperstimolazione ovarica, una complicanza per lo più associata alla stimolazione ovarica attraverso il trattamento con gonadotropine durante la fecondazione in vitro, presenta spesso un aumento del flusso sanguigno stromale nell'ovaio, sottolineando le conseguenze dannose della funzione vascolare disregolata14. Collettivamente, queste condizioni evidenziano il ruolo centrale del rimodellamento vascolare ovarico nel mantenimento della fertilità femminile e sottolineano l'importanza dell'emodinamica nel sostenere la funzione ovarica.

Una valutazione accurata della funzione vascolare ovarica richiede la misurazione in tempo reale dell'emodinamica senza alterare l'ambiente fisiologico. Nell'uomo e nei modelli animali di grandi dimensioni come bovini, ovini ed equini, l'ecografia Doppler è uno strumento ampiamente utilizzato e non invasivo per valutare il flusso sanguigno ovarico e l'architettura vascolare 15,16,17,18. Questa tecnica consente l'analisi dinamica della vascolarizzazione ovarica e cattura i cambiamenti ormonali nel flusso sanguigno, offrendo preziose informazioni sulla funzione e la disfunzione ovarica 15,16,17,18.

Nonostante l'ampio uso di topi di laboratorio come modello per la ricerca in biologia ovarica a causa del loro breve ciclo riproduttivo e della trattabilità genetica, i metodi non invasivi in vivo per studiare il flusso sanguigno ovarico in questo modello rimangono limitati19,20. Gli approcci esistenti si basano su procedure altamente invasive che richiedono l'esternalizzazione dell'ovaio (microscopia intravitale) o su tecniche come l'approccio CLARITY o l'imaging a montaggio intero che mancano di risoluzione temporale e interrompono il contesto fisiologico 1,2,3,4. Essendo il modello di mammifero più utilizzato per la manipolazione genetica e gli studi riproduttivi, il topo rappresenta un'opportunità per esplorare i meccanismi molecolari dell'emodinamica ovarica e valutare interventi mirati. Ciò evidenzia la necessità di approcci di imaging non invasivi, longitudinali e quantitativi per monitorare i cambiamenti vascolari ovarici dinamici in vivo.

Il processo ovulatorio, un evento centrale nella fertilità femminile, esemplifica l'importanza del rimodellamento vascolare ovarico nella fertilità femminile. Inizia con la maturazione follicolare indotta dall'ormone follicolo-stimolante (FSH) e culmina con il picco di LH che innesca la rottura follicolare e il rilascio di ovociti1. Dopo la stimolazione con gonadotropina corionica equina (eCG), che imita gli effetti dell'FSH, la rete vascolare ovarica si espande2. Questa crescita vascolare progredisce verso l'esterno dal midollo ovarico verso la corteccia per sostenere i follicoli in via di sviluppo2. Poco prima dell'ovulazione, i vasi sanguigni si estendono nello strato cellulare della granulosa e si osserva una vasocostrizione localizzata all'apice follicolare, il sito dell'eventuale rottura e del rilascio di ovociti3. Questi cambiamenti vascolari coordinati sono fondamentali per il successo dell'ovulazione 1,2,3. Studi Doppler su modelli animali di grandi dimensioni e sull'uomo hanno rivelato cambiamenti nell'emodinamica durante il periodo preovulatorio, tra cui un rapido aumento della perfusione ovarica e una ridistribuzione localizzata del flusso sanguigno all'interno del follicolo preovulatorio, caratterizzata da un aumento del flusso alla base (più vicino allo stroma ovarico - opposto all'apice) e una diminuzione del flusso all'apice16. L'aumento della velocità del flusso sanguigno ovarico immediatamente dopo il picco di LH è stato associato a un'ovulazione riuscita nelle donne15. Tuttavia, nessuno studio ha ancora tracciato longitudinalmente questi cambiamenti emodinamici nell'ovaio murino intatto, limitando la nostra comprensione del rimodellamento vascolare in questo modello ampiamente utilizzato.

Per colmare questa lacuna, presentiamo un protocollo per l'ecografia Doppler che consente la visualizzazione non invasiva dell'ovaio murino e della sua vascolarizzazione, insieme alla quantificazione dell'emodinamica ovarica, compresi gli indici di velocità e resistenza. Sebbene la sonda MS-700 utilizzata in questo studio abbia una risoluzione limitata (assiale/laterale: 30/58 μm), che impedisce un'analisi dettagliata dei capillari, consente comunque una chiara visualizzazione e quantificazione dei principali vasi sanguigni ovarici. L'uso di agenti di contrasto in applicazioni future potrebbe migliorare ulteriormente la visualizzazione vascolare. Nel complesso, questo approccio consente misurazioni longitudinali ripetute nello stesso animale in punti temporali definiti, ad esempio durante il periodo preovulatorio, preservando al contempo l'integrità fisiologica, un vantaggio chiave rispetto alle tecniche invasive esistenti.

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Protocollo

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Tutti i topi utilizzati sono stati mantenuti in stretta conformità con la Guida del National Institute of Health per la cura e l'uso degli animali da laboratorio, con l'approvazione etica del Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali della Cornell University. Tutti gli animali utilizzati in questo protocollo erano topi C57BL6 immaturi (21-23 giorni).

1. Stimolazione ormonale per la superovulazione

  1. Iniettare topi di 21-23 giorni del peso di 10-12 g per via intraperitoneale con 5 UI di gonadotropina sierica (PMSG) di cavalla gravida seguite da 5 UI di gonadotropina corionica umana (hCG) 48 ore dopo. Preparare ogni iniezione diluendo 50 μL di ormone (ricostituito da un flaconcino da 5000 UI) in 950 μL di soluzione fisiologica sterile tamponata con fosfato e somministrare 0,1 mL per topo.

2. Sequenza di accensione della macchina a ultrasuoni e configurazione del trasduttore

  1. Accendere l'alimentazione principale situata sul retro del sistema di imaging. Dopo l'avvio del sistema, attivare l'interruttore di standby del computer sul lato sinistro del carrello per riattivare il monitor e il computer.
  2. Collegare il trasduttore desiderato (MS-700 utilizzato qui - 30-70 MHz) alla porta del trasduttore attiva sull'unità di imaging (porta più a destra). Allineare il perno di bloccaggio sul connettore del trasduttore con la tacca nella porta, quindi spingere completamente il connettore e ruotare la leva di bloccaggio in posizione verticale per fissarlo.
  3. Avvia il software di analisi facendo clic sull'icona del software. Una volta che il programma si apre e il trasduttore è stato rilevato (automaticamente), selezionare il pacchetto di applicazione dell'ovaio . Fare clic su Nuovo per creare un nuovo studio e scegliere il nome appropriato dal menu a discesa. Nella finestra Informazioni studio , inserire i campi obbligatori: Nome studio; Nome della serie; Pacchetto di applicazione: Ovaio; Pacchetto di misurazione: Vascolare.

3. Anestesia, preparazione del topo e allestimento del palco ad ultrasuoni

  1. Accendere l'unità di monitoraggio fisiologico (temperatura e frequenza cardiaca). Assicurarsi che la piattaforma sia riscaldata (37 °C).
  2. Verificare che il livello di isoflurano sia superiore alla linea di riempimento minimo sul serbatoio del vaporizzatore. Se necessario, aggiungere isoflurano utilizzando adeguati dispositivi di protezione individuale. Aprire la valvola della bombola di ossigeno lentamente e completamente. Impostare la portata di ossigeno a 1 litro al minuto.
  3. Regolare il rubinetto sul tubo del raccordo a Y per consentire all'ossigeno e all'isoflurano di fluire nella camera di induzione. Assicurarsi che il rubinetto che porta al cono anteriore sulla piattaforma del mouse sia chiuso durante questo passaggio. Imposta la manopola del vaporizzatore in modo che fornisca il 3-4% di isoflurano (vol/vol) per l'induzione.
  4. Posizionare il mouse nella camera di induzione e chiudere bene il coperchio.
    NOTA: La camera di induzione è funzionalmente ermetica. Non lasciare mai un animale in una camera stagna senza flusso di gas attivo.
  5. Preparare la piattaforma di imaging applicando una piccola quantità di crema per elettrodi su ciascuno degli elettrodi per garantire un contatto corretto per il monitoraggio della frequenza cardiaca.
  6. Una volta che l'animale è completamente sedato, reindirizzare il flusso di gas aprendo il rubinetto verso il cono anteriore sulla piattaforma di imaging e chiudendo il rubinetto verso la camera di induzione.
  7. Trasferire delicatamente il mouse sulla piattaforma di imaging riscaldata. Posizionare il mouse in posizione prona (lato dorsale rivolto verso l'alto) (Figura 1A). Posiziona saldamente il cono del naso sul naso dell'animale, assicurandoti che sia il naso che la bocca siano coperti per mantenere l'anestesia. Fissare con nastro adesivo ogni piede nella crema per elettrodi sul cuscinetto dell'elettrodo corrispondente per il monitoraggio fisiologico. Applicare un unguento oftalmico per prevenire l'essiccazione corneale durante l'anestesia.
  8. Ridurre la concentrazione di isoflurano all'1,5-2,0% per mantenere l'anestesia ruotando la manopola verso sinistra. Confermare un'adeguata profondità di anestesia utilizzando il metodo del riflesso del pizzicamento delle dita dei piedi (non si deve osservare alcun ritiro). Monitorare attentamente i segni vitali dell'animale ogni 5 minuti durante la sessione di imaging: (i) frequenza respiratoria; (ii) frequenza del battito cardiaco; (iii) eventuali movimenti che possano indicare disagio; e (iv) assicurarsi che la piattaforma di imaging sia riscaldata alla temperatura corretta.
  9. Preparare il quadrante inferiore destro della schiena radendo l'area con un rasoio elettrico. Radersi dall'arto posteriore destro fino alla linea mediana della schiena, rimanendo appena lateralmente alla colonna vertebrale. Applicare uno strato sottile di crema depilante per il corpo sulla zona precedentemente rasata per 30-1 minuto per rimuovere i peli rimanenti. Pulire accuratamente con una garza umida. Applicare uno strato generoso e uniforme di gel per ultrasuoni sulla regione rasata per garantire un accoppiamento acustico ottimale.
  10. Posizionare la sonda del trasduttore in modalità trasversale rispetto al mouse nel supporto meccanico con la tacca di orientamento rivolta a sinistra dell'operatore. Fissare la sonda in posizione utilizzando il morsetto.

4. Identificazione dell'ovaio e dei vasi sanguigni ovarici mediante ecografia Doppler

  1. Sul pannello di controllo, premere il tasto B-Mode per attivare la finestra di imaging standard in scala di grigi, che consente la visualizzazione delle strutture anatomiche.
  2. Abbassare delicatamente il trasduttore sull'area rasata rivestita con gel per ultrasuoni.
    1. Assicurarsi che la piattaforma di imaging e il mouse siano posizionati in piano (parallelamente alla superficie del banco) e che il trasduttore sia abbassato perpendicolarmente (angolo di 90° - verticale) al mouse e alla piattaforma (Figura 1A).
    2. Per localizzare l'ovaio, tirare la pelle verso sinistra, quindi posizionare il trasduttore vicino alla regione superiore del quadrante rasato, più vicino alla linea mediana della schiena. Allineare il bordo sinistro della sonda adiacente alla spina dorsale, con il bordo destro che si estende leggermente oltre il fianco laterale destro.
  3. Per identificare l'ovaio, rilevare prima il rene, una grande struttura ovoidale grigio chiaro (5 mm × 6 mm) con corteccia e midollo visibili. Quindi spingere leggermente in avanti la piattaforma di imaging (verso la testa del topo), facendo apparire l'ovaio e il tessuto adiposo periovarico (POAT).
    NOTA: L'ovaio è una piccola struttura circolare, ipoecogena (grigio scuro), di circa 1 x 2 mm (allo stadio preovulatorio), situata lateralmente al midollo spinale. Il POAT appare iperecogeno (bianco brillante).
  4. Per acquisire e archiviare video dell'ovaio in modalità B, attendere che il numero di fotogrammi aumenti (fino a 100 fotogrammi) e premere il pulsante Cine Store sulla tastiera.
  5. Per confermare l'identificazione delle ovaie e visualizzare i vasi sanguigni con un'elevata sensibilità al flusso a bassa velocità, passare dalla modalità B alla modalità power Doppler premendo il tasto designato sul pannello di controllo.
  6. Regolare le seguenti impostazioni di potenza Doppler per una visualizzazione ottimale della vascolarizzazione ovarica ruotando le manopole sulla tastiera: Guadagno Doppler: 32-55 dB; Sensibilità: 5; Gamma dinamica: 15 DR; Velocità 1 kHz.
    NOTA: I valori possono essere viewed sul pannello laterale sinistro e cambieranno quando si ruotano le manopole
  7. In modalità Power Doppler o Color Doppler (premere il tasto designato sulla tastiera), identificare i seguenti vasi muovendo delicatamente la piattaforma avanti e indietro per visualizzare diversi aspetti del sistema vascolare: (i) L'arteria ovarica (OA), che si ramifica dall'aorta addominale e proviene dalla direzione del POAT per entrare nell'ilo ovarico; ii) i vasi midollari (MV) all'interno del midollo centrale; e (iii) i vasi corticali (CV) che circondano i follicoli in via di sviluppo nella corteccia esterna (Figura 1B).
    NOTA: I vasi corticali potrebbero non essere costantemente visibili a causa del loro piccolo diametro e della bassa velocità del flusso. I vasi alla base del follicolo sono più facilmente rilevabili, mentre quelli all'apice spesso non sono visibili, in particolare subito prima dell'ovulazione.
  8. Premi Cine store per acquisire video dell'ovaio e della sua vascolarizzazione in modalità power o color Doppler in qualsiasi momento per salvare il video attualmente visualizzato sullo schermo.
  9. Per distinguere tra flusso arterioso e venoso, premere il tasto Modalità Color Doppler sulla tastiera. In questa modalità, la direzione del flusso è codificata a colori: il rosso indica il flusso verso il trasduttore, mentre il blu indica il flusso lontano da esso. Il vaso con la velocità media più elevata è l'arteria ovarica.
  10. I cambiamenti nella perfusione sanguigna possono essere apprezzati in modalità color o power Doppler visualizzando le dimensioni dei vasi sanguigni e l'intensità del colore (giallo in power Doppler, rosso o blu in color Doppler).

5. Valutazione dell'emodinamica con ecografia color e power Doppler

  1. In modalità Color Doppler o Power Doppler, premere il pulsante Pulsed Wave (PW) Doppler sulla tastiera del sistema a ultrasuoni. Questo fa apparire il gate del volume del campione (cioè le due linee orizzontali). Premere una seconda volta il pulsante PW per attivare la forma d'onda spettrale Doppler nel pannello inferiore.
  2. Posizionare il cancello del campione (strumento di misurazione regolabile - consente all'utente di definire l'area in cui verranno misurate le velocità) all'interno del centro del lume del vaso, garantendo l'allineamento con la direzione del flusso sanguigno. Regolare l'angolo di insonazione in modo che sia il più parallelo possibile al recipiente e mantenerlo a ≤60° per garantire calcoli accurati della velocità. Regolare l'angolo di sonanza ruotando la manopola dell'angolo corrispondente.
  3. Posizionare il cancello del campione nelle seguenti posizioni per ogni tipo di recipiente. Arteria ovarica: all'interno del vaso appena prossimalmente al suo punto di ingresso nell'ovaio. Vaso midollare: nel punto centrale di ramificazione, dove la MV si ramifica in vasi corticali. Questo punto di ramificazione appare come una pozza di sangue subito dopo l'ingresso nell'ovaio. Vaso corticale: all'interno di un vaso alla base di un follicolo in crescita, quando identificabile.
  4. Una volta che il gate del campione è posizionato nella posizione desiderata ed è visibile una chiara forma d'onda dell'impulso, premere Cine Store per registrare e salvare sia l'immagine ecografica che la corrispondente forma d'onda Doppler spettrale.
  5. Una volta completata l'imaging, rimuovere delicatamente il mouse dalla piattaforma di imaging. Rimuovi il gel per ultrasuoni dal retro e posiziona il mouse su un termoforo fino a quando non si sveglia completamente.

6. Esportazione e salvataggio dei dati

  1. Dopo aver completato tutte le immagini e salvato i fotogrammi fissi e i cine loop desiderati utilizzando la funzione Cine Store , premere il pulsante Gestione studio situato nella parte superiore sinistra della tastiera del sistema a ultrasuoni. Si aprirà la finestra Study Browser , che mostra un elenco di tutte le immagini salvate e i cine loop della sessione corrente.
  2. Nella finestra Browser studi , selezionare i file da salvare.
    1. Per salvare un'intera serie, selezionare il nome della serie corrispondente: questo evidenzierà automaticamente tutte le immagini associate e i loop cinematografici. Fare clic sul pulsante Copia in per procedere.
    2. Quando richiesto, fare clic sulla cartella di destinazione o sull'unità esterna in cui devono essere salvati i file esportati. Verificare che il formato del file e il percorso di destinazione siano corretti prima di finalizzare l'esportazione.

7. Disattivare la sequenza e ripulire

NOTA: Questi passaggi devono essere completati immediatamente dopo la conclusione dell'imaging e tutti i dati sono stati salvati ed esportati.

  1. Dopo aver esportato tutti i dati necessari, fare clic sull'icona Shutdown nella finestra Browser studio dell'applicazione software di analisi. In questo modo si spegnerà in modo sicuro sia il computer di acquisizione che il pannello di controllo.
  2. Lasciare in funzione le ventole di raffreddamento del sistema per 5-10 minuti. Una volta completato il raffreddamento, spegnere l'alimentazione principale utilizzando l'interruttore situato sul retro del carrello di imaging.
  3. Spegnere tutte le apparecchiature ausiliarie: alimentazione di ossigeno, vaporizzatore di isoflurano e unità di monitoraggio fisiologico.
  4. Pulire il trasduttore a ultrasuoni: rimuovere prima il gel per ultrasuoni rimanente utilizzando salviette prive di lanugine, quindi disinfettare la superficie con salviette umide prive di lanugine o salviette disinfettanti consigliate per apparecchiature elettroniche sensibili.
  5. Pulire la piattaforma del mouse e la tastiera con salviette disinfettanti. Non utilizzare alcol etilico sugli elettrodi della piattaforma del mouse, poiché potrebbe danneggiare i componenti sensibili.
  6. Pulire la camera di induzione con carta assorbente umida. Smaltire i tovaglioli di carta nell'apposito contenitore per rifiuti a rischio biologico.
  7. Smaltire tutti i materiali monouso (ad es. guanti, nastro chirurgico, garze, applicatori con punta in cotone) nell'apposito contenitore a rischio biologico.

8. Misura di parametri emodinamici mediante forme d'onda d'impulso Doppler

  1. Nell'applicazione di analisi, fare clic su Copia da, selezionare il nome appropriato dal menu a discesa, accedere alla posizione in cui è stato salvato lo studio, selezionarlo e fare clic su OK per importarlo.
  2. Apri l'immagine PW Doppler desiderata e fai clic sull'icona delle misurazioni nell'angolo in basso a sinistra per aprire il pannello delle misure.
  3. Fare clic sullo strumento di misurazione della velocità nell'angolo in alto a sinistra del pannello di misurazione per quantificare le tre velocità sistoliche di picco (PSV) e le velocità telediastoliche (EDV) più alte dalla forma d'onda Doppler spettrale facendo clic nella parte superiore delle onde PSV ed EDV (lo strumento misurerà automaticamente la dimensione dell'onda dal punto di clic verso il basso fino all'asse x). Includi solo forme d'onda che mostrino almeno tre cicli cardiaci distinti con picchi chiari e coerenti di PSV ed EDV.
  4. Per calcolare la velocità media, calcolare prima la media dei tre valori PSV selezionati e la media dei tre valori EDV. Quindi calcola la velocità media utilizzando la formula: Velocità media = (PSV medio + EDV medio)/2.
  5. Per velocità inferiori alla soglia di rilevamento di 10 mm/s, assegnare un valore di 5 mm/s (velocità media al di sotto della soglia) o scartare la misurazione in base allo scopo della ricerca.
  6. Per calcolare l'indice resistivo (RI), utilizzare la formula standard: RI = (PSV - EDV)/PSV. Questo indice fornisce una misura della resistenza vascolare e deve essere calcolato utilizzando i valori medi di PSV ed EDV per l'accuratezza.
  7. Per calcolare l'indice di pulsatilità (PI), utilizzare la formula standard: PI = (PSV - EDV)/Velocità media

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Risultati

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L'obiettivo di questo protocollo è applicare l'ecografia Doppler per visualizzare l'ovaio murino e la sua vascolarizzazione, valutare i cambiamenti nella perfusione ovarica e quantificare l'emodinamica ovarica.

La Figura 2 mostra immagini rappresentative della stessa ovaia in più punti temporali durante il periodo periovulatorio (12 ore prima e 12 ore dopo l'ovulazione) dopo l'iniezione di hCG. La Figura 2A

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Discussione

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Questo studio introduce un metodo non invasivo per la visualizzazione e la quantificazione dell'emodinamica ovarica in vivo mediante ecografia Doppler. A differenza dei metodi esistenti, questo approccio consente la valutazione in tempo reale del flusso sanguigno senza interrompere la funzione vascolare. L'ecografia Doppler è uno strumento ampiamente utilizzato ed efficace per valutare la morfologia ovarica e la funzione vascolare nell'uomo e nei modelli animali di grandi dimens...

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Dichiarazioni

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Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

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Questo studio è stato supportato da NICHD 1R01HD109392. I dati di imaging sono stati acquisiti attraverso la Cornell Biotechnology Resource Center (BRC) Imaging Facility, con NIH S10OD016191 per l'ecografia VisualSonics Vevo-2100.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Nastro chirurgico 3MVWR International LLCMMM1534-3
Gel di trasmissione a ultrasuoni Aquasonic Clear  ParkerPKR-03-08
TagliacapelliSkull Shaver LLCBBT 2020
Gonadotropina Corionica UmanaSigma Aldrich9002-61-3
Nair Body Cream DepilatoreNairDepilazione
Optixcare Eye Lube Plus AventixOPX-4252
Crema per elettrodi Parker SignacremeParkerPKR-17-05-CS
Siero per fattrice gravida gonadotropinaEnzimi creativiNATE-0969
Sistema di imaging VisualSonics Vevo 2100VisualSonics Inc.

Riferimenti

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