Effetto dell'agopuntura bucale con analgesia controllata dal paziente su dolore, infiammazione e coagulazione nei pazienti con cancro gastrico

Sommario

Qui presentiamo un protocollo per studiare agopuntura bucale + PCIA in 142 pazienti con GC per esaminare dolore, infiammazione, coagulazione e meccanismi analgesici.

Abstract

L'agopuntura bucale combinata con analgesia controllata dal paziente (PCIA) è comunemente utilizzata dopo l'intervento chirurgico. Questo studio si è concentrato sugli effetti dell'agopuntura combinata con PCIA sul dolore post-operatorio, la risposta infiammatoria e la funzione della coagulazione nei pazienti con cancro gastrico (GC). Da marzo 2024 a gennaio 2025, sono stati selezionati 142 pazienti con GC e assegnati a un gruppo di routine (79 casi) e a un gruppo di agopuntura buccale (63 casi). Sono stati rilevati livelli pre- e postoperatori di mediatori del dolore sierico (SP, PGE2, β-EP e Glu), marcatori infiammatori (IL-6, TNF-α, IL-10 e CD11b), parametri della funzione della coagulazione (PT, APTT, TT, D-D e TAT), attivazione piastrinica (GP IIb/IIIa, CD62P, GMP-140 e PAC-1). Gli indici sierologici hanno indicato riduzioni post-trattamento di SP, PGE2 e Glu, nonché un'elevazione della β-EP nel gruppo dell'agopuntura buccale (P<0,05). Inoltre, nel gruppo agopuntura buccale sono state osservate diminuzioni più pronunciate di IL-6 e CD11b, e aumenti di IL-10, rispetto al gruppo di routine (P<0,05). Per quanto riguarda la funzione della coagulazione del sangue, sono stati osservati D-D, TAT e sCD62P più bassi nel gruppo agopuntura bucale rispetto a quello di routine (P<0,05). Nel frattempo, GP IIb/IIIa, CD62P, GMP-140 e PAC-1 nel gruppo di agopuntura buccale erano inferiori rispetto al gruppo di routine (P<0,05). L'agopuntura bucale combinata con PCIA può esercitare effetti analgesici attraverso molteplici meccanismi, tra cui la regolazione dell'equilibrio dei mediatori del dolore, il sollievo dell'infiammazione, il miglioramento della funzione endoteliale vascolare e la correzione di uno stato ipercoagulabile. Può anche migliorare gli esiti analgesici clinici e ridurre il consumo di oppioidi con buona sicurezza.

Introduzione

La chirurgia laparoscopica per il cancro gastrico (GC) è minimamente invasiva, tuttavia il dolore post-operatorio, la risposta iperinfiammatoria e i disturbi della coagulazione restano problemi significativi che ostacolano il recupero del^{paziente 1}. L'analgesia controllata dal paziente (PCIA) è il principale programma di analgesia postoperatoria nella pratica^{clinica 2}, e il suo effetto è stato verificato molte^{volte 3,4}. Negli ultimi anni, la Medicina Tradizionale Cinese (MTC) è stata riconosciuta a livello internazionale per la sua eccellente sicurezza nelle applicazioni^{cliniche 5,6}. L'agopuntura buccale, come ramo emergente della tecnologia micro-agopuntura della MTC, è stata confermata in numerosi studi che, combinata con PCIA, può migliorare meglio il dolore dei pazienti dopo^{l'intervento chirurgico 7}. Zhu DX et al. hanno chiaramente sottolineato che l'agopuntura buccale combinata con PCIA può ridurre il dolore postoperatorio nei pazienti con GC⁸. Tuttavia, questo studio ha rilevato che gli studi analgesici sull'agopuntura bucale combinati con PCIA di solito osservano solo i cambiamenti del dolore dei pazienti da una prospettiva soggettiva, come la scala analogica visiva (VAS⁾⁹. Pochi studi hanno esplorato il meccanismo dell'agopuntura combinata con PCIA a partire da indicatori clinici oggettivi.

Questo studio è il primo a esaminare gli effetti dell'agopuntura bucale combinata con PCIA su indicatori clinici oggettivi, inclusi i mediatori del dolore, la funzione coagulante e l'attivazione piastrinica, nei pazienti con GC, confermando così gli effetti regolatori multisistemici dell'agopuntura bucale sul corpo umano. I risultati di questo studio aiuteranno i clinici a comprendere meglio il meccanismo analgesico dell'agopuntura bucale combinata con PCIA.

Protocollo

Lo studio ricevette l'approvazione dell'Ospedale dell'Università di Jiangnan e aderì rigorosamente ai principi della Dichiarazione di Helsinki. Si tratta di uno studio osservazionale retrospettivo e la registrazione degli studi clinici non era richiesta in conformità con le linee guida nazionali pertinenti per la ricerca retrospettiva al momento della progettazione e dell'attuazione dello studio. I reagenti, i materiali di consumo e le attrezzature necessarie sono elencati nella Tabella dei Materiali.

1. Soggetti di ricerca

Uno studio retrospettivo è stato condotto su 142 pazienti con GC ricoverati nel nostro ospedale da marzo 2024 a gennaio 2025. La dimensione del campione è stata calcolata utilizzando il software PASS.

Criteri di inclusione: (1) GC istologicamente confermata (TNM stadio I-III); (2) Intervento laparoscopico standard di radicali pianificato o completato con dissezione dei linfonodi D2; (3) Età 40–75 anni, indipendentemente dal sesso, con un indice di massa corporea (BMI) di 18,5–28 kg^{/m 2}; (4) Nessuna chemioradioterapia neoadjuvante preoperatoria; (5) Nessun uso di analgesici non protocollari entro 24 ore dall'operazione.

Criteri di esclusione: (1) Insufficienza cardiaca/epatica/renale grave, malattia autoimmune, infezioni attive o disfunzione della coagulazione; (2) Lesioni o infezioni cutanee del viso; (3) Uso prolungato di anticoagulanti/farmaci antipiastrini (ad esempio, warfarina, clopidogrel per >1 settimana); (4) Storia passata del dolore cronico (punteggio Visual Analogue Scale [VAS] ≥4 persistente > 3 mesi); (5) Deficit psichiatrici o cognitivi; (6) Trattamento pregresso con agopuntura.

Tra questi, 79 pazienti hanno ricevuto analgesia postoperatoria standard (gruppo di routine) e altri 63 pazienti hanno ricevuto anche la terapia di agopuntura bucale (gruppo agopuntura buccale) (Figura supplementare 1). I due gruppi hanno mostrato dati di base comparabili, come età, sesso e BMI (P>0,05, Tabella 1).

2. Raggruppamento e interventi

Pompa PCIA (sufentanil 1,5 μg/kg + tropisetron 10 mg, dose di fondo 2 mL/h), eparina a basso peso molecolare (4000 UI al giorno a partire dalle 12 ore post-operatorio) e cefuroxima (1,5 g ogni 8 ore per 24 ore), e il prelievo venoso per la funzione della coagulazione è stato effettuato alle 08:00 della mattina seguente (12 ore dopo la somministrazione dell'LMWH, prima della dose successiva) per evitare l'influenza diretta dell'LMWH sulla rilevazione dell'indice di coagulazione. Tutti i pazienti di entrambi i gruppi hanno ricevuto la suddetta gestione standardizzata post-operatoria, anticoagulante e anti-infecciosa, con monitoraggio di routine dei parametri vitali e cure postoperatorie in conformità con il percorso clinico per la gastrectomia radicale laparoscopica per GC.

1. Agopuntura bucale
   L'intervento di agopuntura buccale è stato avviato 12 ore dopo l'intervento, una volta al giorno per 3 giorni consecutivi, con la stessa selezione dei punti di acupuntura e metodo operatorio per ogni trattamento: punti di agopuntura dorsale sinistra, bilaterale Zhongjiao e Xiaojiao. La disinfezione da alcol veniva eseguita prima dell'inserimento dell'ago. Utilizzando aghi specializzati usa e getta per agopuntura buccale (0,18 mm × 13 mm), i praticanti applicavano pressione del tubo prima di una penetrazione rapida della pelle, quindi inserivano gli aghi verticalmente fino a una profondità di 3 mm con un tempo di ritenzione di 30 minuti. Tutte le inserzioni e manipolazioni dell'ago sono state eseguite da agopuntori TCM abilitati con oltre 5 anni di esperienza clinica in agopuntura buccale, per garantire la standardizzazione degli interventi.

3. Prelievo del sangue e analisi

Il sangue venoso a digiuno è stato raccolto dai pazienti 1 giorno prima dell'intervento (basale, prima del trattamento) e 72 ore dopo l'intervento (post-trattamento) per i seguenti esami:

1. Saggio immunoenzimatico legato al plasma (ELISA)
   Un anticorpo di cattura (diluito 1:100) è stato aggiunto alla piastra dei 96 pozzi e incubato a 4 °C durante la notte. Ogni pozzo è stato bloccato con 200 μL di BSA-PBS al 5%, seguiti dall'aggiunta di 100 μL del campione di plasma da analizzare (β-EP a diluizione 1:2, TAT a diluizione 1:10) e da un'incubazione di 2 ore. Successivamente, sono stati aggiunti a turno anticorpi secondari biotinilati (1:2000), Streptavidina-HRP e substrato TMB, con il valore OD misurato a 450 nm.
2. Serum ELISA
   50 μL di standard/campione sono stati combinati con 50 μL di reagente di rilevamento degli anticorpi per 2 ore a temperatura ambiente. Dopo aver aggiunto 100 μL di streptavidina-HRP, la reazione è stata sviluppata con 100 μL di substrato TMB e si è interrotta con 2 M H₂SO₄. I livelli di IL-6, TNF-α e IL-10 sono stati determinati utilizzando misurazioni a doppia lunghezza d'onda a 450 nm/540 nm.
3. Radioimmunosaggio
   Il plasma EDTA (1 mL) è stato acidificato con l'1% di TFA e sottoposto a estrazione in fase solida utilizzando una colonna C18. Dopo l'aggiunta del complesso anticorpo-PEG secondario, la miscela è stata centrifugata (3500 × g, 20 min) e la radioattività di precipitazione (cpm) della SP è stata misurata utilizzando un contatore γ.
4. Analisi di chemiluminescenza:
   Un analizzatore elettrochemiluminescenze automatizzato veniva utilizzato per rilevare i livelli di PGE2.
   1. Citometria a flusso
      Dopo l'incubazione con 100 μL di sangue intero anticoagulato con EDTA e 5 μL di anticorpi, sono stati aggiunti 2 mL di tampone BD Pharm Lyse. I campioni sono stati analizzati su un citometro a flusso e l'intensità media di fluorescenza (MFI) di CD11b, GP IIb/IIIa, CD62P, GMP-140 e PAC-1 è stata calcolata utilizzando FlowJo v10.
   2. Analisi della funzione di coagulazione
      Un analizzatore automatico di coagulazione è stato utilizzato per rilevare i livelli di PT, APTT, TT e D-D.

4. Analisi statistica

L'analisi dei dati è stata condotta utilizzando SPSS 26.0. Sono stati utilizzati test chi-quadrati per confrontare i dati di conteggio [n(%)]. Le variabili continue, riportate come χ±s), sono state analizzate utilizzando il test t dei campioni indipendenti (con test t accoppiati per confronti all'interno del gruppo). La correzione di Bonferroni è stata utilizzata per adeguare i valori P per confronti multipli tra più indicatori di esito, e i valori P <0,05 sono stati considerati statisticamente significativi.

Risultati

Effetto dell'agopuntura bucale combinata con PCIA sui mediatori del dolore siero
I livelli basali di mediazione del dolore erano simili nei due gruppi (P>0,05). Dopo l'intervento, entrambi i gruppi hanno mostrato cambiamenti significativi nei livelli di questi mediatori del dolore, con riduzioni marcate di SP, PGE2 e Glu, oltre a un aumento della β-EP (P<0,05). Tuttavia, il gruppo dell'agopuntura bucale ha mostrato miglioramenti più evidenti rispetto al gruppo di rout...

Discussione

Questo studio è il primo a valutare sistematicamente gli effetti regolatori multi-bersaglio dell'agopuntura bucale combinata con la terapia PCIA sui mediatori del dolore, sulle risposte infiammatorie e sulla funzione della coagulazione nei pazienti sottoposti a chirurgia laparoscopica GC. I risultati indicarono che l'agopuntura bucale non solo alleviava efficacemente il dolore (come dimostrato dalla riduzione della SP, PGE2 e Glu e dall'elevato β-EP), ma riduceva anche l'infiammazione (r...

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Agopuntura bucale	Maanshan Bond Medical Devices Co., LTD	Numero di iscrizione: 20202080581	La terapia con microaghi per il trattamento di malattie sistemiche pungente punti di agopuntura specifici sulla guancia
Cefuroxima	Glaxo Wellcome UK Limited	Numero del lotto: H20020200	Gli antibiotici cefalosporinici di seconda generazione esercitano effetti antibatterici ad ampio spettro inibendo la sintesi delle pareti cellulari batteriche.
Analizzatore elettrochemiluminescenza	Roche	Cobas E 411	Le apparecchiature di rilevamento medico basate sulla tecnologia elettrochemiluminescenza rilevano le sostanze in tracce tramite reazioni antigene-anticorpi combinate con segnali elettroluminescenze.
Citometro a flusso	Beckman Coulter	CytoFLEX nano	Gli strumenti basati sul principio della rilevazione ottica misurano i parametri caratteristici fisici e chimici delle cellule nel flusso liquido per ottenere un'analisi e una selezione automatica delle cellule. ‌
Analizzatore automatico della coagulazione del sangue	Mindray	C2000-A	I livelli di fattori di coagulazione, sistemi anticoagulanti e sistemi fibrinolitici nei campioni di sangue umano e animale sono stati rilevati e analizzati tramite tecniche come il metodo della coagulazione, il metodo del substrato cromogenico e l'immunoturbidimetria.
IL-10 ELISA Kit	Beijing Yishao Shenzhou Technology Co., LTD	SEKA10947
IL-6 ELISA Kit	Beijing Yishao Shenzhou Technology Co., LTD	KIT10395A	Uno strumento di rilevamento biologico basato su reazioni specifiche antigene-anticorpi e sistemi di amplificazione catalitica enzimatica è ampiamente utilizzato nei campi della medicina, della biologia e del monitoraggio ambientale.
Eparina a basso peso molecolare	Hainan General Alliance Pharmaceutical Co., LTD	Numero del lotto: H20010300	Un farmaco antitrombotico antitrombonico dipendente da antitrombombina III, utilizzato principalmente per la prevenzione e il trattamento della trombosi venosa profonda, ed è anche adatto alla prevenzione dei coaguli di sangue nell'emodialisi.
Pompa PCIA	Henan Longshan Medical Devices Co., LTD	Numero di registrazione: 20202140237	Un dispositivo medico che aiuta i pazienti ad alleviare il dolore causato da interventi chirurgici, traumi o malattie croniche, fornendo continuamente o su richiesta antidolorifici al corpo.
Analizzatore radioimmunosaggio	Revvity Biomedical (Shanghai) Co., LTD	GC-911r	Uno strumento utilizzato per determinare il grado di legame di marcatori radioattivi e anticorpi nel corpo, spesso impiegato per misurare ormoni, farmaci, marcatori tumorali, ecc. nel sangue.
SPSS	IMB	v.26.0	Utilizzato per statistiche dei dati, data mining e analisi predittiva.
Sufentanil	EuroCept B.V.	Numero lotto: H20150125	Un potente analgesico oppioide e anche uno specifico & mu; -Agonista dei recettori.
TNF-α ELISA Kit	Youlike (Shanghai) Life Sciences Co., LTD	YLK1341E
Tropisetron	Gruppo Farmautico Fu 'an Ningbo Tianheng Pharmaceutical Co., LTD	Numero lotto: H20052460	Un antagonista del recettore 5-HT3, utilizzato principalmente per la prevenzione e il trattamento di nausea, vomito e convomito post-operatorio causati dalla chemioterapia oncologica.