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Articolo di ricerca

Effetti analgesici e antinfiammatori dell'agente rivestimento Xueshan Jinluohan e del suo meccanismo transdermico

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DOI:

10.3791/70480

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30 aprile 2026

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1Qingdao Academy of Chinese Medicinal Sciences, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 2State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co. Ltd, 4State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 5Laboratory of Epigenetics and Immunology, West China Institute of Women and Children's Health, NHC Key Laboratory of Chronobiology, Department of Obstetric and Pediatric, Key Laboratory of Birth Defects and Related Diseases of Women and Children of MOE, State Key Laboratory of Biotherapy, West China Second University Hospital, Sichuan University

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Questo studio presenta un approccio integrato per valutare gli effetti analgesici e antinfiammatori dell'agente antidolorifico Xueshan Jinluohan. Gli effetti dipendevano dall'area e dal tempo, e l'analisi transdermica ha identificato la benzoilaconina come principale componente permeante con rilascio controllato per diffusione.

Abstract

Le preparazioni topiche di medicina tradizionale cinese (MTC) sono ampiamente utilizzate per la gestione di condizioni infiammatorie e legate al dolore perché forniscono effetti terapeutici locali riducendo potenzialmente le reazioni avverse sistemiche. Tuttavia, le caratteristiche farmacodinamiche e i meccanismi transdermici alla base di molte formulazioni applicate clinicamente rimangono insufficientemente caratterizzati. Xueshan Jinluohan Pain-Recubring Coating Agent (XJCA), una formulazione di medicina tibetana, è comunemente prescritto per il dolore infiammatorio, tuttavia l'influenza dell'area di applicazione, la durata dell'azione e i contributi relativi degli effetti locali rispetto a quelli sistemici non sono stati valutati sistematicamente. Questo studio stabilisce un quadro metodologico integrato in vivo–in vitro per indagare questi parametri. Sono stati impiegati molteplici modelli animali complementari per valutare l'attività analgesica centrale e periferica e le risposte infiammatorie acute, consentendo la valutazione degli effetti dipendenti da area, tempo e locale contro sistemico. In parallelo, un sistema di celle di diffusione Franz abbinato a cromatografia liquida ultra-alta performance–spettrometria di massa tandem (UPLC-MS/MS) è stato utilizzato per caratterizzare la cinetica di assorbimento percutaneo di due alcaloidi principali, benzoilaconina e aconitina. XJCA ha dimostrato effetti analgesici e antinfiammatori dipendenti da area e di tempo significativi, e aree di applicazione più ampie sono state associate a un contributo sistemico maggiore all'efficacia analgesica. L'analisi cinetica transdermica ha rivelato che la benzoylaconina ha mostrato un flusso a stato stazionario sostanzialmente più elevato e ha seguito un rilascio controllato per diffusione, coerente con il modello di Higuchi, mentre l'aconitina ha mostrato una permeabilità inferiore e un profilo di rilascio più complesso. Questi risultati collegano il comportamento di somministrazione transdermica con gli esiti farmacodinamici osservati e forniscono un quadro strutturato per valutare e ottimizzare le formulazioni topiche di TCM.

Introduzione

Infiammazione e dolore sono risposte fisiologiche e patologiche interconnesse che svolgono un ruolo chiave nella difesa del corpo contro lesioni einfezioni 1. Tuttavia, infiammazioni e dolori persistenti o eccessivanti, come l'osteoartrite, l'artrite reumatoide o il dolore post-traumatico, possono causare danni ai tessuti che possono compromettere seriamente il funzionamento fisico e la salute mentaledei pazienti 2,3. Attualmente, i trattamenti clinici per infiammazione e dolore si basano principalmente su farmaci antinfiammatori non steroidei (FANS) (ad esempio, diclofenac, ibuprofene) e oppioidi. Sebbene i FANS siano ampiamente utilizzati per i loro effetti antinfiammatori e analgesici, la somministrazione orale spesso causa irritazione gastrointestinale, danni renali e rischicardiovascolari 4. Gli oppioidi, pur essendo analgesici potenti, sono associati a dipendenza, depressione respiratoria e altri gravi effetticollaterali 5,6. Di conseguenza, c'è una crescente necessità clinica di alternative più sicure. Le preparazioni topiche, che consegnano i farmaci direttamente nel luogo d'azione, offrono una soluzione strategica per mitigare questi effetti collateralisistemici 7. Tuttavia, la loro efficacia dipende fortemente dalla capacità del farmaco di superare la barriera cutanea, un fattore che può limitare la traduzione dei risultati preclinici, in particolare per molecole più grandi o quelle con scarsalipofilicità 8,9. Pertanto, lo sviluppo di terapie alternative sicure ed efficaci, in particolare preparazioni topiche con azione locale e minima esposizione sistemica, è diventato un punto di riferimento della ricerca in farmacologia.

Le preparazioni topiche di MTC hanno una lunga storia di applicazione nel trattamento di infiammazione e dolore. I loro vantaggi includono un'azione diretta sul sito della lesione, una riduzione degli effetti collaterali sistemici e una prolungata liberazione del farmaco10,11. XJCA è un gel cinetnico formato film utilizzato clinicamente composto da molteplici ingredienti erboristici. È ampiamente utilizzata in Cina per alleviare il dolore e l'infiammazione causati da osteoartrite, lesioni ai tessuti molli enevralgia 12,13,14. Tuttavia, le evidenze scientifiche della sua efficacia sono limitate e caratteristiche farmacodinamiche chiave, come la relazione tra area di applicazione ed efficacia, il tempo d'azione e la differenza tra effetti locali e sistemici, restano poco chiare. Queste lacune ostacolano l'applicazione clinica razionale della XJCA.

L'assorbimento transdermico è un fattore chiave che influenza l'effetto terapeutico dei preparati topici. Come barriera primaria, la pelle limita la penetrazione dei farmaci nella circolazione sistemica o nei tessutilocali 15,16. Per XJCA, comprendere le caratteristiche di assorbimento transdermico dei suoi principi attivi è fondamentale per chiarire gli effetti farmacodinamici e ottimizzare la forma farmacologica. Studi precedenti su preparazioni di MTC hanno dimostrato che gli alcaloidi (ad esempio, derivati dell'aconitina) sono componenti attivi importanti con effetti antinfiammatori eanalgesici 17,18. Benzoilaconina e aconitina sono due alcaloidi principali in XJCA19,20, e il loro contenuto e comportamento transdermico possono influenzare direttamente l'efficacia di XJCA. Tuttavia, non esistono segnalazioni sull'assorbimento transdermico di questi due componenti in XJCA, né sulle loro caratteristiche cinetiche e sui meccanismi di rilascio.

Per colmare questa lacuna di ricerca, lo studio mira a sviluppare e convalidare un quadro metodologico sistematico per la valutazione delle formulazioni topiche della MTC, utilizzando XJCA come caso di studio. L'obiettivo era dimostrare un approccio di valutazione integrato che includa: (1) modello/i farmacodinamico in vivo progettato per analizzare gli effetti del sito di applicazione, della durata del trattamento e della somministrazione locale vs sistemica del farmaco sull'efficacia; e (2) una valutazione cinetica transdermica in vitro utilizzando cellule di diffusione di Franz e UPLC-MS/MS per misurare l'assorbimento percutaneo e il rilascio di alcaloidi attivi chiave. Abbiamo ipotizzato che l'efficacia in vivo di XJCA, in particolare la sua dipendenza da area e tempo, sia principalmente determinata dalla cinetica transdermica dei suoi componenti chiave. Collegando i parametri di efficacia in vivo ai corrispondenti dati cinetici in vitro, questo approccio fornisce una comprensione meccanicistica di come la somministrazione transdermica informi la farmacodinamica delle preparazioni topiche di MTC.

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Protocollo

Questo studio è stato condotto in conformità con le Linee Guida per la Revisione Etica del Benessere degli Animali da Laboratorio (GB/T 35892-2018) e le Opinioni Guida sul Trattamento Umano degli Animali da Laboratorio. Tutte le procedure sugli animali sono state approvate dal Comitato Etico Sperimentale degli Animali dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Chengdu (Approvazione n. TCM-09-315).

Animali sperimentali e alloggio
Sono stati utilizzati topi Kunming specifici privi di patogeni (SPF) (20~25 g, maschio/femmina = 1:1) e ratti SPF Sprague-Dawley (SD) (180~200 g). Gli animali venivano ospitati in condizioni controllate: un ciclo chiaro/scuro di 12 ore, una temperatura di 23 ± 2 °C e un'umidità del 60% ± 5%, con libero accesso a cibo e acqua. Per valutare in modo completo il profilo analgesico e antinfiammatorio di XJCA, è stata utilizzata una batteria di modelli topini in vivo. Il test della piastra calda ha valutato la soglia del dolore mediata centralmente; il test della formalina distingueva tra dolore neurogenico (Fase I) e dolore infiammatorio (Fase II); Il test dell'edema dell'orecchio indotto dallo xilene valutò l'attività antinfiammatoria acuta; e il test di contorsione indotto dall'acido acetico ha modellato il dolore infiammatorio viscerale. Nota che XJCA è un gel pronto all'uso per la formazione di pellicole (film forming gel). Non è necessaria alcuna preparazione aggiuntiva prima della domanda.

Effetto dell'area di applicazione sull'efficacia analgesica e antinfiammatoria
I topi di Kunming SPF sono stati divisi casualmente in 4 gruppi (maschio/femmina = 1:1): gruppo di controllo normale (NC), gruppo XJCA ad area piccola (1×1 cm, 1 cm2) (XJCASAAG), gruppo XJCA ad area media (1×2 cm, 2cm 2) (XJCAMAAG) e gruppo XJCA ad area grande (1,5×2 cm, 3 cm2) (XJCALAAG). XJCA è stato applicato a 0,015 g/cm 2 (0,15 mL per topo) per 7 giorni consecutivi. Il gruppo NC ha ricevuto soluzione salina normale allo stesso modo. A 120 minuti dall'ultima somministrazione, l'efficacia degli analgesici è stata valutata utilizzando i test della piastra calda e della formalina.

Per il test della piastra riscaldante, i topi sono stati pre-selezionati posizionandoli su una piastra riscaldante a temperatura costante mantenuta a 55 ± 0,5 °C. È stata registrata la latenza di ritiro delle zampe (PWL) e sono stati selezionati solo topi con PWL di base tra 5 e 30 s (n = 40, maschi/femmina = 1:1). Dopo 7 giorni di trattamento, la PWL è stata misurata a intervalli di 30 minuti tre volte e il valore medio è stato registrato. È stato applicato un tempo limite di 60 secondi per prevenire danni ai tessuti.

Nel test della formalina (n = 40, maschio/femmina = 1:1), dopo 7 giorni di trattamento, l'1% di formalina (1 mL/kg) è stato iniettato sottocutaneamente nella zampa posteriore destra. Immediatamente dopo l'iniezione, i topi venivano posti in singole camere di osservazione. I comportamenti legati al dolore (leccare, sollevare e fuggire) sono stati registrati durante la Fase I (0–10 min, dolore neurogenico) e la Fase II (15–30 min, dolore infiammatorio). L'iniezione riuscita è stata confermata da un visibile gonfiore della zampa.

Valutazione dell'efficacia analgesica e antinfiammatoria dipendente dal tempo
Centoventi topi di Kunming SPF sono stati divisi casualmente in tre gruppi (n = 10 per punto temporale, maschio/femmina = 1:1): un gruppo di controllo modello (MC), un gruppo XJCALAAG (1,5×2 cm, 3cm 2) e un gruppo di controllo positivo con emulgel di dietilamina diclofenaca (DDE). L'XJCA (0,015 g/cm2, 0,15 mL/topo) e il DDE (0,016 g/cm 2, 0,15 mL/topo) sono stati applicati per 7 giorni consecutivi, mentre il gruppo MC ha ricevuto soluzione salina normale. Alle 2, 4, 6 e 8 ore dopo l'ultima somministrazione, sono stati effettuati sia il test dell'edema dell'orecchio indotto dallo xilene sia il test della contorsione indotta dall'acido acetico.

Nel test dell'edema dell'orecchio indotto da xilene, sono stati applicati 30 μL di xilene su entrambi i lati dell'orecchio destro (il gruppo MC ha ricevuto soluzione fisiologica normale), e dopo 60 minuti i topi sono stati anestetizzati con pentobarbital sodio (30 mg/kg, i.p.) e sacrificati; i dischi auricolari (8 mm di diametro) venivano poi perforati e pesati. Il grado di edema dell'orecchio è stato calcolato come il peso del disco dell'orecchio destro meno il peso del disco sinistro, e il tasso di inibizione dell'edema è stato determinato come [(grado edema del gruppo MC – grado edema del gruppo di trattamento) / grado di edema del gruppo MC] × 100%. Un punzone circolare (diametro 8 mm) veniva prelevato dalla stessa posizione sia sull'auricola sinistra che su quella destra, e il tessuto auricolare veniva pesato con una bilancia elettronica.

Nel test di contorsione indotto dall'acido acetico, è stata iniettata una soluzione di acido acetico allo 0,6% (0,1 mL/10 g) intraperitoneale, e i tempi di risposta della contorsione (estensione dell'arto posteriore, contrazione addominale e torsione del tronco) sono stati registrati entro 20 minuti. Immediatamente dopo l'iniezione di acido acetico, i topi venivano posti in gabbie di osservazione individuali. Il tasso di inibizione della contorsione è stato calcolato secondo la seguente formula: [(tempi di contorsione: nel gruppo MC – tempi di contorsione, nel gruppo trattato)/tempi di contorsione×100%.

Confronto tra efficacia analgesica locale e sistemica
Per dissociare analgesia localmente limitata dagli effetti derivanti dall'assorbimento transdermico e dalla distribuzione sistemica, abbiamo concettualizzato due regimi di somministrazione con definizioni operative chiare. L'effetto locale si riferisce all'azione del farmaco in un sito localizzato ai tessuti immediatamente sotto o adiacenti al sito di applicazione, con un contributo minimo da parte del farmaco circolante. L'effetto sistemico, invece, si riferisce all'analgesia mediata da un farmaco che è entrato nel sangue e agisce in siti centrali o periferici lontani dal sito di applicazione. Abbiamo testato direttamente l'ipotesi secondo cui aumentare l'area di applicazione porta a un maggiore assorbimento sistemico del farmaco e, di conseguenza, produce effetti analgesici maggiori rispetto a quelli dovuti solo all'azione locale, mantenendo costante la dose per unità di area e variando l'area totale trattata. Questo design consente di quantificare come la scala spaziale dell'esposizione determini la biodisponibilità sistemica e il contributo conseguente degli effetti mediati sistemicamente.

Trenta topi di Kunming SPF (con PWL di 5~30 s nel test della piastra calda) sono stati divisi casualmente in 3 gruppi (n = 10 per gruppo, maschio/femmina = 1:1): gruppo NC, gruppo con farmaci topici (TMG) e gruppo farmaco sistemico (SMG). XJCA è stata somministrata a una dose fissa di 0,015 g/cm2, con un volume di 0,15 mL, per 7 giorni consecutivi.

Per il TMG, la formulazione è stata applicata su un'area localizzata della pelle dell'arto posteriore. Per la SMG, per simulare un aumento dell'assorbimento sistemico, la formulazione è stata applicata su un'area combinata che comprende sia gli arti posteriori che la pelle posteriore, mantenendo la stessa dose per unità di area (0,015 g/cm2). Questo disegno ha garantito che la quantità totale di XJCA applicata al gruppo SMG fosse proporzionalmente superiore a quella del gruppo TMG, facilitando un maggiore potenziale di assorbimento transdermico nella circolazione sistemica. A 120 minuti dall'ultima somministrazione, il PWL è stato misurato tramite il test della piastra calda (3 volte ogni 30 minuti, valore medio registrato). Confrontando TMG (effetto locale predominante) e SMG (effetto locale + sistemico), abbiamo potuto analizzare il contributo della distribuzione sistemica dei farmaci all'analgesia complessiva.

Studio di assorbimento transdermico in vitro
Lo studio ha utilizzato cellule di diffusione di Franz con un'area di diffusione efficace di 1,76625cm2. La cellula di diffusione di Franz è il punto di riferimento per valutare l'assorbimento percutaneo. Il sistema è composto da un compartimento donatore (contenente la formulazione del test), un compartimento recettore (riempito con tampone fisiologico) e pelle escamada montata tra di essi. Le molecole di farmaco diffondono attraverso la pelle nella soluzione recettoriale, e i campioni vengono raccolti nel tempo per quantificare la cinetica della permeazione. La pelle addominale espulsa dai ratti SD anestetizzata con pentobarbital sodio (30 mg/kg, i.p.) è stata preparata con cura rimuovendo il grasso sottocutaneo, risciacquata con soluzione salina normale e immersa in soluzione salina normale per 24 ore. È fondamentale proteggere l'integrità dello strato corneo. Non allungare, piegarti o toccare la superficie dell'epidermide. La permeabilità della pelle è fortemente influenzata dal suo stato idratante. Il tempo di idratazione produce risultati riproducibili.

La pelle preparata era montata tra i compartimenti donatore e recettore, con lo strato corneo rivolto verso il compartimento donatore. Il lato donatore riceveva 200 μL di XJCA (equivalente a 0,06 g di farmaco grezzo), mentre il compartimento recettore veniva riempito con 15 mL di soluzione ricevente (30% etanolo: 70% PBS, degassata tramite sonicazione per 15 minuti), mantenuta a 32 ± 0,5 °C sotto agitazione magnetica continua a 350 r·min⁻1. La soluzione ricevente deve essere degassata tramite sonicazione per 15 minuti prima dell'uso per prevenire la formazione di bolle durante l'esperimento.

Un campione di un mL è stato raccolto dal compartimento recettore alle 2, 4, 6, 8, 10, 12, 20 e 24 ore, ogni volta rifornito con un volume uguale di soluzione ricettrice fresca preriscaldata (32 °C).

Nota: La soluzione sostitutiva deve essere alla stessa temperatura per evitare fluttuazioni di temperatura che potrebbero influenzare la cinetica di diffusione. I campioni raccolti sono stati filtrati attraverso membrane microporose da 0,22 μm e successivamente analizzati da UPLC-MS/MS entro 24 ore. A causa dell'instabilità dell'aconitina, i campioni devono essere analizzati entro 24 ore dalla raccolta oppure dovrebbero essere aggiunti stabilizzatori. Se un'analisi immediata non è possibile, si aliciquotano i campioni e si conservano a -80 °C, ma si verifica la loro stabilità in queste condizioni prima di procedere.

Condizioni UPLC-MS/MS
L'analisi cromatografica è stata effettuata utilizzando una colonna Agilent ZORBAX SB-C18 (2,1 × 100 mm, 1,8 μm) mantenuta a 40 °C, con una portata di 0,3 mL/min e un volume di iniezione di 2 μL. La fase mobile era composta da acetonitrile (A) e 0,1 mol/L di soluzione di acetato di ammonio contenente 0,5 mL/L di acido acetico glaciale (B), utilizzando il seguente programma di gradiente: 0–5 min (26%–45% A), 5–7 min (45%–74% A), 7–10,1 min (74%–90% A), 10,1–12 min (90% A), 12–12,1 min (90%–26% A), e 12,1–15 min (26% A).

La rilevazione spettrometrica di massa è stata effettuata con una sorgente di ionizzazione elettrospray (ESI) in modalità ionica positiva sotto le seguenti impostazioni: temperatura del gas di essiccazione 500 °C, flusso del gas essiccante 50 L/min, pressione del nebulizzatore 50 psi, temperatura del gas di guaina 500 °C, flusso di gas di guaina 11 L/min, tensione capillare 5500 V e acquisizione dati in modalità monitoraggio a reazione multipla (MRM). Le transizioni e i parametri MRM erano impostati come segue: aconitina (m/z 646,6→586,4, tempo di permanenza 100 ms, DP 102,930 V, CE 49,810 V) e benzoilaconina (m/z 604,4→105,1, tempo di permanenza 100 ms, DP 105,120 V, CE 74,270 V).

Validazione del metodo e analisi dei dati
La validazione del metodo è stata condotta valutando specificità, linearità, precisione, stabilità e ripetibilità. La specificità è stata verificata analizzando la soluzione ricevente a vuoto, la soluzione standard e la soluzione campione per confermare l'assenza di interferenze da sostanze endogene. Per la linearità, le curve standard sono state costruite tracciando l'area di picco rispetto alla concentrazione utilizzando il metodo della regressione dei minimi quadrati. La precisione è stata valutata sia attraverso test intragiornalieri (6 repliche) che inter-giornati (2 repliche in 3 giorni) utilizzando una soluzione standard da 50 ng/mL, espressa come deviazione standard relativa (RSD) delle aree di picco. La stabilità è stata valutata determinando l'area massima di RSD delle soluzioni campionarie a 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 18 e 24 ore. La ripetibilità è stata confermata misurando la RSD dell'area di picco da sei preparazioni campioni parallele. Le soluzioni standard di stock sono state preparate pesando con precisione 2,5 mg ciascuna di benzoilaconina e aconitina, quindi sciogliendole in una miscela isopropanolo:diclorometano (1:1) per ottenere una concentrazione finale di 25 μg/mL. Per la soluzione di prova, una quantità adeguata del campione veniva trasferita in un tubo centrifuga e sottoposta a centrifugazione ad alta velocità a 12.000 x g per 5 minuti, dopo di che veniva raccolto il soprannatante per l'analisi.

La quantità cumulativa di permeazione (Qn, ng/cm 2) in ogni momento è stata calcolata utilizzando la seguente formula:

Qn = [(Cn × V + ΣCi × Vi) / A]

Dove:
Qn: Quantità cumulativa di permeazione al n-esimo tempo di campionamento (ng/cm2).
Cn: Concentrazione del farmaco nella soluzione ricevente al n-esimo tempo di campionamento (ng/mL).
Ci: Concentrazione del farmaco nella soluzione ricevente al tempo di campionamento i-esimo (ng/mL).
V: Volume della soluzione ricevente (15 mL).
Vi: Volume di campionamento in ogni punto temporale (1 mL).
R: Area di diffusione effettiva della cella di diffusione di Franz (1,76625cm 2).

La curva cumulativa di quantità di permeazione-tempo (Q-t) è stata tracciata con Qn come ordinata e tempo (t, h) come ascissa. La parte lineare della curva Q-t è stata sottoposta a regressione lineare e la pendenza dell'equazione di regressione è stata presa come flusso transdermico a regime stazionario (Js, ng/cm2/h).

La curva Q-t è stata adattata al modello di ordine zero (Q = kt + b), al modello di primo ordine (ln(Qmax - Q) = -kt +lnQ max) e al modello di Higuchi (Q =kt 1/2 + b), dove Qmax è la massima quantità cumulativa di permeazione, k è la costante di velocità e b è l'intercetto. L'adattamento è stato valutato utilizzando il coefficiente di correlazione (R2), con un R2 più alto che indica un adattamento migliore.

Analisi statistica
I dati grezzi di singoli animali per tutti i test comportamentali in vivo e i dati cromatografici grezzi UPLC-MS/MS per lo studio di permeazione in vitro sono forniti rispettivamente come Supplementary Files 1 e 2. Tutti i dati sperimentali sono stati presentati come deviazione media ± standard (x̄ ± SD). L'analisi statistica è stata effettuata utilizzando GraphPad Prism 9.0. L'analisi unidirezionale della varianza (ANOVA) seguita dal test di confronto multiplo di Dunnett è stata utilizzata per confrontare le differenze tra i gruppi. P < 0,05 è stato considerato statisticamente significativo.

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Risultati

Dipendenza dall'efficacia analgesica e antinfiammatoria nell'area di applicazione
XJCA ha mostrato una correlazione positiva tra area di applicazione ed efficacia analgesica/antinfiammatoria nei modelli murini, dopo 7 giorni consecutivi di somministrazione a una dose fissa di 0,03 g/cm2. Nel test della piastra calda, il gruppo NC ha mostrato la PWL media più breve, indicando la risposta al dolore più forte. Al contrario, i gruppi trattati con XJCA hanno mos...

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Discussione

Infiammazione e dolore sono processi patologici complessi che coinvolgono molteplici vie di segnalazione. I preparati topici sono stati sempre più preferiti perché possono agire con precisione sulle lesioni e ridurre le reazioni avversesistemiche 21,22. Questo studio ha stabilito e validato con successo un quadro metodologico sistematico per la valutazione delle formulazioni topiche di MTC, utilizzando XJCA come caso dimostrativo...

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.

Ringraziamenti

Questo studio è stato supportato dal Programma di Borsisti Taishan della provincia di Shandong (tsqn20250730), dall'Università (Università del Sichuan)-Impresa (Tibet Rhodiola Pharmaceutical Holding Co., Ltd.) Progetto di Cooperazione (24H0764, 24H1043) e il programma di borsisti Bian Que dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese dello Shandong.

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
0.22 & mu; m filtri a membrana microporosaMilliporeSigma, Burlington, MA, USAGSWP04700
Acido aceticoCNW Technologies GmbHN3800060Grado cromatografia
AcetonitrileMerck KGaAI1241129242Grado di spettrometria di massa
AconitinaChengdu Lemeitian Pharmaceutical Technology Co., Ltd.DSTDW00060220 mg, ≥ 98% di purezza
Colonna Agilent ZORBAX SB-C18Agilent2.1 e volte; 100 mm, 1,8 μ m
Acetato di ammonioREAGENTE GENERALEP1492146Grado analitico
BenzoilaconinaChengdu Lemeitian Pharmaceutical Technology Co., Ltd.DSTDB00550220 mg, ≥ 98% di purezza
DiclorometanoCINC Chemical Co., Ltd.P3048495Grado analitico
Emulgel di Dietilamina Diclofenaca (DDE)Novartis Pharma Beijing Co., Ltd.H20020176
Soluzione di formalinaSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.10010061
Celle di diffusione di FranzShenzhen Ruituo Analytical Instruments Co., Ltd.RT806
Software GraphPad Prism 9.0GraphPad Software, Inc.Versione 9.0
IsopropanoloREAGENTE GENERALE0530240601DGrado cromatografia
Soluzione fisiologica normaleSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.SY15931
Pentobarbital sodioSigma-Aldrich, St. Louis, MO, USAP3761
Acqua purificataGuangzhou Watson's Food and Beverage Co., Ltd.Lotto n. 20240717C
Topi di Kunming SPFChengdu Enswell Biotechnology Co., Ltd.Licenza: SYXK (Sichuan) 2019-049
Ratti SPF Sprague-DawleyBeijing Speifu Biotechnology Co., Ltd.Licenza: SYXK (Pechino) 2024-0010
Sistema UPLC-MS/MSAgilent Technologies, Santa Clara, CA, USAAgilent 1260 Infinity
Agente di Rivestimento Analgesico Xueshan Jinluohan (XJCA)Tibet Pharmaceutical Co., Ltd.Z20010095
XyleneSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.10023418

Riferimenti

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