Articolo di ricerca
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Stabilendo modelli di ratto di lesioni al livello delle radici del plesso brachiale superiore sinistro del tronco, riparate sia con innesto nervoso che con trasferimento nervoso, abbiamo riscontrato che entrambi i gruppi raggiungevano una forza muscolare simile; Gli animali innestati mostrarono una migliore coordinazione dei movimenti.
Le lesioni al tronco superiore (C5-C6) del plesso brachiale compromettono l'abduzione della spalla e la flessione del gomito. Per le rotture C5-C6 con monconi prossimali preservati, l'innesto nervoso (NG) rimane l'approccio convenzionale. I trasferimenti nervosi (NT) rappresentano l'unica opzione valida nelle avulsioni C5-C6. L'attuale standard globale per la NT prevede procedure di tripla trasferimento: nervo accessorio spinale (SAN) al nervo soprascapolare (SSN), procedura di Oberlin e procedura di Leechavengvong. Le tendenze cliniche recenti indicano un ampliamento delle indicazioni della NT includendo scenari di rottura radicale, spinte dalla logica che la NT distale riduce significativamente la distanza di rigenerazione assonale. Per consentire un confronto diretto, questo studio ha stabilito due modelli di ratti che simulano queste strategie cliniche: 1) un modello NG in cui i monconi C5-C6 venivano innestati al SSN e al tronco superiore; 2) un modello NT multiplo che comprende le tre procedure sopra menzionate. Il recupero funzionale (punteggio di Ochiai, test della faglia del piede di Barth e test di toelettatura di Terzis), parametri elettrofisiologici e conteggi assonici sensoriali rigenerati sono stati valutati a 8 e 16 settimane dall'intervento. A 8 settimane, non esistevano differenze statisticamente significative negli esiti funzionali tra i gruppi. A 16 settimane, mentre i punteggi di Ochiai e quelli di Terzis rimanessero comparabili, NG ha mostrato prestazioni significativamente superiori nel test di Barth. Elettrofisiologicamente, la NT ha mostrato tassi di recupero significativamente migliori per i nervi musculocutanei, ascellari e soprascapolari a 8 settimane. Tuttavia, questi vantaggi elettrofisiologici non erano più statisticamente significativi entro 16 settimane. A 8 settimane, la NG trasportava già più assoni sensoriali rigenerati nei nervi musculocutanei e ascellari, mentre i conteggi SSN erano simili. A 16 settimane, la NG ha superato la NT nei numeri degli assoni sensoriali per tutti e tre i nervi. Questi risultati in un modello ratto di transezione netta C5-C6 indicano che, entro un periodo postoperatorio di 16 settimane, la NG raggiunge un recupero funzionale ed elettrofisiologico comparabile al NT, garantendo al contempo un ripristino superiore della funzione sensoriale e motoria coordinata. Tuttavia, sono necessari ulteriori studi con un follow-up più lungo per determinare la rilevanza traslazionale di questi risultati.
Le lesioni del plesso brachiale sono generalmente classificate in lesioni del tronco superiore (C5–C6, con o senza coinvolgimento di C7), lesioni del tronco inferiore (C8–T1) e lesioni del plexo pan-piesso (C5–T1). Una forza compressiva diretta alla testa e alla spalla produce tipicamente una lesione alla parte superiore del tronco. Poiché i legamenti transforaminali superiori ai livelli radicali C5–C7 dissipano parzialmente la trasmissione verso l'alto della forza traumatica, la rottura di queste radici—specialmente C5—al forame intervertebrale non è rara. Tuttavia, una violenza grave può comunque causare avulsioni radicali e può persino estendersi al tronco inferiore. Quando il ramo superiore è distrato con forza nel piano orizzontale, predominano avulsioni radicali del tronco inferiore; con una maggiore forza può verificarsi avulsione completa del plesso brachiale. A causa dell'assenza di legamenti transforaminali superiori che proteggano le radici C8–T1, praticamente tutte le lesioni traumatiche del tronco inferiore sono avulsioniradicali 2. Pertanto, per quanto riguarda il modello di lesione radicale, le radici C5–C6 sono più propense a rompersi, mentre le radici C7–C8–T1 sono più soggette all'avulsione. Queste caratteristiche patoanatomiche sono fondamentali per scegliere la strategia chirurgica più appropriata.
Le lesioni della parte superiore del tronco sono caratterizzate clinicamente da perdita di abduzione della spalla e flessione del gomito. Nei pazienti con rotture C5–C6 in cui sono ancora presenti monconi radicali prossimali validi, la strategia convenzionale è stata l'innesto nervoso (NG): le radici residue di C5 e C6 vengono collegate — di solito con autoinnesti del nervo surale — alle divisioni anteriore e posteriore del tronco superiore e al nervosoprascapolare 3. Quando le radici C5 e C6 vengono avulsate, il trasferimento nervoso (NT) diventa l'unica opzione ricostruttiva. L'algoritmo operatorio adottato dalla maggior parte dei centri nel mondo combina tre procedure: il nervo accessorio spinale al nervo soprascapolare, un fascicolo del nervo ulnare al ramo bicipite del nervo musculocuteo (procedura di Oberlin) e il lungo ramo della testa del tricipite dal nervo radiale al ramo anteriore del nervo ascellare (procedura di Leechavengvong)4.
Nell'ultimo decennio, le indicazioni per la NT nella ricostruzione del plesso brachiale si sono progressivamente ampliate: alcuni autori ora sostengono tecniche di trasferimento anche per le rotture radicali, sostenendo che i trasferimenti distali accorciano notevolmente la distanza rigenerativa e accelerano così il recupero motorio 5,6,7. Ad oggi, tuttavia, questi rapporti si sono concentrati esclusivamente sugli esiti di forza muscolare post-operatoria; Le valutazioni di destrezza e movimento coordinato, variabili che determinano in modo critico la qualità del recupero funzionale, rimangono assenti.
Dato che i ceppi radicali residui contengono una proporzione maggiore di fibre sensoriali8 e rendono necessaria una rimappatura corticale a lunga distanza dopo la ricostruzione9, ipotizziamo che, per le rotture post-gangliari C5–C6, la NG utilizzando i monconi radicali vitali C5–C6 come fonte di assoni rigeneranti garantisce una qualità complessiva superiore di recupero funzionale rispetto a NT. Poiché il ratto è ampiamente riconosciuto come modello sperimentale ideale per lesioni e riparazioni del plessobrachiale 10,11,12, stabiliremo due modelli adulti di ratti di lesioni post-gangliari C5–C6 ricostruite rispettivamente con NG o NT. Verranno impiegate valutazioni comportamentali, elettrofisiologiche e conteggi assonici sensoriali rigenerati per confrontare i due gruppi e testare l'ipotesi dichiarata.
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Questo protocollo è stato approvato dal Comitato per il Benessere Animale e l'Etica del Dipartimento di Scienze degli Animali di Laboratorio dell'Università di Fudan (Approvazione n.: 2019 Huashan Hospital JS-008).
Istituzione del modello del ratto
Lesione da rottura del tronco superiore sinistro
La temperatura ambiente fu mantenuta tra 23 e 25 °C. I ratti di Sprague-Dawley sono stati anestetizzati con pentobarbital sodio intraperitoneale all'1% (0,4 mL/100 g di peso corporeo). Dopo l'induzione dell'anestesia, il ratto veniva posizionato in posizione supina sulla tavola operatoria con gli arti anteriori abdotti a 90° dal tronco. Il collo, il petto, l'ascella e, solo negli animali NG, entrambi gli arti posteriori sono stati rasati. La pelle è stata disinfettata con povidone-iodio. È stata effettuata un'incisione cervicale mediana di 3 cm dalla cartilagine cricoide fino al bordo superiore del manubrio sterni. Al microscopio chirurgico, il tessuto sottocutaneo e la fascia profonda sono stati sezionati strato dopo strato per esporre i muscoli sterno-ioculare, sternomastoideo, pettorale maggiore e pettorale minore. Questi quattro muscoli venivano retraiti utilizzando retrattori sterili e su misura a graffette. Le estremità distali dei retrattori venivano fissate alla tavola di comando con elastici e la tensione veniva regolata per ottenere un'esposizione ottimale proteggendo la vena giugulare interna. Sono stati identificati i muscoli scaleni anteriori e medi, e la porzione supraclavicolare del plesso brachiale nello spazio interscaleno è stata esposta (Figura 1A). Le radici C5 e C6 sono state tagliate di 5 mm distali rispetto ai rispettivi forami intervertebrali, poi un segmento di 5 mm è stato resezionato per creare un gap definito (Figura 1B). Nel gruppo NT, i monconi prossimali di C5 e C6 sono stati suturati ai tessuti molli adiacenti per impedire agli assoni rigeneranti di entrare nella via distale.
Istituzione del modello NG
È stata effettuata un'incisione a forma di L lungo il lato dorsolaterale della zampa posteriore, attraversando il malleolo laterale e risalendo il lato laterale della zampa inferiore. Sotto un microscopio chirurgico, il tessuto sottocutaneo e la fascia profonda venivano dissezionati strato dopo strato, facendo attenzione a proteggere la piccola vena safena, poi il nervo surale veniva esposto e prelevato. I nervi surali bilaterali hanno fornito una lunghezza totale di 8 cm. Dopo aver ritagliato il tessuto connettivo perineurale, ogni nervo è stato diviso in otto segmenti da 1 cm. Il nervo soprascapolare è stato sectato all'origine dal tronco superiore. Un innesto è stato utilizzato per collegare il nervo C5 al nervo soprascapolare; tre innesti da C5 e quattro innesti da C6 al tronco superiore (Figura 1C).
Istituzione del modello NT
L'incisione cervicale della linea mediana era estesa di circa 2,5 cm distalmente verso il braccio superiore. Nel punto in cui emerge il ramo cutaneo pettorale laterale, il muscolo pettorale maggiore è stato inciso lungo la direzione della fibra tra il pettorale maggiore e il bicipite. Il pettorale minore più profondo è stato sezionato in modo brusco per mostrare i cordoni del plesso brachiale che corrono sotto il pettorale maggiore. Il nervo ulnare nasce dal midollo mediale e percorre il percorso più medialmente all'interno del segmento del cordone (Figura 1D). Il nervo musculocuteo ha origine dal midollo laterale, passa sotto il bordo inferiore della terea maggiore nel braccio e infine entra nel ventre del bicipite brachiale, che corre più lateralmente all'interno del segmento del cordone (Figura 1D). Il nervo radiale ha origine dal midollo posteriore, passa sotto il bordo inferiore del tendine del dorsale largo nel braccio posteriore e produce tre rami che alimentano le teste lunghe, mediali e laterali del tricipite. Il nervo ascellare nasce anch'esso dal midollo posteriore, attraversa lo spazio quadrangolare e si divide in rami anteriori e posteriori che innervano il muscolo deltoide.
Trasferimento del nervo accessorio spinale al nervo soprascapolare
Il muscolo sternocleidomastoideo è stato retratto all'interno dell'incisione cervicale mediana per esporre il nervo accessorio spinale. Il nervo emerge da sotto il muscolo digastrico, raggiunge il terzo medio del bordo mediale sternocleidomastoideo, rilascia il ramo esternocleidomastoideo, prosegue lungo il bordo posteriore di quel muscolo e scende lateralmente nel collo per innervare il trapezio. Il ramo sternocleidomastoideo è stato interseccato per eliminare la trazione sul nervo accessorio che altrimenti avrebbe potuto interrompere il sito di coaptazione dopo il trasferimento. Il ramo trapezio era diviso al punto di ingresso nel muscolo. Il nervo soprascapolare è stato sectato alla sua origine distale rispetto al tronco superiore. Il ramo trapezio del nervo accessorio è stato coapttato al nervo soprascapolare con una singola sutura sintetica in polipropilene 10-0 (Figura 1E).
Trasferimento del fascicolo del nervo ulnare al ramo motorio del bicipite del nervo musculocuteo (procedura di Oberlin)
Il tronco principale del nervo muscololocuteo veniva mobilitato distalmente fino a quando l'intero ramo motorio del bicipite era completamente esposto. Al livello del terzo medio del ramo motorio del bicipite, fu prelevato un fascicolo di 6 mm dal lato laterale del nervo ulnare, e la sua estremità distale fu nettamente interseccata. Il ramo motorio del bicipite è stato intersectato all'origine dal tronco nervoso musculocuteo. Il fascicolo ulnare mobilitato è stato coaptizzato al ramo motorio del bicipite con una singola sutura sintetica in polipropilene 10-0. L'esposizione completa del ramo motorio del bicipite ha due scopi: (1) identificare il sito esatto per il prelievo del fascicolo dal nervo ulnare, e (2) garantire una coaptazione senza tensione dopo il trasferimento (Figura 1F).
Trasferimento del ramo radiale del tricipite a testa lunga al ramo anteriore del nervo ascellare (procedura di Leechavengvong)
Il ratto fu riposizionato in posizione prona con l'arto anteriore abdotto a 90° rispetto al tronco. La parte dorsale del braccio superiore sinistro è stata rasata e disinfettata. È stata effettuata un'incisione longitudinale di 3,5 cm sul lato dorsale del braccio superiore sinistro, estendendosi dall'articolazione della spalla fino al livello medio-umerale. Al microscopio operatorio, il tessuto sottocutaneo e la fascia profonda venivano sezionati strato dopo strato. Il muscolo deltoideo è stato retrato per esporre lo spazio quadrangolare sottostante, dove si vedevano uscire dallo spazio il tronco principale del nervo ascellare e i relativi vasi umerali circonflessi. Il nervo ascellare è stato mobilitato distalmente fino a quando l'intera divisione anteriore e posteriore non è stata completamente esposta poco prima di entrare nel ventre deltoideo. All'interno della stessa incisione, il tronco principale del nervo radiale è stato identificato tra le teste lunghe e laterali del tricipite. Il nervo radiale è stato mobilitato distalmente fino a quando l'intero ramo motorio verso la testa lunga del tricipite non è stato chiaramente visualizzato (Figura 1G). Il ramo tricipite a testa lunga veniva intersectato all'ingresso nel muscolo e veniva riflesso prossimalmente per approssimare il ramo anteriore del nervo ascellare. Il ramo anteriore del nervo ascellare è stato tranciato all'origine dal tronco principale, e si è riflesso distalmente. Il ramo del tricipite a testa lunga verso il ramo anteriore del nervo ascellare è stato coaptato da una singola sutura sintetica in polipropilene 10-0 (Figura 1H).
Dopo il completamento di tutte le ricostruzioni nervose, ogni campo chirurgico fu irrigato con soluzione salina sterile e ogni sito di coaptazione fu accuratamente ispezionato per confermarne l'integrità. Tutte le incisioni sono state chiuse a strati: il muscolo pettorale maggiore è stato approssimato con suture di seta 5-0 non assorbibili (richieste solo nell'incisione cervicale del gruppo NT), seguite dalla fascia sottocutanea e dalla pelle. Poiché ogni coaptazione nervosa veniva eseguita senza tensione, l'immobilizzazione post-operatoria dell'arto superiore era non necessaria.
Valutazione comportamentale
Ochiaipunteggio 13
Il ratto veniva sollevato per la coda in modo che il suo corpo fosse sospeso a 30 cm dal tavolo, osservando la postura di entrambi gli arti anteriori. Il ratto è stato posizionato in una pista ristretta (50 cm di lunghezza × 10 cm di larghezza) sul tavolo per osservare l'andatura degli arti anteriori durante la camminata. L'intera pista era coperta da carta bianca e la parte di partenza era inumidita con inchiostro nero. Mentre il ratto avanza, si trovano impronte chiare. 0 punti – quando sospesi, entrambi gli arti anteriori pendono dritti verso il pavimento in modo rilassato (Figura 2A-1); durante la camminata, nessuno dei due arti anteriori viene trascinato (Figura 2A-2). 1 punto – quando sospeso, l'arto anteriore interessato è leggermente aduto e fletto (Figura 2B-1); durante la camminata, si osserva un lieve trascinamento dovuto a una flessione limitata dei gomiti (Figura 2B-2). 2 punti – quando sospeso, l'arto anteriore interessato è completamente fletto e addotto (Figura 2C-1); durante la camminata, è evidente un grave trascinamento (Figura 2C-2).
Test di faglia del piede di Barth13
Una griglia metallica orizzontale (50 cm × 38 cm) era preparata sollevata di 11 cm sopra il tavolo; ogni quadrato della griglia misura 1,5 cm. Il ratto fu posizionato sulla griglia; ogni volta che l'arto anteriore colpito scivola attraverso un'apertura a griglia, viene registrato come una "faglia del piede" (Figura 3). È stato contato il numero di falle al piede causate dall'arto colpito in 2 minuti.
Test di toelettatura Terzis14
Il ratto fu posto in una cassetta trasparente aperta. Circa 1–3 mL di soluzione salina normale sono stati spruzzati sul muso e sul viso del ratto, e sono stati osservati i tentativi di rimuovere le gocce d'acqua.
Grado 0 – nessuna risposta da parte dell'arto colpito.
Grado 1 – l'arto colpito si flette al gomito e raggiunge la bocca, ma non può raggiungere il naso (Figura 4A).
Grado 2 – l'arto interessato raggiunge il naso (Figura 4B).
Grado 3 – l'arto colpito arriva sopra il naso ma non raggiunge l'occhio (Figura 4C).
Grado 4 – l'arto colpito raggiunge l'occhio ma non può raggiungere l'orecchio (Figura 4D).
Grado 5 – l'arto colpito raggiunge l'orecchio o lo seguono (Figura 4E).
Potenziale di azione muscolare composto (CMAP)
Il ratto è stato anestetizzato, immobilizzato e preparato come descritto in precedenza nel protocollo, e la porzione sopraclavicolare e il segmento midollare del plesso brachiale sono stati esposti. L'elettrodo nero a ago di registrazione veniva inserito nell'addome del muscolo bersaglio (bicipite brachiale, deltoide o infraspinato). L'elettrodo rosso di registrazione veniva inserito nella giunzione tendine-muscolo dello stesso muscolo. L'elettrodo di riferimento verde fu posizionato tra gli elettrodi nero e quello rosso (Figura 5). Tutti gli elettrodi sono inseriti fino a una profondità di 2 mm e si utilizzano siti di inserimento identici su entrambi i lati. Il nervo è stato sollevato delicatamente con l'elettrodo stimolante per il test. Fu fornito un singolo impulso a onda quadrata di intensità 0,5 mA e durata di 0,2 ms; Sono state registrate la latenza e l'ampiezza del CMAP. Il lato controlaterale (sano) veniva usato come riferimento (assegnato valore a 1). Sono stati calcolati il tasso di ritardo di latenza ([latenza sul lato colpito/latenza sul lato sano] × 100 %) e il tasso di recupero dell'ampiezza ([ampiezza sul lato colpito/ampiezza sul lato sano] × 100 %).
Colorazione a immunofluorescenza
Le fibre mielinizzate sono state marcate con anti-neurofilamento 200 (NF200); tra questi, le fibre mielinizzate motorie sono state distinte per co-marcatura con l'anti-colina acetiltransferasi (ChAT). Le fibre positive per NF200 ma negative per ChAT sono quindi state classificate come fibre mielinizzatesensoriali 15.
Per il gruppo innesto nervoso, il tronco principale dei nervi musculocutaneo, ascellare e soprascapolare è stato prelevato distalmente al secondo sito di sutura sull'arto interessato. Per il gruppo di trasferimento nervoso, il ramo bicipite del nervo musculocutaneo, il ramo anteriore del nervo ascellare e il nervo soprascapolare sono stati spostati distali rispetto ai rispettivi siti di coaptazione. Un segmento di 3 mm di ciascun nervo è stato immerso nel paraformaldeide al 4% e fissato a 4 °C per 24 ore.
I campioni erano orientati perpendicolarmente all'asse longitudinale, immersi in paraffina e sezionati serialmente a 3 μm. Dopo la deparaffinizzazione, il prelievo dell'antigene è stato eseguito in un tampone EDTA di 0,01 M (pH 8,0) utilizzando un forno a microonde. Le sezioni sono state incubate durante la notte a 4 °C con anticorpi primari diluiti in PBS (ChAT, 1:200; NF200, 1:500), seguiti da lavaggi PBS e incubazione di 50 minuti a temperatura ambiente con anticorpi secondari (anti-coniglio di capra coniugato con Cy3, 1:300; Alexa Fluor 488-coniugato anti-topo per capre, 1:400) protetto dalla luce. I nuclei sono stati contrastati con DAPI. Intere sezioni trasversali di ciascun nervo venivano fotografate con un microscopio a fluorescenza dotato di scanner per vetrine.
NF200 è stato visualizzato con fluorescenza verde e ChAT con fluorescenza rossa; I profili NF200-positivi/ChAT-negativi sono stati conteggiati come fibre mielinizzate sensoriali. Cinque sezioni selezionate casualmente da ciascun nervo sono state analizzate con ImageJ. Il numero totale di fibre mielinizzate sensoriali nell'intera sezione trasversale è stato contato per ogni sezione, e il valore medio delle cinque sezioni è stato preso come conteggio finale per quel campione nervoso.
Analisi statistica
La dimensione del campione (n = 8 per gruppo) è stata calcolata prospetticamente con G*Power utilizzando la dimensione dell'effetto pilota del conteggio degli assoni sensoriali (d di Cohen = 2,31) per ottenere ≥ 80% di potenza a α = 0,05. Tutte le analisi statistiche sono state effettuate utilizzando GraphPad Prism. I dati sono presentati come mediana (intervallo interquartile) [M (p25–p75)]. Confronti tra i gruppi sono stati effettuati con il test Mann-Whitney U. Un valore P < 0,05 è stato considerato statisticamente significativo.
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Nel primo giorno post-operatorio, sia i ratti NG che NT hanno mostrato una perdita completa di abduzione della spalla e della flessione del gomito nell'arto operato; Quando l'aspetto dorsale dell'arto anteriore interessato veniva pungente mentre l'animale era trattenuto, nessuno dei due gruppi mostrava ritiro o vocalizzazione. A 8 settimane, la funzione delle spalle e dei gomiti era migliorata in entrambi i gruppi; Lo stesso stimolo ora provocava l'astinenza. A 16 settimane si osservava ...
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L'obiettivo di questo studio era testare la nostra ipotesi secondo cui la ricostruzione delle lesioni del plesso brachiale tramite innesto residuo della radice nervosa produca un esito complessivamente superiore rispetto al trasferimento nervoso. I ratti adulti con rotture C5–C6 sono stati divisi in due gruppi: uno ha subito una ricostruzione del tronco superiore tramite innesto nervoso, l'altro tramite trasferimenti del nervo accessorio spinale, del ramo tricipite a testa lunga del nerv...
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Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Questo studio è stato sponsorizzato dalla National Natural Science Foundation of China (n.82201525, a JS).
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 1× Soluzione per il Recupero dell'Antigene di Citrato | Servicebio | G1219-1L | |
| 1× Soluzione di recupero dell'antigene Tris-EDTA (ph 8.0) | Servicebio | G1207-1L | |
| 1× Soluzione per il recupero dell'antigene Tris-EDTA (ph 9.0) | Servicebio | G1218-1L | |
| 10-0 PROLENE | Johnson & Johnson Med Tech | W2790 | |
| 5-0 MERSILK | Johnson & Johnson Med Tech | SA82G | |
| Alexa Fluor 488-coniugato Goat Anti-Mouse IgG (H+L) | Servicebio | GB25301 | |
| Anti-160 kDa Neurofilament Medium Mouse mAb | Servicebio | GB12763-100 | |
| Anti-Colina Acetiltransferasi Rabbit pAb | Servicebio | GB11070-1-100 | |
| Agente di rivestimento antifluorescenza per squenzer | Servicebio | G1401 | |
| Albumina Sirica Bovina | Servicebio | GC305010-5g | |
| ChAT | Servicebio | GB11070-1 | |
| Cy3 coniugato Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) | Servicebio | GB21303 | |
| DAPI | Servicebio | G1012-10 | |
| Macchina di incorporamento | GET Electronics (Hui ZHOU) Co., Ltd. | JB-P5 | |
| Microscopio a fluorescenza | Nikon | Eclipse C1 | |
| Elettromiografo a quattro canali | Dantes | DT440 | |
| G*Power | Università Heinrich Heine Dü Sseldorf | 3.1.9.7 | |
| Controller per telecamera ad alta velocità | Nikon | DS-U3 | |
| ImageJ | Istituti Nazionali di Salute | 1.8.0 | |
| Strumenti microchirurgici | Fabbrica di Micro-Strumenti di Ningbo Chenghe | 6804 | |
| Forno a microonde | Galanz | P70D20TL-P4 | |
| Microscopio operativo | Fabbrica di Strumenti Ottici Medici di Shanghai | SXP-1B | |
| Pipetta | Eppendorf | 100221588457 | |
| Prisma | GraphPad Software | 10.1.2 | |
| Microtomo rotatorio | Leica | RM2016 | |
| Scanner | Epson | V300 | |
| Sprague Dawley Rat | Animale da laboratorio Shanghai Sippe-Bk | OR-1001 | |
| Squenzer di autofluorescenza tissutale | Servicebio | G1221-5ML | |
| Penna per la marcatura dei tessuti; | Tecnologia Genetica | GT1001 |
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