Il modello di guarigione dell'alveolo dentario (TSHM) è un modello classico per lo studio della rigenerazione ossea1. Questo modello crea una lesione impegnativa ma subcritica all'interno dell'osso alveolare, consentendo una riparazione naturale favorevole senza interventi aggiuntivi1. I topi sono ampiamente utilizzati come organismi modello grazie al loro background genetico, alle somiglianze con il metabolismo osseo umano, ai costi relativamente bassi di allevamento e alla facilità di mantenimento2. Negli ultimi decenni, i rapidi progressi nella tecnologia di editing genico hanno reso i topi indispensabili per indagare i meccanismi molecolari alla base della rigenerazione ossea3. Di conseguenza, l'estrazione dei molari in topi transgenici è stata ampiamente utilizzata per stabilire il modello TSHM allo scopo di studiare i meccanismi regolatori della rigenerazione ossea4,5,6.
La maggior parte degli studi precedenti ha stabilito il modello murino di TSHM utilizzando la mascella4,5,6, poiché la mandibola è meccanicamente più rigida e meno compliant rispetto alla mascella7, il che aumenta la difficoltà tecnica dell'estrazione dentale. Inoltre, il campo chirurgico per l'estrazione dei molari mascellari è relativamente più accessibile e la mascella è più facile da stabilizzare rispetto alla mandibola, rendendo la procedura tecnicamente meno complessa. Nonostante queste difficoltà, la morfologia radicolare apicale curva e ingrandita del primo molare mandibolare del topo aumenta il fissaggio meccanico all'interno dell'osso alveolare circostante8,9, complicando ulteriormente l'estrazione (Figura 1). Tuttavia, i modelli di estrazione mandibolare rimangono indispensabili per lo studio di processi patologici specifici della mandibola, inclusi l'osteomielite, l'osteonecrosi mascellare correlata a farmaci, l'osseointegrazione degli impianti e la rigenerazione ossea mediante biomateriali10,11,12. Pertanto, un metodo riproducibile e affidabile per l'estrazione dei molari mandibolari nei topi è fondamentale per studi che richiedono modelli di guarigione dell'alveolo dentale specifici per la mandibola.

Figura 1. Confronto schematizzato della morfologia del dente negli esseri umani e nei topi.
(A) Illustrazione schematica di un dente umano adulto. (B) Illustrazione schematica del primo molare mandibolare di un topo adolescente. (C) Illustrazione schematica del primo molare mandibolare di un topo adulto. I diagrammi evidenziano le differenze nella morfologia delle radici e nella distribuzione del cemento che contribuiscono al maggiore fissaggio meccanico dei primi molari mandibolari nei topi adulti all'interno dell'osso alveolare. Lo smalto, la dentina e il cemento sono indicati dai corrispondenti colori riportati nella legenda. Le caratteristiche anatomiche si basano su descrizioni pubblicate8,9,15. Cliccare qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.
Una tecnica precedentemente sviluppata dal nostro gruppo di ricerca per l'estrazione dentaria utilizza siringhe modificate in elevatori dentali13. Sebbene questo metodo consenta l'estrazione con successo del primo molare mandibolare destro nei topi, richiede un elevato livello di precisione tecnica e presenta una curva di apprendimento ripida, che necessita di un'ampia pratica. Operatori inesperti potrebbero involontariamente provocare lesioni alle strutture anatomiche adiacenti. Inoltre, l'estrazione del primo molare mandibolare sinistro richiede un ulteriore addestramento "a immagine speculare" per raggiungere la competenza procedurale. Queste difficoltà possono compromettere l'integrità della sede alveolare post-estrattiva, ridurre la coerenza dei risultati di guarigione tra gli animali e limitare l'accessibilità del modello per ricercatori con esperienza microchirurgica limitata.
Questo protocollo descrive un approccio modificato per l’estrazione del primo molare mandibolare nei topi, volto a migliorare l’accessibilità e la riproducibilità della procedura. Il protocollo è stato validato in topi maschi C57BL/6 di 8 settimane per la realizzazione di un modello murino di TSHM del primo molare mandibolare. L’approccio modificato è stato confrontato sistematicamente con la tecnica convenzionale al fine di valutare l’efficienza procedurale, il successo dell’estrazione e le complicanze legate alla procedura. Inoltre, sono stati analizzati i principali modi di fallimento tecnico riscontrati durante l’apprendimento del metodo, al fine di fornire indicazioni pratiche ai ricercatori che intendono stabilire un modello murino di TSHM mandibolare.