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Articolo di ricerca

Effetto regolatorio della moxibustion sulla polarizzazione e migrazione dei macrofagi nei ratti modello RA e il ruolo di TIM-3

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DOI:

10.3791/70436

27 marzo 2026

In questo articolo

Sommario

Questo studio esamina gli effetti regolatori della moxibustione sulla polarizzazione e migrazione dei macrofagi nei modelli ratti di artrite reumatoide, con particolare attenzione al ruolo dell'immunoglobulina a cellule T e della proteina contenente il dominio mucinico 3 (TIM-3), per chiarire i meccanismi terapeutici della moxibustion in questa malattia.

Abstract

Questo studio mirava a esaminare gli effetti regolatori della moxibustion sulla polarizzazione e migrazione dei macrofagi in un modello ratto di artrite reumatoide, nonché il ruolo dell'immunoglobulina a cellule T e della proteina contenente il dominio mucino 3 (TIM-3) in questo processo. Il giorno 0 dell'esperimento, i ratti Sprague–Dawley (SD) sono stati divisi in cinque gruppi. L'adiuvante di Freund completo (CFA) è stato iniettato nei cuscinetti posteriori per stabilire il modello dell'artrite reumatoide. Inoltre, l'interferenza di RNA Havcr2 mediata da lentivirus (LV-Havcr2-RNAi) è stata iniettata nei cuscinetti posteriori per inibire l'espressione di TIM-3. A partire dal giorno 7, i ratti hanno subito il trattamento per moxibustione in cicli comprendenti sei giorni di trattamento e un giorno di riposo, per un totale di tre cicli completi. Dopo il completamento della terapia con moxibustione, lo stato infiammatorio è stato valutato tramite analisi istologica e misurazione dello spessore delle zampe. I marcatori fenotipici dei macrofagi M1 e M2 sono stati valutati tramite un saggio immunosorbente legato agli enzimi (ELISA) e immunofluorescenza. L'espressione di TIM-3 è stata rilevata tramite reazione a catena della polimerasi in tempo reale quantitativa (qRT-PCR) e Western blot. Inoltre, macrofagi essudati peritoneali (PEM) sono stati isolati da altri ratti SD e la migrazione dei macrofagi è stata esaminata tramite un test di Transwell. Lo studio ha rilevato che, dopo l'iniezione di CFA, i ratti hanno mostrato un significativo rossore e gonfiore delle zampe, insieme a uno squilibrio nell'espressione del fenotipo dei macrofagi. Inoltre, i test di migrazione di Transwell hanno rivelato che i ratti modello indotti dalla CFA hanno mostrato un aumento della migrazione dei macrofagi rispetto agli esemplari controllo. Tuttavia, il trattamento con moxibustion attenuò questi cambiamenti. I risultati hanno anche dimostrato che la moxibustion ha aumentato l'espressione di TIM-3 e, dopo l'intervento lentivirale, i livelli di TIM-3 sono stati notevolmente ridotti, portando all'esacerbazione delle manifestazioni infiammatorie e a uno squilibrio dei macrofagi. Questi risultati indicano che TIM-3 funge da mediatore chiave nella regolazione della mossibustion della polarizzazione e migrazione dei macrofagi.

Introduzione

L'artrite reumatoide (AR) è un disturbo autoimmune sistemico diffuso che si manifesta clinicamente con artrite infiammatoria simmetrica. L'infiammazione colpisce principalmente la membrana sinoviale, la cartilagine e l'osso, causando distruzione dei tessuti e culminando in una deformità articolareirreversibile 1. La gestione farmacologica attuale dell'AR si basa principalmente su farmaci antireumatici modificanti della malattia (DMARD)2, che spesso richiedono somministrazione a vita. Tuttavia, questi agenti terapeutici sono associati a vari effetti avversi. Di conseguenza, un numero sign....

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Protocollo

Dichiarazione Etica e Precauzioni di Sicurezza
Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati approvati dal Comitato Etico dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Chengdu (2024029). Durante tutte le procedure di iniezione, inclusa la somministrazione di CFA e lentivirus, gli operatori devono indossare dispositivi di protezione individuale (DPI) composti da guanti usa e getta, occhiali protettivi e camici da laboratorio. Queste procedure devono essere condotte all'interno di un armadietto di biosicurezza o in un ambiente ben ventilato. Tutti gli oggetti appuntiti che sono entrati in contatto con i reagent....

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Risultati

Disponibilità dei dati
I dati grezzi generati durante lo studio attuale sono disponibili nel repository Figshare (https://doi.org/10.6084/m9.figshare.31550197)

Patologia articolare e spessore delle zampe nei ratti dopo il trattamento con moxibustion
I ratti iniettati con CFA hanno sviluppato un evidente gonfiore e arrossamento delle zampe. La colorazione di ematossilina e.......

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Discussione

La gestione attuale dell'AR si basa prevalentemente sui DMARD. Tuttavia, questi agenti farmacologici sono spesso costosi e associati a effetti avversi non trascurabili, tra cui insufficienza epatorenale e infezionigravi 2, imponendo un onere significativo su individui e sistemi sanitari. Al contrario, come trattamento esterno, la moxibustione presenta un profilo di sicurezza favorevole con un rischio minimo segnalato di tossicità sistemica. La sua tecnica è relati.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China (Grant n. 82374587) e dalla Natural Science Foundation della provincia del Sichuan (Grant No. 2024NSFSC2113). Ringraziamo l'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Chengdu per aver fornito strutture di laboratorio e supporto tecnico. Un ringraziamento speciale all'Agopuntura e alla Tuina School per la loro guida nei protocolli di moxibustion. Ringraziamo inoltre il team di cura degli animali per l'aiuto nella manutenzione dei modelli di ratti. Infine, estendiamo il nostro ringraziamento a tutti i colleghi che hanno contribuito alle analisi istolog....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Completamente Freund' s Adiuvante (CFA)Sigma-AldrichF5881Utilizzato per induire l'artrite reumatoide (AR) modello nei ratti
Lentivirus (RNAi TIM-3)GenChem Biotechnology, Shanghai3,5 e volte; 107 TU/mLUsato per silenziare l'espressione del genio TIM-3
Coni moxa (dimensioni grano)Fornitore di Medicina Tradizionale CineseN/AUtilizzato per la moxibustion ai punti di agopuntura BL23 e ST36

Riferimenti

  1. Gravallese, E. M., Firestein, G. S. Rheumatoid Arthritis - Common Origins, Divergent Mechanisms. N Engl J Med. 388 (6), 529-542 (2023).
  2. Di Matteo, A., Bathon, J. M., Emery, P. Rheumatoid arthritis. Lancet. 402 (10416), 2019-2033 (2023).
  3. Hao, F., et al.

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Ristampe e permessi

Tag

Terapia di moxibustionemigrazione dei macrofagiratti con artrite reumatoideespressione di TIM 3interferenza a RNA lentiviralesaggio Transwellanalisi ELISAcolorazione immunofluorescenteWestern Blot