Effetto della frazionazione secca basata sulla classificazione dell'aria sulle proprietà strutturali, termiche e funzionali del concentrato proteico di ceci per applicazioni in nanoemulsioni

Summary

Il concentrato di proteine di ceci estratto a secco ha mostrato un alto contenuto proteico, forti proprietà schiumose e una stabilizzazione efficace della nanoemulsione a una concentrazione del 3,0% w/v. Le analisi strutturali e termiche hanno rivelato un'organizzazione amorfa-dominante con bassa cristallinità residua e maggiore flessibilità molecolare, a sostegno della sua idoneità come ingrediente funzionale sostenibile e di origine vegetale per i sistemi colloidi alimentari.

Abstract

Il concentrato di proteina di ceci (CPC) è stato ottenuto tramite un approccio di estrazione a secco e caratterizzato sistematicamente in termini di proprietà composizionali, funzionali e strutturali per valutarne l'idoneità alle applicazioni di nanoemulsione (NE). Il CPC estratto a secco possedeva un contenuto proteico del 44,8% e mostrava prestazioni funzionali superiori, inclusa una capacità di schiuma del 61,1% e un'elevata stabilità della schiuma del 94,7%, riflettendo un'adsorbimento interfacciale efficiente e la formazione coesa del film. La formulazione di NE preparata utilizzando CPC al 3,0% w/v come agente emulsionante ha raggiunto una significativa riduzione della dimensione delle goccioline, ottenendo un diametro medio Z delle gocce di 152,7 nm e un basso indice di polidispersione (0,30), indicando una distribuzione fine e relativamente uniforme delle gocce e una stabilità colloidale cineticamente stabile. L'analisi comparativa della calorimetria differenziale a scansione (DSC) della farina di ceci (CF) e della CPC ha rivelato due principali transizioni endotermiche. Sebbene entrambi i campioni abbiano mostrato una transizione simile a bassa temperatura a 68,4 °C associata al rilascio di acqua legata, il CPC ha mostrato un cambiamento entalpio sostanzialmente inferiore, indicando una parziale interruzione dell'ordine molecolare nativo dopo l'estrazione a secco. Il profilo di diffrazione a raggi X (XRD) del CPC utilizzato nei sistemi NE mostrava un ampio alone amorfo nell'intervallo 2θ di 10°-30°, intervallato da riflessioni taglienti di bassa intensità limitate. Questi risultati confermano una struttura amorfa-dominante con regioni cristalline parziali, con la cristallinità complessiva del concentrato stimata circa al 15%. Questo studio descrive un protocollo riproducibile e privo di solventi per la produzione di NEs a olio in acqua utilizzando CPC classificati come aria secca, adatto all'uso didattico e a una potenziale scala industriale.

Introduction

Le proteine derivate dai legumi hanno ricevuto notevole attenzione come ingredienti multifunzionali per la progettazione di emulsioni alimentari strutturalmente stabili. Tra queste fonti, il ceci (Cicer arietinum) è particolarmente notevole per la sua alta produzione globale (la^terza coltura leguminosa più coltivata al mondo), il contenuto proteico sostanziale (18%-24%), la natura ipoallergenica e il profilo equilibrato degli amminoacidi^{essenziali 1,2}. Tipicamente, gli isolati proteici contengono una concentrazione proteica più elevata (80%-90%) poiché subiscono ulteriori lavorazioni per rimuovere carboidrati e grassi, mentre il CPC (50%−75% di proteine) trattiene fibre e altri nutrienti^{essenziali 3}. Questi vantaggi nutrizionali e agronomici mettono in evidenza la proteina del ceci come alternativa valida agli emulsionanti proteici convenzionali di piante e animali. Nonostante il loro uso diffuso, le emulsioni stabilizzate con i tradizionali tensioattivi a basso peso molecolare spesso rimangono termodinamicamente instabili e soggette a coalescenza, floculazione e separazione di fase durante lo^{stoccaggio 1}. Al contrario, le NEs tipicamente caratterizzate da diametri delle goccioline inferiori a 200 nm mostrano una maggiore stabilità cinetica, una migliore protezione dei composti bioattivi incapsulati e una maggiore dispersibilità nei sistemi acquosi. Di conseguenza, la tecnologia NE è emersa come una strategia efficace per sviluppare alimenti funzionali con rilascio controllato e una migliore biodisponibilità degli ingredienti^{idrofobici 4}.

Uno studio recente ha riportato che il CPC presenta caratteristiche interfacciali e funzionali favorevoli per la formazione di NE, tra cui una forte capacità di legare l'acqua, prestazioni di schiuma notevoli e la capacità di stabilizzare le interfacce olio-acqua. Il CPC è stato inoltre valutato come potenziale sostituto del tuorlo d'uovo nelle emulsioni di tipo maionese grazie alla sua stabilità di emulsionazione e al suo appeal in etichetta^{pulita 1}. Oltre a tali sistemi modelli, i nanoemulsificanti a base di proteine di ceci hanno potenziali applicazioni in varie matrici alimentari, tra cui bevande (bevande torbide, acque proteiche, bevande antiossidanti e nanoincapsulamento di curcumina, acidi grassi omega-3, carotenoidi e oli essenziali), analoghi lattiero-caseari vegetali, formulazioni a basso contenuto di grassi e ripieni da panificazione o^dolciumi.

Sebbene la funzionalità emulsionante della proteina del ceci (CP) sia stata ampiamente riportata⁵, i sistemi nanoemulsificanti derivati dalle vie di estrazione secca hanno ricevuto un'attenzione relativamente limitata, in particolare per quanto riguarda la riproducibilità, l'integrità strutturale e la scalabilità per applicazioni alimentari. A differenza dei protocolli convenzionali di estrazione a umido che richiedono un ampio aggiustamento del pH, centrifugazione e rimozione dei solventi, la classificazione dell'aria consente un rapido arricchimento proteico in condizioni ambientali senza l'uso di acqua, sostanze chimiche o trattamenti termici^{eccessivi 3}. Di conseguenza, l'estrazione a secco offre vantaggi distinti rispetto ai metodi di estrazione umida, preservando la funzionalità proteica riducendo al contempo il carico ambientale e la complessità^{del processo 3,6}.

Tuttavia, un bisogno chiave non soddisfatto nella ricerca attuale sui colloidi alimentari è una chiara comprensione meccanicistica di come l'estrazione a secco modifichi la struttura delle proteine e il comportamento termico, e di come questi cambiamenti si traducano in prestazioni di nanoemulsificazione e stabilità colloidale. In particolare, è necessaria una valutazione sistematica delle relazioni struttura-funzione che coinvolgono organizzazione molecolare, attività interfacciale e comportamento schiumoso per avanzare nell'applicazione dei sistemi colloidi alimentari basati su^{CPC 7}.

La novità di questo studio risiede nel dimostrare l'uso dell'aria secca classificata come CPC come agente nanoemulsificante riproducibile e senza solventi, correlando direttamente il suo arricchimento compositivo con la funzionalità strutturale, termica e interfacciale. Pertanto, il presente studio mira a dimostrare che il CPC ottenuto tramite classificazione dell'aria secca può funzionare come un efficace nanoemulsificante collegando sistematicamente l'arricchimento compositivo alle sue proprietà strutturali, termiche e interfacciali. Si pone particolare enfasi sulla caratterizzazione fisicochimica, sulla capacità e stabilità di schiuma, e sull'analisi XRD per chiarire le relazioni struttura-funzione che governano la formazione e la stabilità della NE.

Protocol

Preparazione del campione
Separazione delle proteine dalla farina di ceci (CF)
I ceci Kabuli (Cicer arietinum L.), raccolti durante la stagione di crescita 2025 e provenienti dal sud-est della Turchia, sono stati lavorati utilizzando un sistema di macinazione a base di pneumatici basato su impatto, in cui le particelle sono state sottoposte a forze centrifughe e ripetuti impatti contro il disco di macinazione e l'anello. Dopo una fase iniziale di pre-macinazione, i grani grossi venivano ulteriormente fresati per produrre fibra di carbonio utilizzando un mulino classificatore ad aria. Durante la fresatura a impulsi, sono stati applicati un flusso d'aria di 40-45^{m 3}/h, una velocità classificatrice di 7.000-8.000 giri/min e una velocità di avanzamento di 200 kg/h, in conformità con le condizioni operative precedentemente riportate e un protocollo di ottimizzazione interno, come descritto nella letteratura⁸.

Frazioni fini ricche di proteine sono state successivamente ottenute dalla CF tramite classificazione dell'aria a temperatura ambiente, utilizzando lo stesso sistema di classificazione dell'aria. La velocità delle ruote del classificatore era impostata a 10.000 giri/min, mentre la velocità di avanzamento veniva mantenuta a circa 200 kg/h e la portata d'aria a 52 m³/h, come descritto^{in precedenza 8}. Questo passaggio di separazione arricchiva selettivamente la frazione proteica in base alle differenze di dimensione, densità e proprietà aerodinamiche delle particelle.

Dopo la classificazione dell'aria, la polvere risultante ha mostrato una distribuzione fine delle dimensioni delle particelle (d(0,9) = 20-22 μm); pertanto, non è stato applicato alcun passaggio di setacciatura per evitare perdite di materiale e stress meccanico inutili. La frazione arricchita di proteine veniva confezionata direttamente in sacchi di polietilene da 25 kg con lavaggio gasoso e conservata a 4 °C per minimizzare l'assorbimento di umidità e preservare le proprietà funzionali fino a ulteriori lavorazioni.

Preparazione della nanoemulsione
Il CPC è stato utilizzato come unico agente emulsionante per preparare NE olio in acqua (O/W) con l'obiettivo di raggiungere una concentrazione proteica attiva del 3,0% w/v nella formulazione finale. Questa concentrazione è stata selezionata sulla base di screening preliminari dell'1,0% w/v, 2,0% w/v e 3,0% w/v CPC, che indicavano che il 3,0% forniva la riduzione più efficace della dimensione delle gocce e la più alta stabilità fisica a breve termine. Sulla base del contenuto proteico misurato della polvere CPC (44,8% p/w), la concentrazione richiesta in polvere è stata calcolata al 6,67% w/v. Il CPC ha funzionato come emulsionante nella fase acquosa continua, mentre l'olio di trigliceridi a catena media (MCT) è stato utilizzato esclusivamente come fase oleosa dispersa a una concentrazione fissa del 5,0% v/v, corrispondente a 5,0 mL di olio per formulazione da 100 mL. Non sono stati utilizzati tensioattivi a basso peso molecolare in nessuna^{formulazione 9}.

La dispersione acquosa del CPC è stata preparata sciogliendo la quantità calcolata di polvere di CPC in acqua ultrapura sotto una mescolare magnetica continua a 800 giri/min per 1.800 secondi per garantire completa idratazione e dispersione omogenea delle proteine. L'idratazione completa è stata confermata dall'assenza di particelle visibili o sedimenti.

La fase oleosa è stata poi aggiunta lentamente alla soluzione CPC idratata sotto mescolare continuo, seguita da un'omogeneizzazione ad alta scalatura a 12.000 giri/min per 240 s, producendo un'emulsione grossolana (convenzionale), visivamente identificata da un aspetto uniforme e opaco senza separazione visibile dell'olio. Queste condizioni sono state selezionate per evitare l'aggregazione proteica garantendo al contempo una sufficiente disgregazione delle gocce.

Le NE sono state successivamente ottenute tramite sondazione a sonda dell'emulsione grossolana al 30% di ampiezza per 180 secondi, eseguita in un bagno d'acqua ghiacciata per mantenere la temperatura del campione sotto i 30 °C e prevenire l'aggregazione proteica. La temperatura veniva monitorata intermittentemente durante la sonicazione. Esperimenti preliminari di ottimizzazione (dati non mostrati) hanno valutato tempi di sonicazione di 60 s, 120 s e 180 s, e 180 s è stata selezionata come condizione ottimale basata sulla formazione riproducibile di NE con diametri di gocce inferiori a 200 nm e basso PDI. Pertanto, tutti gli NE riportati in questo studio sono stati preparati utilizzando il tempo di sonicazione ottimizzato di 180 s.

La formazione di successo del NE era supportata dalla comparsa di una dispersione stabile, leggermente opalescente, senza separazione di fase dopo 1.800 secondi di permanenza. I campioni che mostravano crema visibile o separazione di fase sono stati esclusi da ulteriori analisi. Tutti i campioni sono stati bilanciati a temperatura ambiente (25 ± 2 °C) prima della caratterizzazione fisicochimica⁹.

ATTENZIONE: La maneggevolezza di apparecchiature ad alta energia (omogeneizzatore e sonicatore) è stata condotta in conformità con le procedure di sicurezza del laboratorio istituzionale. Durante la sonicazione venivano utilizzate protezioni acustiche e schermature antischizzo. Durante la preparazione dell'emulsione non venivano utilizzati acidi o basi; Pertanto, non sono stati necessari passaggi di neutralizzazione chimica o smaltimento di rifiuti pericolosi.

Caratterizzazione nutrizionale e fisicochimica della farina di ceci (FC) e del concentrato di proteine di ceci (CPC)
Analisi composizionale
La composizione nutrizionale dei campioni di CF e CPC è stata determinata utilizzando i Metodi Ufficiali di Analisi dell'Association of Official Analytical Chemists (AOAC). La fibra grezza è stata analizzata secondo AOAC 991,43, la cenere totale secondo AOAC 923,03, il grasso greggio secondo AOAC 920,39 e la proteina grezza secondo AOAC 984,13, utilizzando un fattore di conversione azoto-proteina di N × 6,25. Il contenuto totale di carboidrati di tutti i campioni è stato determinato dalla differenza sottraendo la somma delle percentuali di umidità, proteine, grassi e ceneri dal 100%³.

Analisi del colore
I parametri di colore dei campioni sono stati misurati utilizzando un colorimetro da banco che operava in modalità riflettanza. Prima della misurazione, lo strumento era standardizzato utilizzando gli standard di calibrazione in bianco e nero forniti dal produttore. Per garantire misurazioni uniformi e riproducibili, 5,0 g di campione in polvere venivano delicatamente caricati in una cuvetta di vetro rotonda (diametro interno di 64,0 mm) per creare una superficie liscia e omogenea. È stato applicato uno spessore di strato sufficiente (≥ 50,0 mm) per minimizzare l'influenza degli effetti di substrato e di fondo e per rendere la polvere traslucida praticamente opaca in condizioni di riflettenza. Tutte le misurazioni sono state effettuate in modalità riflettanza a temperatura ambiente.

Le coordinate di colore erano espresse nello spazio colore CIELAB, dove L* rappresenta la chiarezza (0 = nero, 100 = bianco), a* rappresenta l'asse rosso-verde e b* rappresenta l'asse giallo-blu. Parametri di colore aggiuntivi, inclusi la differenza totale di colore (ΔE*), la cromaticità (C*), l'angolo di tonalità (H°) e l'indice di colore (CI), sono stati calcolati secondo le equazioni descritte in¹¹ (Eqs. 1–4) come segue:

(Equalizzazione 1)

(Equalizzazione 2)

(Eq. 3)

(Eq. 4)

Analisi del pH
Il pH dei campioni CF e CPC veniva determinato utilizzando un misuratore di pH digitale dotato di un elettrodo di vetro, inserendo direttamente l'elettrodo nella dispersione del campione a 25,0 ± 2,0 °C. Prima della misurazione, il misuratore di pH veniva calibrato utilizzando soluzioni tampone standard (pH 4.0 e 7.0). Tutte le misurazioni sono state effettuate in triplicata (n = 3) per garantire la riproducibilità analitica.

Contenuto di umidità
Il contenuto residuo di umidità dei campioni di CF e CPC è stato determinato utilizzando un analizzatore rapido di umidità operato in condizioni di riscaldamento controllate. Tutte le misurazioni sono state effettuate in triplicata (n = 3) per garantire la riproducibilità analitica.

Caratterizzazione strutturale e funzionale della CPC
Analisi XRD
L'analisi XRD del CPC è stata effettuata utilizzando un diffrattometro a raggi X di laboratorio dotato di radiazione Cu-Kα (λ = 1,5406 Å). I diffrattogrammi sono stati registrati su un intervallo di 2θ da 10°-90° a una velocità di scansione di 2,5° ^min-1, operando a 40 mA e 45 kV, seguendo una procedura¹² precedentemente segnalata.

L'identificazione dei picchi, la sottrazione di fondo e l'adattamento delle curve sono stati effettuati utilizzando software standard di analisi XRD. Il grado di cristallinità è stato calcolato come il rapporto tra l'area integrata delle riflessioni cristalline e l'area totale sotto il diffrattogramma, secondo il metodo descritto da¹³, come mostrato nell'Eq. (5):

(Equalizzazione 5)

La dimensione apparente del cristallite (D) è stata stimata dai dati XRD utilizzando l'equazione di Scherrer (Eq. 6), applicata ai picchi di diffrazione più intensi:

(Equalizzazione 6)

dove D è la dimensione apparente del cristallito (nm), K è il fattore di forma (presumibilmente 0,9), λ è la lunghezza d'onda dei raggi X, β è la larghezza totale a metà massimo (FWHM, in radiani) del picco di diffrazione selezionato, e θ è l'angolo di Bragg.

Analisi della calorimetria differenziale a scansione (DSC)
L'analisi calorimetrica differenziale a scansione (DSC) di CF e CPC è stata effettuata utilizzando un calorimetro differenziale a scansione di laboratorio. Circa 10,0 ± 0,1 mg di campione sono stati pesati e sigillati con precisione in un crogiolo di alluminio concavo con coperchio forato, mentre un crogiolo vuoto di alluminio è stato utilizzato come riferimento. Le misurazioni sono state effettuate sotto un'atmosfera di azoto (20 mL/min) per minimizzare gli effetti ossidativi. I campioni venivano riscaldati da 0 °C a 400 °C a una velocità costante di 5 °C ^min-1 in condizioni di scansione dinamica. Prima dell'analisi sono state effettuate calibrazioni di temperatura e sensibilità per garantire accuratezza e riproducibilità delle misurazioni.

Le transizioni termiche sono state caratterizzate determinando la temperatura di inizio (T_o), la temperatura di picco (T_p), la temperatura di fine (T_e) e il cambiamento di entalpia (ΔH) associato a ciascuna transizione. Inoltre, la larghezza di picco endotermica (EPW) e l'indice di altezza di picco (PHI) sono stati calcolati secondo le Eqs. (7) e (8), rispettivamente:

EPW= (Te−Tp) (Eq. 7)

PHI =ΔH/(Tp− To) (Eq. 8)

Capacità di schiuma (FC) e stabilità (FS)
La capacità di schiuma (FC) e la stabilità della schiuma (FS) di una dispersione acquosa CPC (3,0 g/L) sono state valutate al pH 7,0, regolate secondo necessità usando acido cloridrico (HCl) di 0,1 N. Una aliquota di 30 mL di dispersione proteica è stata trasferita in tubi centrifughe di polipropilene da 50 mL e omogeneizzata utilizzando un omogeneizzatore ad alta velocità operato a 11.000 giri/min per 120 secondi per generare schiuma. La formazione di schiuma è stata visivamente confermata dal rapido aumento del volume del campione e dalla formazione di uno strato di schiuma stabile immediatamente dopo l'omogeneizzazione.

La FC è stata calcolata come l'aumento percentuale del volume immediatamente dopo l'omogeneizzazione, mentre la FS è stata determinata in base al volume di schiuma trattenuto dopo 600 s, 1.800 s, 3.600 s e 7.200 s. Tutte le misurazioni sono state effettuate in triplicata (n = 3), e i valori di FC e FS sono stati calcolati secondo le Equalizzazioni. (9) e Equalizzazioni. (10),^{rispettivamente 14}:

(Eq. 9)

(Equalizzazione 10)

ATTENZIONE: L'acido cloridrico diluito è stato maneggiato utilizzando le adeguate precauzioni di sicurezza di laboratorio, inclusi guanti e protezione per gli occhi. Le soluzioni di rifiuto venivano smaltite secondo le linee guida istituzionali sulla sicurezza chimica.

Stabilità fisicochimica dei NEs basati su CPC e CPC
Dimensione media delle particelle e distribuzione delle dimensioni delle particelle
La distribuzione delle dimensioni delle particelle e il diametro idrodinamico medio Z dei campioni sono stati determinati utilizzando la diffusione dinamica della luce (DLS). Il diametro idrodinamico medio Z e l'indice di polidispersione (PDI) sono stati registrati per caratterizzare la dimensione media delle gocce e l'uniformità della distribuzione delle dimensioni,^{rispettivamente 15,16}.

Prima della misurazione, i campioni venivano diluiti con acqua distillata in un rapporto di 1:100 (v/v) per minimizzare gli effetti di diffusione multipla e garantire misurazioni affidabili della diffusione della luce. Le analisi sono state condotte a una temperatura controllata di 25 ± 2 °C. Il PDI veniva utilizzato come indicatore dell'omogeneità della distribuzione delle dimensioni delle gocce, con valori PDI più bassi corrispondenti a distribuzioni di dimensioni più ristrette. Le misurazioni sono state effettuate il giorno 0 (NE appena preparate) e dopo 7 giorni di stoccaggio per valutare la stabilità fisica a breve termine del sistema^{NE 16}. I campioni che mostravano crema, sedimentazione o separazione di fase visibili prima della misurazione sono stati esclusi dall'analisi DLS.

ζ-potenziale delle particelle
Il potenziale ζ dei campioni è stato determinato per valutare la carica superficiale netta e la stabilità elettrostatica delle gocce utilizzando la diffusione elettroforetica della luce (ELS), seguendo le metodologie precedentemente^{descritte 15,16}. Le misurazioni sono state effettuate a una temperatura controllata di 25,0 ± 2 °C e sono stati utilizzati campioni non diluiti per preservare l'ambiente ionico originale delle NE.

I valori medi del potenziale ζ e le corrispondenti deviazioni standard sono stati calcolati per ciascun campione al fine di valutare le interazioni elettrostatiche e la stabilità colloidale delle emulsioni. Tutte le misurazioni sono state effettuate utilizzando l'acqua come dispersante, in conformità con un stabilimento

Procedura operativa standard interna¹⁵. I campioni che mostravano separazione di fase visibile o creaming prima dell'analisi sono stati esclusi dalle misurazioni del potenziale ζ.

Validazione del metodo e risultati attesi
La validazione del metodo è stata ottenuta valutando parametri fisicochimici chiave, tra cui diametro idrodinamico medio Z, PDI, potenziale ζ e stabilità fisica sotto stress. L'esecuzione efficace del protocollo era supportata dalla formazione riproducibile di NE con dimensioni delle goccioline inferiori a 200 nm e dalla PDI ≤0,30. Per validare ulteriormente la stabilità oltre la semplice conservazione, fu eseguito un test di centrifugazione a 4.000 giri/min per 900 secondi. L'assenza di separazione visibile delle fasi o di crematura dopo la centrifugazione, unita a profili costanti di potenziale ζ e pH per 7 giorni di stoccaggio, supporta collettivamente la robusta capacità emulsificante della CPC e la riproducibilità del protocollo proposto.

Analisi statistica
Le misurazioni composizionali e funzionali sono state effettuate in triplicata (n=3), mentre le analisi strutturali (XRD e DSC) sono state effettuate come misurazioni singole, esercizi rappresentativi. I risultati sono presentati come il valore medio ± deviazione standard (SD). Le valutazioni statistiche sono state effettuate utilizzando l'analisi unidirezionale della varianza (ANOVA) tramite software SPSS. Per tutte le analisi, un p-valore di < 0,05 è stato considerato indicativo di significatività statistica. Nei casi in cui sono state identificate differenze significative, è stato utilizzato il test post-hoc Honestly Significant Difference (HSD) di Tukey per confronti multipli. Le lettere di collegamento statistico (ad esempio, a, b, c) presentate nelle tabelle e nelle figure sono state derivate dai risultati del test HSD di Tukey; I mezzi che condividono la stessa lettera non sono significativamente diversi al livello di significatività del 5%.

Results

Caratterizzazione nutrizionale e fisicochimica della FC e della CPC
Parametri composizionali
I parametri composizionali del CF e del CPC sono riassunti nella Tabella 1. Il CPC conteneva il 44,8% di proteine, il 5,8% di grassi grezzi e il 45,9% di carboidrati totali, dimostrando un arricchimento sostanziale delle proteine rispetto alla fibrosi cistica come risultato del processo di frazionamento secco. L'aumento del contenuto proteico osservato nell...

Discussion

In questo studio, il CPC è stato ottenuto tramite classificazione dell'aria e caratterizzato in termini delle sue proprietà composizionali, funzionali, strutturali e colloidali, con particolare attenzione alla sua applicazione come nanoemulsificante di origine vegetale. I metodi non termici, come la classificazione dell'aria, possono offrire un arricchimento marcato del contenuto proteico rispetto alla fibrosi carbonica, ottenendo un CPC con un contenuto proteico del 44,8%

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Tubi conici da 50 mL	Corning	352070	Tubi centrifughe in polipropilene
Mulino classificatore ad aria		CSM1250	Mulino classificatore ad aria usato per la frazionazione proteica
Bilanciamento analitico	Sartorius	BCE224I-IS	Bilanza analitica (capacità massima 120 g)
Pipette automatiche	Marchio	3123000055	Pipette regolabili (200 & mu; L, 1 mL, 5 mL)
Centrifuga	Eppendorf	5810R	Centrifuga refrigerata
Campione di ceci		—	Ceci di qualità alimentare
Colorimetro	HunterLab	A60-1014-593	Strumento per l'analisi del colore
Calorimetro a scansione differenziale	NETZSCH	—	Analisi DSC
Termometro digitale	Hanna Instruments	HI-98501	Monitoraggio della temperatura
Fosfato di idrogeno dipotassico (Na2HPO4)	Sigma-Aldrich	S7907	Grado analitico
Analizzatore di grasso	C. Gerhardt GmbH & Co. KG	13-0005	Analisi del grasso basata su Soxhlet
Omogeneizzatore ad alta velocità	VELP	SA20900010	Omogeneizzazione delle emulsioni grossolane
Acido cloridrico (HCl)	Sigma-Aldrich	320331	Grado analitico
Soluzione di acido cloridrico (0,1 N)	Sigma-Aldrich	H1758	Regolazione del pH
Tavolette catalizzatore Kjeldahl	C. Gerhardt GmbH & Co. KG	12-0328	Analisi di Kjeldahl
Agitatore magnetico	IKA	3339000	Miscelazione e idratazione del campione
Olio di trigliceridi a catena media	Ataman Kimya A.	https://www.atamanchemicals.com /trigliceridi a catena media-mct _u30009/?? lang=TR#:~:text =Orta%20zincirli%20trigliseritler %20(MCT)%2C%20hindistance vizi%20ve%20hurma%20%C3 %A7ekirde%C4%9Fi%20ya%C 4%9Flar%C4%B1nda,g%C3%B Cne%C5%9F%20kremleri%20i% C3%A7in%20%C4%B1slat%C4% B1c%C4%B1% 20ajand%C4%B1r.	Petrolio di qualità alimentare e farmaceutica
Analizzatore di umidità	Mettler Toledo	HC103	Determinazione dell'umidità
Dimensione delle particelle e analizzatore del potenziale zeta	Malvern Instruments	ZEN3600	DLS e mobilità elettroforetica
Misuratore di pH	Mettler Toledo	MET-30671567	Misurazione del pH
Tubi centrifughe in plastica	ISOLAB	078.02.003	Tubi di plastica usa e getta
Pepsina suina	Sigma-Aldrich	P7012	Enzima (1:10.000)
Fosfato diidrogeno di potassio (KH2PO4)	Sigma-Aldrich	P5379	Grado analitico
Sondatore	Bandelin	—	Sonicazione a emulsione
Occhiali protettivi	Baymax	BX-2500	Attrezzature di sicurezza di laboratorio
Analizzatore proteico	C. Gerhardt GmbH & Co. KG	12-0520	Determinazione delle proteine
Sistema digeritivo delle proteine	C. Gerhardt GmbH & Co. KG	12-0700	Unità digestione Kjeldahl
Cloruro di sodio (NaCl)	Sigma-Aldrich	S9625	Grado analitico
Idrossido di sodio (NaOH)	Sigma-Aldrich	S5881	Grado analitico
Spatola	—	https://www.blabmarket.com/ meta-etiket/plastik-spatul?srsltid =AfmBOoqsvXR_3rQgU1n8QBn DyR_P9D52v2Hahy27RLOH7Zg VbFzzcbsb	Spatola di plastica
Sistema ad acqua ultrapura	ELGA Labwater	PC110COBPM1	Resistività all'acqua 18,2 MΩ & middot; cm
Fiaschetta volumetrica	Schott Duran	2120117	Fiaschetta volumetrica da 100 mL
Bagno d'acqua	Memmert	WTB24	Controllo della temperatura (20– 25 & deg; C)
Diffrattometro a raggi X (Cu– Kα)	PANalitica	STEM-LE-0294-LC	Analisi XRD (45 kV, 40 mA)