Viene descritto un modello di ferita cutanea di ratto che consente la valutazione di vari agenti terapeutici in condizioni fisiologiche o patologiche attraverso le diverse fasi del processo di guarigione. Inoltre, è dettagliato un protocollo per eseguire la planimetria manuale al fine di monitorare la velocità di contrazione della ferita durante la riparazione dei tessuti.
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Articolo metodologico
Un modello chirurgico di ferite cutanee per ratti: un approccio per studi di guarigione delle ferite e valutazione dei biomateriali
In questo articolo
Sommario
Abstract
La guarigione delle ferite cutanee è un processo biologico complesso che coinvolge fasi coordinate di infiammazione, proliferazione e rimodellamento. Data la necessità di comprendere meglio i meccanismi sottostanti della guarigione delle ferite, i modelli animali escisionali sono ampiamente utilizzati per approfondire la conoscenza di questo processo e facilitare lo sviluppo di nuovi approcci terapeutici. In tali modelli, l'induzione delle ferite cutanee tramite biopsie punch è spesso impiegata poiché produce lesioni standardizzate. Tuttavia, questa tecnica limita la lesione a una forma circolare, che potrebbe non essere adatta ad alcuni scopi sperimentali. In questo contesto, viene presentato un semplice protocollo chirurgico riproducibile per indurre ferite cutanee a spessore completo nei ratti, utilizzando un modello quadrato standardizzato sul fianco. Questa metodologia consente la creazione di lesioni di dimensioni e geometrie variabili, offrendo maggiore flessibilità sperimentale adattata agli obiettivi specifici di ogni studio e consentendo il monitoraggio del processo di guarigione in condizioni fisiologiche o patologiche. Inoltre, viene descritto un metodo per monitorare la frequenza di contrazione della ferita tramite planimetria manuale. Sebbene l'esecuzione di questo protocollo richieda attenzione ai dettagli e competenza tecnica, non sono richieste competenze chirurgiche avanzate.
Introduzione
La guarigione della ferita cutanea è un processo biologico complesso e orchestrato che comprende molteplici eventi coordinati volti a ripristinare l'integrità dei tessuti. Questo fenomeno progredisce attraverso fasi distinte ma sovrapposte, che includono emostasi e infiammazione, proliferazione erimodellazione 1. La fase infiammatoria inizia pochi minuti dopo la formazione della ferita, raggiunge il picco tra le 24 e le 48 ore dopo l'infortunio e coinvolge il reclutamento delle cellule immunitarie e il rilascio di mediatori infiammatori. La fase proliferativa è caratterizzata da riepitelizzazione e formazione d....
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Protocollo
Tutte le procedure sperimentali sono state approvate dal Comitato Etico sull'Uso degli Animali (CEUA) dell'Universidade Estadual de Santa Cruz (UESC). I ratti wistar (Rattus norvegicus) sono stati ottenuti dal Laboratorio di Allevamento, Manutenzione e Sperimentazione Animale (LaBIO)/Struttura Animale presso UESC, secondo il protocollo CEUA/UESC n. 010/25. Tutte le procedure sugli animali sono state condotte in conformità con la Guida NIH per la Cura e l'Uso degli Animali da Laboratorio e rispettavano le linee guida istituzionali per il benessere animale e l'uso etico. Il progetto complessivo del protocollo sperimentale è mos....
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Risultati
In questo esperimento, la sulfadiazina d'argento è stata utilizzata come trattamento di riferimento. Il prodotto è stato applicato topicamente sul letto della ferita 24 ore dopo l'induzione della lesione. La scelta della sulfadiazina d'argento si basava sul suo ben consolidato uso clinico come agente antimicrobico e nella gestione delle ferite cutanee. I dati sono presentati come intervallo mediano e interquartile, con n = 5 animali per ogni punto sperimentale. La Fi.......
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Discussione
Sebbene le conoscenze sulla guarigione delle ferite umane siano notevolmente avanzate, le difficoltà e le limitazioni intrinseche rendono l'uso di modelli sperimentali indispensabile per la ricerca in questocampo 4. In questo contesto, il presente protocollo mirava a descrivere un modello di ferita escissionale a spessore completo indotto con un bisturi sul fianco dei ratti come metodologia alternativa alle tecniche convenzionali. La regione dorsale associata all'.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi in conflitto.
Ringraziamenti
Ringraziamo con gratitudine la Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado da Bahia (FAPESB) e la Coordinazione de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) per il supporto alla borsa di studio; la Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação (PROPP/UESC), il programma post-laurea in Biologia e Biotecnologia dei Microrganismi (PPGBBM/UESC), per il sostegno finanziario. Ringraziamo inoltre l'Ospedale di Medicina Veterinaria (HVET/UESC) per aver messo a disposizione la sala operatoria e le attrezzature.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Alcool (etanolo 70%) | Dinâmica | P.01.0024.006.06.81 | Antisepsi |
| Forbice anatomica | Sigma-Aldrich | F3892 | Acciaio inossidabile |
| Benda | Qualsiasi | Non applicabile | Protezione della ferita |
| Calibratore | Mitutoyo | 530-104 | Delimitazione della ferita |
| Soluzione antisettica acquosa di clorexidina 0,2% | Riohex | Non applicabile | Antisepsi |
| Camera CO2 | Bonther | D149F1LYSZ | Induzione anestetica |
| Benda creppa | Cremer | 818765 | 15 cm x 1,25 m |
| Guanti in lattice monouso | Descarpak | e0530101 | Non sterili |
| Tampone di garza | Cremer | 819342 | 7,5 x 7,5 cm |
| Siringa ipodermica | Dercarpack | e0324201 | 1 mL con ago |
| ImageJ | Image J | https://imagej.net/ij/ | Misura planimetrica |
| ImitoWound | ImitoWound | https://imito.io/pt/imitowound | Misura planimetrica |
| Asciugamano di carta piegato | Scott Smart | 48260 | Pulizia generale |
| Isoflurano | Cristália | 7.89668E+12 | Anestetico inalatorio |
| Guanti in lattice per procedura | Guanti in lattice per procedura Guanti in lattice per procedura | Dispositivi di protezione individuale | |
| Sapone liquido | Qualsiasi | Non applicabile | Pulizia dell'area della ferita |
| Forbici Mayo, dritte, affilate/affilate | Fine Science Tools | 14001-12 | Acciaio inossidabile |
| Righello millimetrico | Qualsiasi | Non applicabile | |
| Solfato di morfina | Sigma-Aldrich | M8777 | Soluzione iniettabile 1 mg/mL |
| Foglio di carta | Qualsiasi | Non applicabile | |
| Marcatore permanente | Qualsiasi | Non applicabile | Marcatura della pelle |
| Povidone-iodo | Rioquimica | ZK48BN72E | Antisettico |
| Lama di bisturi n. 23 | Descarpak | 740801 | Acciaio inossidabile |
| Manico di bisturi n. 4 | Sigma-Aldrich | Non applicabile | Acciaio inossidabile |
| Lama di rasoio in acciaio inossidabile | Wilkinson | N/A | Rimozione dei peli |
| Guanto chirurgico sterile | Descarpak | e0212101 | Sterili |
| Maschera chirurgica | Qualsiasi | Non applicabile | Non sterili |
| Cloridrato di tramadolo | UniãoQuímica | 7.89601E+12 | Solução injetável 50 mg/mL |
| Bendita trasparente | Vital derme | 1503 | 15 cm x 10 m |
| Nastro adesivo trasparente in polipropilene | Nastro adesivo trasparente in polipropilene Nastro adesivo trasparente in polipropilene | Protezione della ferita | |
| Coperta termica veterinaria con copertura in PVC | Prevtech | MSO2VT001 | Mantenimento della temperatura corporea |
| Nastro adesivo impermeabile | Cremer | 819113 | 10 cm x 4,5 m |
Riferimenti
- Lin X, Lai Y. Skin scarring: mechanisms and therapies. Int J Mol Sci. 2024;25(3):1458.
- Desjardins-Park HE, Mascharak S, Longaker MT, Wan DC. Endogenous mechanisms of craniomaxillofacial repair: toward novel regenerative therapies. Front Oral Health. 2021;2:676258.
- Han G, Ceilley R. Chronic wound healing: a review of current management and treatments. Adv Ther. 2017;34(3):599-610.
- Benito-Martínez S, Pérez-Köhler B, Rodríguez M, Izco JM, Recalde JI, Pascual G. Wound healing modulation through the local application of powder collagen-derived treatments in an excisional cutaneous murine model. Biomedicines. 2022;10(5):960.
- Ell....
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Ristampe e permessi
