Presentiamo un modello murino riproducibile di allotrapianto composito vascolarizzato eterotopo da arto posteriore a collo. Questo protocollo supermicrochirurgico, che prevede anastomosi vasali da 0,3-0,5 mm, integra la guida del filamento di nylon e la cuffia venosa. Fornisce una piattaforma affidabile per studi traslazionali su tolleranza, lesioni ischemiche-reperfusione e meccanismi immunologici nell'allotrapiante composito vascolarizato.
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Articolo metodologico
Trapianto eterotopico da arto posteriore a collo nel topo: un modello supermicrochirurgico di allotrapianto composito vascolarizzato
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'allotrapianto composito vascolarizzato (VCA) è sempre più riconosciuta come un'opzione ricostruttiva che offre benefici sostanziali ai pazienti con grave perdita tissutale, incluse lesioni che colpiscono viso e mano. Nonostante il potenziale clinico, la VCA rimane limitata dalla complessità chirurgica, dalla necessità di immunosoppressione a lungo termine e dalla morbilità associata. I modelli preclinici sono quindi essenziali per perfezionare le tecniche chirurgiche, testare nuovi approcci immunomodulatori e indagare sulle lesioni ischemiche/reperfusioni.
Rispetto ai modelli di grandi animali, i modelli di roditori offrono vantaggi in termini di accessibilità e costo, rispettando più strettamente i principi delle 3R: Sostituzione, Riduzione e Raffinatezza. Tra questi, il topo offre vantaggi unici, tra cui la disponibilità di ceppi umanizzati, un ampio panel di anticorpi ben caratterizzati e la compatibilità con saghi immunologici avanzati. Queste caratteristiche rendono il mouse particolarmente prezioso per la ricerca sul VCA traslazionale.
La VCA murina, tuttavia, richiede competenze supermicrochirurgiche impegnative, poiché le anastomosi vascolari vengono eseguite su vasi di circa 0,3-0,5 mm di diametro. Per migliorare la riproducibilità, forniamo consigli tecnici che si sono dimostrati fondamentali per il successo di queste procedure. Questi includono l'inserimento di un filamento di nylon nel lumen del vaso per stabilizzare l'anastomosi, una separazione attenta tra arteria e vena su una distanza sufficiente lungo il pedicolo, dosaggio preciso di anestetici e manovre specifiche per prevenire la torsione del pedicolo. Evidenziiamo anche le insidie e gli errori comuni, offrendo indicazioni pratiche per migliorare i risultati.
Qui descriviamo un protocollo completo e graduale per il trapianto eterotopico tra arto posteriore e collo del topo, accompagnato da materiale video didattico. Questo modello non funzionale minimizza la morbilità postoperatoria rispetto al trapianto ortotopico, fornendo risultati robusti e riproducibili. È ideale per la formazione in supermicrochirurgia e per affrontare questioni sperimentali chiave nel VCA, tra cui la tolleranza immunitaria, la conservazione del trapianto e i meccanismi di ischemia/reperfusione. Questa metodologia offre ai ricercatori una piattaforma murina affidabile per promuovere la ricerca traslazionale sul VCA e sviluppare strategie innovative volte a migliorare i risultati nel trapianto ricostruttivo.
Introduzione
Negli ultimi due decenni, l'allotrapiante composito vascolarizzato (VCA) è emerso come un approccio ricostruttivo rivoluzionario per pazienti con grave perdita tissutale, inclusi infortuni alla mano, al viso e ad altri tessuti compositicomplessi 1. Oltre alle sue promesse cliniche, il VCA rimane tecnicamente impegnativo e limitato dall'immunosoppressione a vita, rendendo necessaria una ricerca traslazionale continua2.
Una formazione adeguata è fondamentale per padroneggiare gli aspetti chirurgici delVCA 3. Le prove su cadaveri si sono rivelate utili per insegnare la dissezione di unità anatomichecomplesse 4,5,6,7,8, ma i modelli sperimentali sono indispensabili per affrontare questioni biologichefondamentali 9. A questo proposito, i roditori offrono vantaggi significativi rispetto ai modelli animali di grandi dimensioni: sono meno costosi, più accessibili e in linea con i principi delle 3R (Sostituzione, Riduzione, Raffinamento)10.
Il topo offre diversi vantaggi per la ricerca sui trapianti, tra cui la disponibilità di ceppi geneticamente modificati e umanizzati, l'ampio spettro di anticorpi ben caratterizzati e sami immunologici, e la possibilità di combinare VCA con altre piattaforme precliniche nella medicinarigenerativa 11,12. Questi vantaggi specifici rendono il topo una specie ideale per esplorare la tolleranza immunitaria, le lesioni da ischemia/reperfusione e strategie terapeutiche innovative nell'ACV.
Utilizzare il collo come sito ricevente offre diversi vantaggi che migliorano la riproducibilità e l'affidabilità di questo modello. I vasi cervicali sono lunghi, di calibro sufficiente e possiedono pareti vascolari più spesse, facilitando un'anastomosi vascolare sicura. Inoltre, l'arteria carotide comune ad alto flusso favorisce la permeabilità anastomotica, mentre l'aspirazione diastolica cardiaca riduce il rischio di congestione venosa e trombosi. È importante notare che la posizione anatomica dell'innesto previene l'automutilazione, una complicanza comune nei modelli di trapianto degli arti posteriori. Inoltre, rispetto al trapianto ortotopico dell'arto posteriore, questo approccio eterotopico causa meno disturbo tissutale ed è associato a una morbilità e mortalità postoperatorie più basse, in particolare in contesti sperimentali fragili13.
Tuttavia, questo modello non funzionale non è destinato a valutare il recupero sensorimotorio o l'integrazione funzionale; Invece, dà priorità all'indagine dei meccanismi immunologici, inclusi il rigetto, la tolleranza e la lesione ischemia-reperfusione.
Tecnicamente, la VCA murina richiede l'esecuzione di anastomosi vascolari su vasi con diametri di circa 0,3-0,5mm 14. Questo livello di precisione rientra nel campo della supermicrochirurgia, che richiede notevole formazione ed esperienza15. Sebbene i modelli VCA sui ratti siano stati ampiamentedescritti 16,17, le segnalazioni di protocolli murini passo dopo passo rimangono scarse.
In questo articolo presentiamo un protocollo dettagliato guidato da video per il trapianto eterotopico da arto posteriore a collo nel topo. Questo modello non funzionale riduce la morbilità postoperatoria fornendo al contempo una piattaforma robusta e riproducibile per la ricerca sul VCA.
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Protocollo
Tutti gli animali ricevevano cure umane in conformità con la Guida per la Cura e l'Uso degli Animali da Laboratorio18. Tutte le procedure animali sono state esaminate e approvate dall'Institutional Animal Care and Use Committee (numero di protocollo: 202300058) così come dall'Ufficio di Revisione per la Cura e l'Uso degli Animali.
Le femmine di topi BALB/c sono state utilizzate come donatrici, mentre le femmine di topi C57BL/6J hanno funzionato come riceventi di alloinnesti VCA. Al momento del trapianto, i topi avevano tra 8 e 30 settimane, pesavano circa 20-30 g e venivano mantenuti in condizioni abitative standard. Tutti i dati presentati in questo studio sono stati generati da un singolo chirurgo.
1. Considerazioni chirurgiche generali
NOTA: Utilizzare strumenti e consumabili sterili e autoclavati (autoclavati) e mantenere un campo operativo asettico. Consulta la Tabella dei Materiali per gli strumenti richiesti.
- Anestesiare i topi utilizzando una camera di inalazione di isoflurano e mantenere l'anestesia tramite un cono respiratorio. Per dettagli, vedi rispettivamente le sezioni 2 e 3.
NOTA: Sebbene topi donatori e riceventi fossero comparabili per peso corporeo, sono state utilizzate diverse concentrazioni di isoflurano a causa delle differenze nell'invasività chirurgica e nel carico nocicettivo tra le procedure. La chirurgia del donatore comporta un processo chirurgico più esteso e invasivo, che include ampia dissezione tissutale e procuramento di innesti, che generano stimoli chirurgici e nocicettivi più forti e quindi richiedono concentrazioni più elevate di isoflurano sia per l'induzione che per il mantenimento, al fine di mantenere una profondità stabile dell'anestesia. Al contrario, la chirurgia del ricevente è relativamente meno invasiva, consistendo principalmente nell'esposizione dei vasi cervicali e nell'anastomosi vascolare; Di conseguenza, concentrazioni più basse di isoflurano erano sufficienti per ottenere un'anestesia chirurgica adeguata, minimizzando al contempo il rischio di depressione cardiovascolare o respiratoria eccessiva. - Trattare il campo chirurgico con una crema depilatoria prima della preparazione della pelle.
- Durante tutta la procedura, monitorare attentamente la frequenza cardiaca e respiratoria (frequenza cardiaca circa 350-450 battiti al minuto e frequenza respiratoria circa 60-100 respiri/minuto).
- Eseguire tutte le fasi chirurgiche al microscopio con ingrandimento adattato alle esigenze della supermicrochirurgia.
NOTA: Tutte le procedure chirurgiche sono state eseguite al microscopio operatorio dotato di una lente obiettivo dello 0,5× e 10× oculari, fornendo un intervallo totale di ingrandimento da circa 4× a 31,5×. Per incisioni cutanee e dissezione grossolane un ingrandimento più basso (circa 4×) è stato utilizzato un ingrandimento più elevato (fino a circa 31,5×) per la dissezione vascolare, il posizionamento delle cuffie e l'anastomosi microvascolare. - Seleziona la cauterizzazione bipolare (6 W), la cauterizzazione monopolare (Bovie; impostazione di massima potenza) o la legatura con sutura per l'emostasi, in base allo stadio operatorio e al contesto anatomico, come descritto nelle sezioni seguenti.
2. Procuramento parziale dell'arto posteriore sinistro del donatore
- Assicurati che la borsa termica (100 °F) funzioni correttamente.
- Indurre l'anestesia utilizzando isoflurano al 3,5% somministrato in una camera di induzione con un flusso di ossigeno di 1 L/min, poi mantenere l'anestesia al 3% tramite un cono respiratorio con flusso di ossigeno impostato a 0,8-1 L/min.
- Rimuovere i peli dall'addome fino alla caviglia del topo donatore usando una crema depilatoria.
- Segna un'incisione cutanea, quadrangolare, che va da appena prossimale ai capezzoli fino a appena prossimale all'articolazione del ginocchio (Figura 1).
NOTA: Preferisci l'arto posteriore sinistro quando possibile, perché è più facile da dissezionare. - Sollevare il lembo cutaneo, partendo dal suo perforatore (arteria epigastrica e vena inferiore superficiale), e scheletroizzare secondo necessità.
- Trancetto il legamento inguinale in modo cranico e procedere con la dissezione caudale. In questa fase, assicurati che i rami esposti siano coagulati con cauterizzazione bipolare.
- Coagulare e dissezionare il tessuto adiposo circostante utilizzando una cauterizzazione monopolare più grande per ottenere la piena esposizione dei vasi iliaci esterni che si estendono fino al livello dei vasi iliaci comuni. Dissezionare i tessuti circostanti delle arterie iliache esterne e comuni utilizzando una cauterizzazione monopolare più piccola.
- Flette l'articolazione del ginocchio per identificarne la posizione e aprila usando la cauterizzazione bipolare.
- Estendi nuovamente l'articolazione del ginocchio e trasetta il bicipite femorale, il quadricipite femorale e altri muscoli associati alla cauterizzazione bipolare durante la coagulazione.
NOTA: In questo stadio, la quantità di muscolo presente nell'innesto dovrebbe essere ridotta al minimo entro un intervallo che non compromette l'arteria femorale. Questa precauzione viene adottata per prevenire la deviazione della trachea del topo ricevente o la compromessa del movimento degli arti anteriori dovuta al gonfiore della massa muscolare innestata nella regione cervicale. - Usa la cauterizzazione bipolare per liberare la testa femorale.
- Coagulare con attenzione eventuali rami rimanenti provenienti dai vasi iliaci esterni e comuni, così come dal tessuto muscolare circostante, e sezionare con cauterizzazione bipolare mantenendo l'emostasi.
NOTA: A questo punto, l'innesto rimane collegato al topo donatore solo nella giunzione dove i vasi iliaci comuni si diramano dall'aorta addominale e dalla vena cava inferiore. - Perforare la membrana tra l'arteria e la vena in un punto distante dall'innesto, poi collegare un retrattore oftalmico all'arteria.
NOTA: Posiziona sempre l'arteria nel retrattore, mai nella vena, perché la vena è troppo fragile. - Separare con cura vena e arteria il più distalmente possibile usando forbici Potts curve.
NOTA: Questo passaggio richiede particolare cura e precisione. Sebbene la separazione sia dispendiosa in termini di tempo, meticolosa previene complicazioni in seguito. - Legare i rami collaterali con Prolene 10-0.
NOTA: Evita la cauterizzazione in questa fase. Dissezionare entrambi i lati del ramo prima della legatura per prevenire lesioni. - Lega l'arteria con 8-0 Prolene. Posizionare un punto di sutura a stirpe sull'arteria come indicatore per prevenire torsioni durante l'anastomosi vascolare.
NOTA: Allenta il punto di sutura per evitare di danneggiare il pedico. - Lega la vena con 8-0 Prolene. Posizionare suture di soglia in due punti della vena per facilitarne il passaggio attraverso la manetta. Poiché la vena è molto sottile e la parete del vaso può essere talvolta difficile da distinguere, inserisci un nylon 4-0 nel lumen per facilitare il posizionamento delle suture di sosta.
- Fai passare la vena attraverso il bracciale usando suture a fermo e blocca il bracciale con una clip vascolare.
- Everte la parete del recipiente e fissala al polsino con nylon 9-0.
- Ripristinare il bracciale alla sua forma originale rilasciando la deformazione con la clip vascolare dopo la fissazione (Figura 2).
- Risciacquare l'innesto con 2 mL di soluzione fisiologica eparinizzata preparata a una concentrazione finale di 50 IU/mL attraverso l'arteria (Figura 3).
Figura 1: topo donatore con segni cutanei preoperatori che delineano le incisioni previste sull'arto posteriore sinistro. La direzione cranica è indicata in cima all'immagine. L'incisione è orientata da appena prossimale ai capezzoli fino a appena prossimale all'articolazione del ginocchio (Passo 2.4). Questa marcatura garantisce un'adeguata esposizione del perforatore epigastrico inferiore superficiale. Stampato con permesso; diritti d'autore detenuti da Eduardo D. Rodriguez, MD, DDS. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 2: Collocamento della cuffia venosa sulla vena dell'innesto. La vena iliaca esterna viene evertita sopra un bracciale in polietilene e fissata con nylon 9-0 (Passo 2.18). Questo passaggio garantisce la permeabilità del lumen e fornisce un'interfaccia rapida e affidabile per l'anastomosi successiva dalla fine alla cuffia con la vena giugulare ricevente. (A) Utilizzare una clip vascolare per sollevare la vena, permettendo una visualizzazione chiara sia del lumen venoso che di quello interno del bracciale. (B) Dopo aver fissato la vena al bracciale con suture di nylon 9-0 interrotte, confermare la fissazione circonferenziale della parete venosa al manico (punta di freccia blu). (C) Dopo la fissazione, ripristinare il bracciale alla sua forma originale rilasciando la deformazione con la clip vascolare (punta di freccia verde). Stampato con permesso; diritti d'autore detenuti da Eduardo D. Rodriguez, MD, DDS. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 3: Innesto prelevato che mostra l'alloinnesto parziale dell'arto posteriore e il pedolo vascolare. Il lato sinistro dell'immagine corrisponde al lato prossimale dell'innesto, mentre il lato destro corrisponde al lato distale. I vasi iliaci esterni e comuni sono preservati in continuità con il braccio muscolare e l'osso femorale. Arteria e vena rimangono separate per diversi millimetri per prevenire torsioni e consentire un orientamento ottimale durante l'incasto. Stampato con permesso; diritti d'autore detenuti da Eduardo D. Rodriguez, MD, DDS. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
3. Chirurgia al ricevente
- Assicurati che la borsa termica (100 °F) funzioni correttamente.
- Indurre l'anestesia con il 2,5% di isoflurano e mantenere il 2%.
- Posizionare l'arto superiore destro verso il basso invece che orizzontalmente per facilitare l'esposizione del campo chirurgico.
- Somministrare 0,5 mL di soluzione fisiologica sottocutanea per idratazione.
- Applica un lubrificante oftalmico prima dell'intervento, poiché si tratta di una procedura di sopravvivenza.
- Rimuovere i peli della regione cervicale utilizzando una crema depilatoria, per almeno 1 cm intorno al sito dell'incisione previsto.
- Fai una piccola incisione circolare cutanea (circa 10 mm). Inserire le forbici in modo caudale attraverso l'incisione e aprirle delicatamente per sezionare il tessuto sottocutaneo del torace, creando così una tasca per il posizionamento dell'innesto.
- Espone la vena giugulare esterna cauterizzando e dividendone i rami con una cauterizzazione monopolare più grande.
- Cauterizza il muscolo sternocleidomastoideo usando la cauterizzazione bipolare, poi dividilo.
- Identifica e analizza con attenzione l'arteria carotide comune.
- Eseguire anastomosi vascolari:
- Anastomosi arteriosa: clampare l'arteria carotide comune il più possibile prossimalmente con una clip vascolare, poi legare e dividerla con 8-0 Prolene in un sito appena prossimale alla biforcazione delle arterie carotide esterne e interna.
- Anastomosi arteriosa: eseguire un'anastomosi end-to-end con nylon 11-0 o 12-0 utilizzando sei suture interrotte (inizialmente quattro punti anteriori, capovolgere l'arteria, poi completare la parete posteriore). Inserisci nylon 5-0 in entrambi i recipienti e usalo come stent (Figura 4).
NOTA: Durante le fasi finali dell'anastomosi, le ultime due suture devono essere passate ma lasciate non legate. Il nylon 5-0 viene quindi rimosso prima di legare queste suture per completare la chiusura. - Anastomosi venosa: Clampa la vena giugulare esterna il più prossimalmente possibile con una clip vascolare, legala il più distalmente possibile usando 8-0 Prolene, e poi dividerlo.
- Anastomosi venosa: inserire il bracciale nella vena giugulare esterna e fissarla con nylon 9-0, facendo attenzione a evitare torsioni del pedico.
NOTA: Completare l'anastomosi venosa prima della declamping arteriosa, poiché la reperfusione precoce può predisponere alla trombosi.
- Somministrare 0,5 mL di soluzione fisiologica per via sottocutanea per l'idratazione e posizionare alginato attorno all'anastomosi arteriosa per minimizzare il sanguinamento dal sito.
- Sclampare prima la vena, poi l'arteria (Figura 5).
- Posizionare con attenzione l'innesto nella tasca sottocutanea del petto, evitando lo spostamento della trachea o la restrizione del movimento dell'arto anteriore. Assicurati che il perforatore non sia attorcigliato.
- Somministrare analgesia in questo momento (Meloxicam 5 mg/mL, iniezione sottocutanea di 100 μL; Buprenorfina 0,3 mg/mL, iniezione sottocutanea da 80 μL).
- Chiudi la pelle con suture 6-0 Ethilon, posizionate strettamente per evitare che si allenti durante i movimenti postoperatori (Figura 6).
Figura 4: Anastomosi arteriosa. La direzione cranica è indicata in cima all'immagine. Monofilamenti di nylon vengono inseriti nel lumen del recipiente. La sutura di soggiorso arteriosa posta durante il prelievo dell'innesto funge da indicatore di orientamento durante l'anastomosi per evitare la torsione arteriosa. L'anastomosi viene eseguita utilizzando nylon 11-0 e pinze n. 5 (Passo 3.11.2). Stampato con permesso; diritti d'autore detenuti da Eduardo D. Rodriguez, MD, DDS. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 5: Reperfusione dell'innesto dopo la declamping arteriosa e venosa. La direzione cranica è indicata in cima all'immagine. Una volta completate le anastomosi arteriose e venose (arteria: da capo a estremo; vena: basata a cuffia), confermare la corretta orientazione arteriosa e venosa senza torsione, e le pinze vengono rilasciate—prima sulla vena, poi sull'arteria—per ristabilire il flusso sanguigno. Un cambiamento immediato di colore della paletta cutanea conferma una perfusione riuscita (Passo 3.13). Stampato con permesso; diritti d'autore detenuti da Eduardo D. Rodriguez, MD, DDS. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 6: Ultima apparizione postoperatoria immediata. L'innesto è posizionato eterotopicamente nella regione cervicale senza tensione o deviazione tracheale (Passo 3.14). L'incisione cutanea viene chiusa con suture Ethilon 6-0 interrotte, dopo aver confermato immediatamente un'adeguata pulsazione arteriosa e un ritorno venoso (Passo 3.16). Questa configurazione minimizza l'autolesionismo e facilita l'ispezione quotidiana dei trapinti. Stampato con permesso; diritti d'autore detenuti da Eduardo D. Rodriguez, MD, DDS. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
4. Cure post-operatorie
- Monitora il mouse una volta al giorno.
NOTA: Adatta il monitoraggio alle condizioni dell'animale e dell'innesto in consultazione con il veterinario. I topi destinatari della casa singolarmente per prevenire lesioni da innesto. - Somministrare analgesia (Meloxicam 5 mg/mL, 100 μL iniezione sottocutanea; Buprenorfina 0,3 mg/mL, iniezione sottocutanea da 80 μL). Inoltre, se si osservano segni di disidratazione, somministrare soluzione fisiologica normale sottocutanea per l'integrazione di liquidi.
- Valutare l'innesto e effettuare esami fisici quotidiani, documentando i risultati con fotografie scattate con lo stesso dispositivo (Figura 7).
Figura 7: Evoluzione clinica del paddle cutaneo dell'innesto nel tempo. Le fotografie frontali seriali illustrano l'evoluzione postoperatoria. (A) Giorno dell'intervento, mostra buona perfusione di innesti. (B) POD 7, che mostra la risoluzione dell'eritema e la stabilizzazione del colore della pelle. (C) POD14, la palette cutanea rimane vitale, con ricrescita visibile dei peli entro il giorno 14 postoperatorio. Questo studio si concentra sulla tecnica chirurgica e i regimi immunosoppressivi differivano tra i casi. Nel caso mostrato nella Figura 7, CTLA-4-Ig (500 μg) è stato somministrato intraperitonealmente su DOS e POD 2, 4, 7 e 9, seguito da Lag3 BiTS intraperitoneale su POD 11, 13, 16, 18 e 21 (50 μg su POD 11; 100 μg successivamente). Stampato con permesso; diritti d'autore detenuti da Eduardo D. Rodriguez, MD, DDS. Abbreviazioni: DOS = giorno dell'intervento; POD = giorno postoperatorio; BiTS = Soppressori Bi-funzionali a restrittura tissutale. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
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Risultati
I risultati principali sono riassunti nella Tabella 1.
| Valore | Commenti/Descrizione | |
| Totale degli animali completati lo studio | 13 | |
| Complicazioni |
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Discussione
L'uso di punte in nylon per la manipolazione dei vasi è stato segnalato per la prima volta da Narushima et al. nel 2008 nel contesto dellasupermicrochirurgia 21. In questo contesto, lavorare con vasi di calibro estremamente piccolo (≤0,5 mm) presenta sfide tecniche specifiche, come la difficoltà di introdurre le pinze nel lumen del vaso e il rischio potenziale di incorporare involontariamente la parete posteriore durante l'anastomosi. L'introduzione di monofilamen...
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.
Ringraziamenti
Gli autori riconoscono l'uso degli animali in questo studio ed esprimono rispetto per il loro ruolo nell'avanzamento della conoscenza scientifica e medica, in conformità con le linee guida etiche e il principio delle 3R (Sostituzione, Riduzione, Raffinatezza). Gli autori riconoscono inoltre il laboratorio veterinario della NYU Langone Health (New York, USA) per aver fornito gli animali e le strutture utilizzate per questo studio.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Iniezione di NaCl allo 0,9%, USP (Siringa pre-riempita, 10 mL) | Becton, Dickinson and Company | E0103-01 | |
| 30 G x 1/2 in. Ago BD PrecisionGlide | Becton, Dickinson and Company | 305106 | |
| Nastro chirurgico 3M Durapore | 3M Healthcare | 1538-2 | Usato per fissare gli arti di un topo |
| 4-0 ETHILON Ago FS-2 nero 18" (45 cm), sutura monofilamento in nylon | Ethicon | 662G | Utilizzato come stent inserendolo nella vena iliaca comune per facilitare il posizionamento di suture a sstay per il passaggio della vena di innesto attraverso il bracciale |
| 5-0 ETHILON Ago Nero PS-3 18" (45 cm), Sutura in Nylon Monofilamento | Ethicon | 1668G | Usato come stent durante l'anastomosi arteriosa |
| 6-0 ETHILON Ago P-1 Nero 18" (45 cm), Sutura in Nylon Monofilamento | Ethicon | 697G | Utilizzato per la chiusura della pelle |
| 8-0 Ago PROLENE Blue 24" (60 cm) BV130-5, Sutura monofilamento in polipropilene | Ethicon | EPM8739 | Utilizzato per la legatura dell'arteria carotide comune, della vena giugulare esterna e dei vasi iliaci comuni |
| 9-0 ETHILON Ago Nero 12" (30 cm) CS140-6, Sutura in Nylon Monofilamento | Ethicon | 9013G | Usata per fissare il bracciale al recipiente |
| 10-0 PROLENE Blue 12" (30 cm) CS160-6 Ago, Sutura in Monofilamento in Polipropilene | Ethicon | 7761G | Utilizzato per la legatura dei rami collaterali tra l'arteria e la vena nel pedicholo del trapianto |
| Medicazione per ferite alginato (4 in e 4 in) | Dimora | DM201417 | Utilizzato per ottenere l'emostasi per perdita anastomotica arterio-anastomotica dopo la declamping |
| Cautery Tip Fine Ajust-A-Temper ad alta temperatura | Strumento di Precisione Mondiale | AA11 | |
| Punta fine a bassa temperatura per cauteri | Strumento di Precisione Mondiale | AA02 | |
| Pinza classica lunga 18 cm, manico rotondo di 8 mm di diametro; mascella curva, diametro della punta di 0,3 mm, con piattaforma di lezione | Chirurgia e Accuratezza Scientific Instruments Corporation | ASSI231 | |
| Spugne Non Tessute Dealmed, 2"x2", 4 fili, Non Sterili, 200 Pezzi | Trattato | 783222 | |
| Pinza Dumont #5/45 | Strumenti scientifici di qualità | 11251-35 | |
| Drappeggiamento a uso generale dynarex & reg; Drappeggio per asciugamani foderato in poliuretano 18 W x 26 L Sterile | Dynarex Corporation | 4410 | |
| Grieshaber Retrattori a Iride Flessibile | Alcon | 611.74 | Utilizzato sull'arteria durante la separazione tra arteria e vena del pedicolo |
| Portaago Halsey, Standard | Strumento di Precisione Mondiale | 14110 | |
| Sale di eparina sodica dalla mucosa intestinale suina | Sigma-Aldrich | H3393-100KU | |
| Isoflurano, anestetico inalatorio USP | Pivetal | 46066-115-04 | |
| Kimtech Science Kimwipes Tergicristalli Delicati per Compiti | Kimberly-Clark Professionista | 34155 | |
| Illuminatore per microscopio a fibra ottica LED KL 1600 | Schott | 150.600 | |
| McPherson-Vannas Forbici, 7cm, Dritte, 3mm Lame | Strumenti di Precisione Mondiale | 14177 | |
| Pinza Micro Jewelers n. 3LX (15,5 cm) | KLS-Martin L.P. | 12-418-04-07 | |
| Aghi microchirurgici con filo per suture attaccati | Strumenti scientifici di qualità | 12052-11 | Usate come suture per l'anastomosi arteriosa e come suture a sosta per i monconi vascolari del peduncolo |
| Crema per il corpo Nair Sparatorio | Nair (di Church & S. Dwight Co., Inc.) | UPC 022600255232 | |
| Tubi in poliimide | Plastica Professionale | 302761 | Usato come manette |
| Sterile 0,9% soluzione salina normale, USP (500 mL) | Medline Industries, Inc. | DYND500MLS | |
| Applicatori sterili con punta di cotone | Prodotti Medici Puritani | 25-806 10WC | |
| Pinza Dumont #5 Studente | Strumenti scientifici di qualità | 91150-20 | |
| Forbici svizzere, 9 cm, curva, lama fine | Strumenti di Precisione Mondiale | 504520 | |
| Microscopio stereo SZX10 | Evident (precedentemente Olympus) | SZX10 | |
| Forbici Ultra Vannas, 8cm, inclinata sul filo, lama da 4mm | Chirurgia e Accuratezza Scientific Instruments Corporation | ASIM163 |
Riferimenti
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