È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

Articolo metodologico

Agopuntura per sanguignamento nei punti di Sifeng (EX-UE-10) per regolare l'equilibrio Th1/Th2 nella polmonite da micoplasma pediatrico

429 visualizzazioni

DOI:

10.3791/69583

20 febbraio 2026

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Questo protocollo descrive uno studio controllato randomizzato per valutare gli effetti immunomodulatori dell'agopuntura aggiuntiva a punto di Sifeng (EX-UE-10) sull'equilibrio Th1/Th2 in bambini con polmonite da Mycoplasma pneumoniae che ricevono trattamento antibiotico standardizzato.

Abstract

Mycoplasma pneumoniae è una causa comune di polmonite nei bambini, e l'emergere di ceppi resistenti ai macrolidi sottolinea la necessità di esplorare terapie aggiuntive efficaci. Questo articolo introduce un protocollo di sperimentazione randomizzata controllata per valutare gli effetti clinici e immunologici dell'agopuntura come terapia aggiuntiva. Lo studio include bambini diagnosticati con polmonite da Mycoplasma pneumoniae che stanno ricevendo un trattamento standardizzato con azitromicina. L'obiettivo principale è determinare se una specifica procedura di agopuntura applicata alle dita possa modulare la risposta immunitaria dell'ospite alterando i livelli sierici di interferone-γ (IFN-γ) e interleucina-4 (IL-4), che riflettono l'equilibrio delle cellule Th1/Th2. Questo metodo descrive i criteri di selezione dei casi, il raggruppamento randomizzato, un protocollo dettagliato di intervento per agopuntura e la valutazione dei sintomi clinici e dei marcatori immunologici. Questo studio mira a fornire prove scientifiche per l'applicazione dell'agopuntura come intervento non farmacologico, con l'aspettativa di accorciare il corso della polmonite pediatrica e ridurne la risposta infiammatoria.

Introduzione

La polmonite acquisita nella comunità nei bambini rimane una causa significativa di morbilità, con Mycoplasma pneumoniae come uno dei principali patogeni. La crescente prevalenza di Mycoplasma pneumoniae resistente ai macrolidi complica il trattamento, spesso portandoa prolungati i percorsi 1,2, aumentando così la necessità di terapie alternative o aggiuntive. L'agopuntura è una tecnica che prevede l'inserimento di aghi fini in punti specifici del corpo a scopo terapeutico ed è attualmente oggetto di studio come intervento non farmacologico per varie malattieinfiammatorie 3,4.

Nella teoria della medicina tradizionale cinese (MTC), i punti di Sifeng (EX-UE-10) sono punti di agopuntura importanti nel massaggio pediatrico e nell'agopuntura, con una storia che si estende per diversisecoli. Tradizionalmente, sono usati principalmente per trattare il "gan ji", una condizione caratterizzata da indigestione, disturbi nutrizionali e ritardi nello sviluppo, spesso accompagnati da sintomi ricorrenti di infezione respiratoria come tosse e produzione di expectatore. Nella Medicina Tradizionale Cinese (MTC) pediatrica, i punti Sifeng sono specificamente preferiti per "rafforzare la milza a supporto dei polmoni" (Pei Tu Sheng Jin), una teoria che suggerisce che il recupero clinico dalle infezioni respiratorie sia migliorato migliorando la salute digestiva e sistemica. A differenza dei punti corporei comuni come Feishu (BL 13) o Zusanli (ST 36), che spesso richiedono una lunga ritenzione dell'ago, i punti Sifeng sono particolarmente adatti ai bambini grazie all'efficacia della tecnica di sanguignamento rapido con puntura. Rispetto alla sola assistenza di supporto standard, questo approccio aggiuntivo offre un mezzo mirato e non farmacologico per modulare la disregolazione immunitaria dell'ospite senza il rischio di ulteriori interazioni farmacologiche o disagio gastrico comune nella farmacologiapediatrica 5. Tuttavia, l'applicazione diretta di questi punti per l'infezione da Mycoplasma pneumoniae richiede ulteriori spiegazioni. Sebbene tradizionalmente applicati per sintomi digestivi e respiratori, si ipotizza che questi punti possano stimolare i nervi periferici, provocando risposte sistemiche antinfiammatorie e immunomodulatrici, potenzialmente bilanciando i livelli di citochineTh1/Th2 6,7. Questo protocollo è più adatto per i bambini con MPP lieve a moderata in un contesto residenziale stabile per facilitare il recupero; Potrebbe essere meno applicabile in contesti di terapia intensiva che richiedono stabilizzazione respiratoria d'emergenza.

L'immunopatologia dell'infezione da Mycoplasma pneumoniae comporta un danno infiammatorio significativo, associato a uno squilibrio nelle risposte delle cellule helper T (Th). In particolare, l'infezione spesso porta a uno spostamento verso la dominanza Th2, caratterizzata da livelli elevati di citochine come l'interleuchina-4 (IL-4), mentre la risposta Th1 è soppressa, manifestandosi come livelli ridotti di interferone-γ (IFN-γ) 8,9,10. Questo spostamento Th2 è collegato a infiammazione persistente e danni patologici. Ripristinare un rapporto equilibrato Th1/Th2 è considerato un obiettivo terapeutico chiave.

Questo protocollo mira a testare rigorosamente l'ipotesi che l'agopuntura possa modulare lo squilibrio immunitario nei bambini con polmonite da Mycoplasma pneumoniae . Applicando stimolazione periferica in siti specifici delle dita, questo studio cerca di determinare se l'intervento possa spostare il profilo delle citochine verso uno stato più equilibrato (cioè aumentando l'IFN-γ e diminuendo l'IL-4). Pertanto, l'obiettivo principale di questo studio è determinare se l'intervento possa modificare il profilo delle citochine, mentre gli obiettivi secondari includono la valutazione del suo impatto sulla risoluzione clinica dei sintomi—in particolare il tempo di defervescenza e il sollievo della tosse—e sui marcatori infiammatori sistemici come la proteina C-reattiva ad alta sensibilità (hs-CRP), migliorando così gli esiti clinici. Questo metodo fornisce un quadro per valutare il potenziale dell'agopuntura come terapia aggiuntiva sicura ed efficace per le malattie infettive nei bambini.

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Protocollo

Questo studio è stato approvato dal Comitato Etico dell'Ospedale Jiangning affiliato all'Università Medica di Nanchino (numero di approvazione: 2021-03-057-k01). Lo studio aderirà alla Dichiarazione di Helsinki. Il consenso informato scritto è stato ottenuto dai tutori di tutti i partecipanti prima dell'iscrizione. Questo studio è stato registrato presso il Registro Cinese degli Studi Clinici, numero di registrazione: ChiCTR2200064052.

1. Screening e iscrizione dei pazienti

  1. Consultare i criteri diagnostici per la polmonite 11 di Mycoplasma pneumoniae e confermare la diagnosi di polmonite di Mycoplasma pneumoniae (MP) se sono presenti le seguenti manifestazioni cliniche e di imaging insieme ad anticorpi sierici di MP positivi o a una rilevazione positiva di MP-DNA.
    1. Cerca sintomi di febbre e tosse, con febbre principalmente da moderata ad alta e tosse relativamente grave, potenzialmente simile a tosse pertosse, che può essere accompagnata da mal di testa, naso che cola, mal di gola, dolori all'orecchio, ecc.
    2. Esegui l'auscultazione dei polmoni per cercare una riduzione dei suoni respiratori e delle rale secche o umide.
    3. Cerca marcature peribroncovascolari ispessite e aumentate, con polmonite segmentaria o lobarica su un lato nella radiografia toracica, e grandi aree di consolidamento, opacità in vetro smerigliato, segno "albero in germoglio" e setti interlobolari ispessiti nella TAC toracica.
  2. Criteri di inclusione
    1. Assicurati che il bambino soddisfi i criteri diagnostici per la polmonite da Mycoplasma pneumoniae.
    2. Conferma che l'età del bambino sia tra i 2 e i 12 anni.
    3. Verifica che il bambino non abbia usato altri farmaci o terapie sperimentali.
    4. Assicurati che il bambino non abbia una storia di emofobia o fobia degli aghi.
    5. Conferma che la durata della malattia sia di ≤7 giorni.
    6. Ottieni un modulo di consenso informato firmato dal tutore legale del minore.
  3. Criteri di esclusione
    1. Escludere i bambini con polmonite grave o quelli con condizioni preesistenti come immunodeficienza primaria, malformazioni respiratorie congenite o neoplasie polmonari.
    2. Escludere i bambini con tendenze al sanguinamento, gravi disfunzioni epatiche o renali, o allergie note ai farmaci.
    3. Escludere coloro trattati con altri metodi di MTC che potrebbero influire sulla valutazione dell'efficacia.
    4. Escludere coloro che hanno una storia di allergie ai farmaci usati in questo studio.
  4. Stabilire criteri di ritiro e abbandono: pazienti che non rispettano il protocollo di studio per il trattamento e coloro che sperimentano eventi avversi gravi e non sono idonei a continuare il trattamento.

2. Randomizzazione e allocazione dei gruppi

  1. Apri il software statistico. Seleziona Trasforma | Generatori di numeri casuali | Imposta il punto di partenza per assicurare che la sequenza sia riproducibile. Usa la funzione Calcola la variabile per generare una sequenza di allocazione casuale per 60 partecipanti.
  2. Inserire i numeri di allocazione generati in buste singole sigillate e opache.
  3. Assegnare i bambini arruolati al gruppo di controllo o di trattamento aprendo le buste nell'ordine cronologico delle visite dei pazienti.

3. Dati di base e raccolta di campioni

  1. Registra le informazioni demografiche e cliniche di base per ogni partecipante.
  2. Valutare e registrare i punteggi di gravità clinica di base per febbre, tosse e dispnea. Assegnare 0 punti per 'nessuno', 2 punti per 'lieve', 4 punti per 'moderato' e 6 punti per 'grave' per ogni sintomo.
  3. Raccogliere 3 mL di campioni di sangue venoso in tubi anticoagulanti EDTA-2K prima di iniziare il trattamento.
  4. Centrifugare i campioni di sangue a 1.000 × g per 10 minuti a 4 °C utilizzando una centrifuga refrigerata da banco. Separare il soprandanante (siero) e conservarlo a -80 °C per la successiva analisi delle citochine.

4. Gruppo di controllo: terapia standard

  1. Somministrare azitromicina tramite infusione endovenosa a una dose di 10 mg/kg una volta al giorno per 5 giorni secondo le linee guida cliniche standardizzate.

5. Gruppo di trattamento: terapia standard più agopuntura

  1. Integrare la terapia standard (Passo 4.1) con una procedura quotidiana di agopuntura per 5 giorni consecutivi.
  2. Posiziona il bambino in una posizione comoda seduto o sdraiato con un tutore presente per il comfort. Identificare i quattro punti Sifeng (EX-UE-10) sul lato palmare delle dita 2, 3, 4 e 5 al centro delle pieghe articolari interfalangiche prossimali. Alterna quotidianamente la mano sinistra e destra (Figura 1).
  3. Indossa guanti sterili usa e getta. Istruisca il tutore a tenere fermo il dito del bambino. Disinfetta i punti con cotton cotton fioc iodato.
  4. Monitorare costantemente il bambino per segni di dolore, vertigini o sincope durante tutta la procedura.
  5. Utilizzando un ago filiforme sterile usa e getta (0,30 mm × 13 mm), inserisci rapidamente l'ago direttamente in ogni punto fino a una profondità di 1-2 mm, poi ritira immediatamente l'ago (Figura 2).
  6. Spremere delicatamente il tessuto attorno al sito della puntura per estrudere una piccola quantità di sangue o muco trasparente bianco-giallastro (Figura 3).
    NOTA: Confermare la corretta esecuzione osservando l'estrusione visiva di questi fluidi.
  7. Strofinare i punti con un cotone secco sterile e eseguire la disinfezione secondaria con tamponi iodiati.
  8. Sicurezza e smaltimento: Inserisci immediatamente gli aghi usati in un contenitore per taglienti a prova di perforazione. Smaltire tutti i batuffoli di cotone e i guanti contaminati dal sangue in un sacchetto designato per i rifiuti biologici.
  9. Assicurati che i punti di puntura rimangano asciutti per 24 ore per prevenire infezioni. Istruire il tutore a evitare di immergere le mani del bambino nell'acqua; Se è necessaria una pulizia, usa solo acqua e sapone delicato, seguito da un asciugamento immediato e delicato.
  10. Se compaiono segni di svenimento da aghi, interrompere immediatamente la procedura, mettere il bambino in posizione di riposo piatto e fornire acqua calda.
  11. Monitoraggio della sicurezza: monitorare e registrare eventi avversi locali utilizzando i Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE) versione 5.012.

6. Valutazione degli esiti

  1. Misura la temperatura ascellare del bambino quattro volte al giorno (06:00, 10:00, 14:00 e 18:00) utilizzando un termometro clinico elettronico calibrato.
    NOTA: Tutte le misurazioni devono essere effettuate da personale infermieristico formato nel reparto di ricovero per garantire accuratezza.
  2. Determinare il "tempo di defervescenza", definito come il periodo (in giorni) dall'inizio del trattamento fino a quando la temperatura ascellare rimane sotto i 37,3 °C per almeno 24 ore senza l'uso di antipiretici.
  3. Valuta il "tempo per alleviare tosse e dispnea." Registra questo periodo fino a quando i sintomi non vengono classificati come "nessuno" o "lieve" sulla scala di gravità clinica per due valutazioni consecutive da parte del personale infermieristico.
  4. Raccogliere 3 mL di sangue venoso 24 ore (±2 ore) dopo la sessione finale (quinta) di trattamento. Centrifugare a 1.000 × g per 10 minuti a 4 °C per separare il siero.
    NOTA: I campioni di sangue venoso vengono prelevati sia prima di iniziare il trattamento sia 24 ore dopo l'ultima (quinta) sessione di trattamento.
  5. Rilevare i livelli sierici di IFN-γ, IL-4 e hs-CRP utilizzando un kit di immunosorbimento enzimatico (ELISA). Segui il protocollo del produttore, assicurandoti che le piastre vengano incubate a 37 °C per 60 minuti durante la fase primaria di legame degli anticorpi.
  6. Per l'analisi statistica, importa i dati nel software di riferimento.
    1. Seleziona Analizza | Statistiche descrittive | Esplora per verificare la normalità dei dati continui.
    2. Seleziona Analizza | Confronta le medie| Test T a campioni accoppiati per confronti intragruppi e seleziona Analizza | Confronta le medie | Test T a campioni indipendenti per confronti tra gruppi. Esprimi i risultati come media ± deviazione standard (X̅ ± s).
    3. Seleziona Analizza | Statistiche descrittive | Crosstable e scegli l'opzione Chi-quadrato per analizzare i dati di efficacia categorica. Consideriamo i valori P < 0,05 statisticamente significativi.

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

Caratteristiche di base

Le sequenze di allocazione casuale venivano generate tramite software statistico e distribuite tramite buste sigillate e opache. Un totale di 60 partecipanti è stato assegnato casualmente al gruppo di controllo (n = 30) o al gruppo di trattamento (n = 30). L'analisi statistica ha confermato l'assenza di differenze significative nei dati demografici o clinici di base tra i due gruppi (P > 0,05), garantendo la co...

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Discussione

Questo studio dimostra che combinare la terapia di sanguignamento nei punti di Sifeng (EX-UE-10) con il trattamento antibiotico standard può accelerare significativamente il processo di recupero clinico nei bambini con polmonite da Mycoplasma pneumoniae (MPP). Rispetto al gruppo di controllo che riceveva solo antibiotici, il gruppo di trattamento ha mostrato una risoluzione più rapida di febbre e tosse, oltre a riduzioni più marcate dei punteggi di gravità clinica. Questi miglio...

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Dichiarazioni

Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.

Ringraziamenti

Questo studio è stato finanziato dal Fondo per lo Sviluppo della Ricerca Scientifica del Kangda College dell'Università Medica di Nanchino (Progetto n.: KD2021KYJJZD048).

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Buste opache sigillateNanjing Kongdu Printing Co., Ltd.201701Per randomizzazione e allocazione di gruppi
Contenitore per taglienti resistente alle perforazioniLixinyuan Plastic Industry Co., Ltd.KMT-15YPer lo smaltimento sicuro degli aghi usati
Centrifuga da banco refrigerataThermo Fisher Scientific75002476Usato per la separazione sirica (1.000 x g, 10 min, 4 °C; C)
Palline di cotone secche steriliZhende Medical Co., Ltd.202203121BPer pressione e pulizia post-procedura
Congelatore a bassissima temperaturaHaier BiomedicalDW-86L578JPer la conservazione a lungo termine dei campioni di siero (-80 ° C)
Aghi di raccolta venosaGuangzhou Improve Medical Instruments Co., Ltd.220123Per l'ottenimento di campioni di sangue venoso da 3 mL

Riferimenti

  1. Smith, C., Ng, K., Sih, K., McAlpine, A., Goldman, R. D. Resistant Mycoplasma pneumoniae in children. Can Fam Physician. 71 (7-8), 487-489 (2025).
  2. Han, S., et al. Clinical features associated with macrolide resistance of Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children: a single-center analysis. BMC Infect Dis. 25 (1), 854(2025).
  3. Chen, B., et al. Research hotspots and trends on acupuncture for anti-inflammation: a bibliometric analysis from 2011 to 2021. J Pain Res. 16, 1197-1217 (2023).
  4. Jia, J., et al. Effectiveness and safety of non-pharmacological therapies for the treatment of inflammatory bowel disease: a network meta-analysis. Front Med. 12 (1), 1593483(2025).
  5. Chen, Y., Lun, T., Li, L., Yu, J., Xiang, M. Acupuncture at Sifeng (EX-UE 10) for pediatric anorexia: a systematic review and meta-analysis. Complement Ther Med. 78, 102988(2023).
  6. Cao, Q., Li, Y. Signal transduction pathways involved in acupuncture-mediated inhibition of synovitis in knee osteoarthritis: a comprehensive review. Int J Gen Med. 18, 4105-4117 (2025).
  7. Wang, M., Liu, W., Ge, J., Liu, S. The immunomodulatory mechanisms for acupuncture practice. Front Immunol. 14, 1147718(2023).
  8. Shen, T., Liu, T., Kong, L., Li, Y. Association between 25-hydroxy vitamin D, interleukin-4, and interferon-γ levels and asthma in children with Mycoplasma pneumoniae infection. Sci Rep. 14 (1), 28854(2024).
  9. Duan, Y., Ou, Y., Li, J., Gan, X., Cao, J. Serum cytokine levels in children with community-acquired pneumonia caused by different respiratory pathogens. Ital J Pediatr. 51 (1), 147(2025).
  10. Jia, R., et al. Immunological landscape of children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia in the post-COVID-19 era reveals distinctive severity indicators. Respir Res. 26 (1), 103(2025).
  11. Han-Min, L., Rong, M. Expert consensus on integrated traditional Chinese and Western medicine diagnosis and treatment of pediatric Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Chin J Pract Pediatr. 32 (12), 881-885 (2017).
  12. Common terminology criteria for adverse events (CTCAE). Version 5.0, National Cancer Institute. (2017).
  13. Sun, B., et al. Advances in adhesion-related pathogenesis in Mycoplasma pneumoniae infection. Front Microbiol. 16, 1613760(2025).
  14. Georgakopoulou, V. E., Lempesis, I. G., Sklapani, P., Trakas, N., Spandidos, D. A. Exploring the pathogenetic mechanisms of Mycoplasma pneumoniae. Exp Ther Med. 28 (1), 271(2024).
  15. Zhao, X., Lv, J., Wu, M., Wu, Q. Clinical characteristics and risk factors for Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children. Front Pediatr. 12 (1), 1438631(2024).
  16. Zhang, Z., et al. Serum cytokine profiling reveals different immune response patterns during general and severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Front Immunol. 13, 1088725(2022).
  17. Hu, J., et al. Insight into the pathogenic mechanism of Mycoplasma pneumoniae. Curr Microbiol. 80 (1), 14(2022).
  18. Wang, J., et al. Unveiling the stealthy tactics: Mycoplasma immune evasion strategies. Front Cell Infect Microbiol. 13 (1), 1247182(2023).
  19. Nagai, K., et al. Neutralizing the Th1 effector cytokines, IFN-γ and TNF-α, attenuates established experimental autoimmune anti-myeloperoxidase glomerulonephritis. Front Immunol. 16, 1589130(2025).
  20. Ding, L., Jiang, Y. Biomarkers associated with the diagnosis and prognosis of Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children: a review. Front Cell Infect Microbiol. 15, 1552144(2025).
  21. Chen, Z., Liu, K. Mechanism and applications of vagus nerve stimulation. Curr Issues Mol Biol. 47 (2), 1122-1135 (2025).
  22. Liu, F. -J., Wu, J., Gong, L. -J., Yang, H. -S., Chen, H. Non-invasive vagus nerve stimulation in anti-inflammatory therapy: mechanistic insights and future perspectives. Front Neurosci. 18 (1), 1490300(2024).

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Ristampe e permessi

Tag

Polmonite pediatricaMycoplasma pneumoniaeterapia adiuvantestudio controllato randomizzatomodulazione della risposta immunitariainterferone gammainterleuchina 4