Questo protocollo descrive un metodo riproducibile per preparare micrograssi arricchiti con SVF processati meccanicamente da tessuto adiposo autologo e iniettarlo in difetti traumatici dei tessuti molli di tipo cario per la ricostruzione clinica.
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Questo protocollo descrive un metodo riproducibile per preparare micrograssi arricchiti con SVF processati meccanicamente da tessuto adiposo autologo e iniettarlo in difetti traumatici dei tessuti molli di tipo cario per la ricostruzione clinica.
I difetti traumatici dei tessuti molli rappresentano sfide significative per la ricostruzione a causa della perdita tissutale, della vascolarità compromessa e delle difficoltà nel raggiungimento di una copertura duratura. Il tessuto adiposo offre una pratica fonte di tessuto autologo, e il micrograsso arricchito di frazione vascolare stromica (SVF) processato meccanicamente può essere preparato intraoperatoriamente senza digestione enzimatica.
Questo studio presenta un protocollo clinico standardizzato per il prelievo di tessuto adiposo autologo e il suo processo in micrograsso arricchito con SVF per l'iniezione in difetti traumatici dei tessuti molli di tipo carie. Il grasso viene raccolto manualmente dalla coscia o dall'addome a bassa pressione negativa, frammentato meccanicamente tramite taglio ed emulsificazione da siringa a siringa, filtrato per ottenere una consistenza uniforme di micrograsso e centrifugato per isolare la frazione contenente SVF. Il micrograsso processato viene iniettato in tutta la cavità della ferita in un motivo multistrato. La valutazione post-operatoria include la valutazione clinica seriale, la documentazione fotografica e la misurazione della riduzione dell'area della ferita fino all'epitelizzazione.
In una piccola coorte, il metodo è stato associato a contrazione progressiva della ferita ed epitelizzazione completa entro circa 4-8 settimane, senza complicazioni maggiori. Sebbene la composizione e la vitalità cellulare non fossero quantificate, la tecnica forniva un approccio intraoperatorio praticabile adatto a contesti senza accesso a strutture di elaborazione enzimatica o di laboratorio. Questo protocollo offre un metodo pratico e minimamente manipolato per somministrare micrograssi arricchiti con SVF nella gestione di difetti traumatici di tipo cavità e può costituire una base per ulteriori studi controllati.
I difetti dei tessuti molli di tipo cavità traumatica rimangono una sfida ricostruttiva importante perché combinano perdita tissutale, perfusione locale compromessa e un alto rischio di infezione e formazione di spazi morti. Le tecniche convenzionali di copertura, come innesti cutanei a spessore diviso o trasferimenti di lembo, offrono in molti casi una copertura duratura. Tuttavia, sono spesso limitati dalla morbilità del sito donatore, dalla complessità tecnica e da risultati variabili a lungo termine, specialmente nei letti contaminati o segnati 1,2,3.
Il tessuto adiposo è una fonte abbondante e facilmente accessibile di una popolazione cellulare eterogenea chiamata frazione vascolare stromaica (SVF). La SVF include cellule stromali mesenchimatici, progenitori endoteliali, periciti e elementi stromici di supporto. Quando trattenuta all'interno delle particelle del tessuto adiposo, il contesto extracellulare nativo della SVF viene preservato durante la gestione e la consegnaclinica 4. Clinicamente, gli innesti di grasso arricchiti per SVF (micrograsso arricchiti da SVF) sono stati riportati come migliori della ritenzione del trapianto e associati a un'epitelizzazione accelerata della ferita in una varietà diindicazioni 5,6,7.
Esistono due strategie principali per ottenere SVF tramite lipoaspirazione. La digestione enzimatica tipicamente produce un numero maggiore di cellule nucleate per unità di volume, ma richiede reagenti dedicati, infrastrutture di laboratorio, tempi di elaborazione più lunghi ed è soggetta a restrizioni normative in molte giurisdizioni 4,8. Al contrario, i metodi di lavorazione meccanica includono il taglio, l'emulsificazione siringa-siringa, la filtrazione e l'uso di dispositivi meccanici a sistema chiuso. Questi approcci permettono una rapida preparazione intraoperatoria di micrograssi arricchiti da SVF con manipolazioni minime e tempi di risposta piùbrevi 6,9,10,11. I sistemi meccanici recenti hanno riportato tempi di elaborazione <15 min e risultati vicini a quelli dei metodi enzimatici in alcune serie, anche se il conteggio delle cellule misurato e la vitalità possono variare a seconda del dispositivo edell'operatore 9.
Nonostante la letteratura in espansione sulla SVF processata meccanicamente e sull'innesto di grasso per ulcere croniche e malattia diabetica del piede, i protocolli standardizzati e riproducibili specificamente destinati ai difetti traumatici dei tessuti molli di tipo carie sonoscarsi 7,12. I rapporti clinici pubblicati trattano comunemente ulcere croniche, ferite diabetiche o innesto di grasso estetico. Tuttavia, solo pochi forniscono un protocollo intraoperatorio a passo a passo che specifica parametri di raccolta, endpoint di emulsificazione, dimensioni dei pori di filtrazione, forza centrifugatrice (× g), dosaggio per area della ferita e criteri di prontezza per iniezione in contestitraumatici 7,13.
Le indicazioni pratiche sull'applicabilità sono quindi importanti per i team chirurgici che considerano questo approccio. In base alla letteratura disponibile e alla nostra esperienza operatoria, i volumi tipici di aspirazione intraoperatoria per una singola cavità sono di ~20-40 mL. Questo volume generalmente produce abbastanza micrograssi processati per riempire le carie piccole o moderate. Al contrario, le ricostruzioni a grandi volumi sono probabilmente al di fuori dell'ambito del processamento meccanico al punto di cura e possono richiedere procedure a stadi o strategie alternative 9,12. Gli approcci SVF meccanici sono anche meno adatti per ferite gravemente contaminate fino a quando l'infezione non è controllata; In tali casi, il debridamento aggiuntivo e la gestione delle infezioni (inclusi antibiotici mirati e, dove opportuno, la terapia con ferite a pressione negativa) dovrebbero precedere l'innesto7.
Il presente lavoro mira a fornire un protocollo intraoperatorio dettagliato e riproducibile per preparare micrograssi arricchiti con SVF tramite processi meccanici e per iniettare questo prodotto in difetti traumatici dei tessuti molli di tipo carie. Il protocollo enfatizza parametri operativi espliciti (prelievo, frammentazione e emulsificazione meccanica, filtrazione, centrifugazione espressa in × g, tecnica di iniezione e misurazione oggettiva dell'area della ferita) affinché altri team chirurgici possano adottare e convalidare il metodo nei propri contesti.
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Tutte le procedure sono state approvate dal Comitato Etico Istituzionale (Approvazione n. KL-2025062) e condotta in conformità con la Dichiarazione di Helsinki. Il consenso scritto informato è stato ottenuto da tutti i pazienti prima della partecipazione.
1. Selezione del paziente e valutazione preoperatoria
2. Preparazione preoperatoria
3. Raccolta del grasso
4. Trattamento meccanico del micrograsso arricchito con SVF
5. Iniezione nel sito del difetto
6. Cure postoperatorie e follow-up
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Un totale di otto pazienti con difetti traumatici dei tessuti molli di tipo cariale sono stati trattati utilizzando il protocollo descritto.
Caratteristiche della coorte
La coorte comprendeva cinque maschi e tre femmine, con un'età media di 51,5 ± 11,7 anni (intervallo 38-74 anni). I difetti si trovavano sull'arto infe...
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Questo studio descrive un protocollo clinicamente applicabile e riproducibile per il trattamento meccanico e il trapianto di micrograssi arricchiti con SVF nella gestione di difetti traumatici dei tessuti molli di tipo cavità traumatica. Il protocollo è pensato per l'implementazione al punto di assistenza in un contesto standard di sala operatoria e dà priorità alla semplicità procedurale, alla sicurezza e alla fattibilità rispetto alla caratterizzazione biologica. In questa piccola seri...
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Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.
Questo studio è stato supportato dal Programma Speciale Provinciale Provinciale di Innovazione Regionale in Scienza e Tecnologia per la Cooperazione Internazionale nella Scienza e Tecnologia (Grant n. 2023EHA043) e dal Dipartimento di Trauma e Microortopedia dell'Ospedale Zhongnan dell'Università di Wuhan per il Progetto Chiave Nazionale 2025 per la Ricerca Clinica (Progetto n.: 2025LCYJZX-ZD003). Gli autori ringraziano sinceramente il Dr. Qi Baiwen per il suo lavoro precedente che ha ispirato questo studio e per aver fornito preziose indicazioni sulla metodologia clinica. Ringraziamo inoltre i team infermieristici e chirurgici dell'Ospedale Zhongnan per il loro supporto nella cura dei pazienti e nel follow-up.
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| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0,9% Soluzione fisiologica normale | Baxter Healthcare (o equivalente) | Vari | Utilizzato come soluzione di base per la soluzione tumescente |
| Cannula a iniezione con punta smussata (22G e multipli per 50 mm) | CONPUVON ( ;), Cina | DZ 22 e volte; 50-C5 | Utilizzato per l'iniezione multistrato di micrograssi arricchiti con SVF |
| Centrifuga | Biotecnologia di lunga data ( ), Cina | LTA-1600 | Centrifuga clinica capace di generare circa 400 volte o poi; g |
| Fotocamera digitale / Smartphone | Qualsiasi | N/A | Fotografia standardizzata delle ferite durante il follow-up |
| Epinefrina | Farmacia ospedaliera locale | Vari | Aggiunto alla soluzione salina per raggiungere una concentrazione finale di 1:500.000 |
| Software ImageJ (Versione 1.53 o successiva) | Istituti Nazionali di Salute (USA) | Software libero | Utilizzato per la misurazione planimetrica dell'area della ferita |
| Cannula per liposuzione (2– 3 mm) | Fornitore medico standard | N/A | Utilizzato per il prelievo di tessuto adiposo dal sito donatore |
| Connettore Luer-lock (femmina-femmina) | Becton Dickinson (o equivalente) | Vari | Utilizzato per l'emulsificazione meccanica da siringa a siringa |
| Siringa Luer-lock (1, 5, 10, 20 mL) | Dispositivi Medici di Hongda ( ), Cina | Non specificato (offerta istituzionale) | Utilizzato per aspirazione, lavorazione meccanica e iniezione |
| Medicazione sterile / fasciatura | Farmacia ospedaliera | N/A | Per la copertura postoperatoria della ferita |
| Forbici chirurgiche (sterili) | Guangzhou Baitang Medical Devices Co., Ltd. | BT00301 (o modello rappresentativo simile) | Utilizzato per la frammentazione meccanica del tessuto adiposo |
| Garza di vaselina (10 cm e volte 10 cm) | Huaxi Medical Dressing Co., Ltd. ( ), Cina | Non specificato (offerta istituzionale) | Medicazione non aderente utilizzata per la cura postoperatoria delle ferite |
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