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Articolo metodologico

Un approccio modificato per l'estrazione dentale volto a migliorare l'efficienza e la coerenza procedurale in un modello di guarigione dell'alveolo dentale mandibolare murino

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DOI:

10.3791/72974

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8 settembre 2026

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In questo articolo

Sommario

Viene descritto un approccio modificato per l'estrazione del primo molare mandibolare nei topi e confrontato con l'approccio convenzionale al fine di valutare l'efficienza e la riproducibilità della procedura. L'approccio modificato migliora la coerenza procedurale e riduce le difficoltà tecniche nella creazione di un modello murino di guarigione dell'alveolo dentale mandibolare.

Abstract

Il modello di guarigione dell'alveolo dentale (TSHM) è un modello animale ampiamente utilizzato per studiare i meccanismi molecolari alla base della rigenerazione ossea. Sebbene il modello TSHM mandibolare murino sia utile per indagare processi patologici specifici della mandibola, la sua realizzazione rimane tecnicamente impegnativa a causa delle caratteristiche anatomiche e biomeccaniche della regione molare mandibolare. Questo protocollo descrive un approccio modificato per l'estrazione del primo molare mandibolare nei topi e ne confronta le prestazioni con la tecnica convenzionale, al fine di migliorare l'efficienza e la riproducibilità della procedura. In condizioni sperimentali controllate, l'approccio modificato ha ridotto significativamente il tempo medio di estrazione da 29 a 10 minuti. Inoltre, il gruppo trattato con la tecnica modificata ha mostrato un numero inferiore di complicanze legate all'estrazione, tra cui fratture radicolari e dell'osso alveolare, indicando una maggiore coerenza procedurale. Un'analisi mediante tomografia computerizzata microfocale (μCT) ha ulteriormente dimostrato un migliore mantenimento dell'architettura dell'alveolo estrattivo durante le fasi iniziali di guarigione. Questi risultati indicano che l'approccio modificato all'estrazione migliora l'efficienza e la riproducibilità della procedura, riducendo al contempo le difficoltà tecniche associate all'estrazione dentale murina della mandibola. Questo protocollo potrebbe facilitare un'implementazione più uniforme dei modelli di guarigione dell'alveolo dentale murino, in particolare per ricercatori con esperienza limitata in microchirurgia.

Introduzione

Il modello di guarigione dell'alveolo dentario (TSHM) è un modello classico per lo studio della rigenerazione ossea1. Questo modello crea una lesione impegnativa ma subcritica all'interno dell'osso alveolare, consentendo una riparazione naturale favorevole senza interventi aggiuntivi1. I topi sono ampiamente utilizzati come organismi modello grazie al loro background genetico, alle somiglianze con il metabolismo osseo umano, ai costi relativamente bassi di allevamento e alla facilità di mantenimento2. Negli ultimi decenni, i rapidi progressi nella tecnologia di editing genico hanno reso i topi indispensabili per indagare i meccanismi molecolari alla base della rigenerazione ossea3. Di conseguenza, l'estrazione dei molari in topi transgenici è stata ampiamente utilizzata per stabilire il modello TSHM allo scopo di studiare i meccanismi regolatori della rigenerazione ossea4,5,6.

La maggior parte degli studi precedenti ha stabilito il modello murino di TSHM utilizzando la mascella4,5,6, poiché la mandibola è meccanicamente più rigida e meno compliant rispetto alla mascella7, il che aumenta la difficoltà tecnica dell'estrazione dentale. Inoltre, il campo chirurgico per l'estrazione dei molari mascellari è relativamente più accessibile e la mascella è più facile da stabilizzare rispetto alla mandibola, rendendo la procedura tecnicamente meno complessa. Nonostante queste difficoltà, la morfologia radicolare apicale curva e ingrandita del primo molare mandibolare del topo aumenta il fissaggio meccanico all'interno dell'osso alveolare circostante8,9, complicando ulteriormente l'estrazione (Figura 1). Tuttavia, i modelli di estrazione mandibolare rimangono indispensabili per lo studio di processi patologici specifici della mandibola, inclusi l'osteomielite, l'osteonecrosi mascellare correlata a farmaci, l'osseointegrazione degli impianti e la rigenerazione ossea mediante biomateriali10,11,12. Pertanto, un metodo riproducibile e affidabile per l'estrazione dei molari mandibolari nei topi è fondamentale per studi che richiedono modelli di guarigione dell'alveolo dentale specifici per la mandibola.

Diagramma dell'anatomia del dente: sezioni che mostrano smalto, dentina e cemento; A, B, C indicano stadi diversi.
Figura 1. Confronto schematizzato della morfologia del dente negli esseri umani e nei topi. 
(A) Illustrazione schematica di un dente umano adulto. (B) Illustrazione schematica del primo molare mandibolare di un topo adolescente. (C) Illustrazione schematica del primo molare mandibolare di un topo adulto. I diagrammi evidenziano le differenze nella morfologia delle radici e nella distribuzione del cemento che contribuiscono al maggiore fissaggio meccanico dei primi molari mandibolari nei topi adulti all'interno dell'osso alveolare. Lo smalto, la dentina e il cemento sono indicati dai corrispondenti colori riportati nella legenda. Le caratteristiche anatomiche si basano su descrizioni pubblicate8,9,15. Cliccare qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.

Una tecnica precedentemente sviluppata dal nostro gruppo di ricerca per l'estrazione dentaria utilizza siringhe modificate in elevatori dentali13. Sebbene questo metodo consenta l'estrazione con successo del primo molare mandibolare destro nei topi, richiede un elevato livello di precisione tecnica e presenta una curva di apprendimento ripida, che necessita di un'ampia pratica. Operatori inesperti potrebbero involontariamente provocare lesioni alle strutture anatomiche adiacenti. Inoltre, l'estrazione del primo molare mandibolare sinistro richiede un ulteriore addestramento "a immagine speculare" per raggiungere la competenza procedurale. Queste difficoltà possono compromettere l'integrità della sede alveolare post-estrattiva, ridurre la coerenza dei risultati di guarigione tra gli animali e limitare l'accessibilità del modello per ricercatori con esperienza microchirurgica limitata.

Questo protocollo descrive un approccio modificato per l’estrazione del primo molare mandibolare nei topi, volto a migliorare l’accessibilità e la riproducibilità della procedura. Il protocollo è stato validato in topi maschi C57BL/6 di 8 settimane per la realizzazione di un modello murino di TSHM del primo molare mandibolare. L’approccio modificato è stato confrontato sistematicamente con la tecnica convenzionale al fine di valutare l’efficienza procedurale, il successo dell’estrazione e le complicanze legate alla procedura. Inoltre, sono stati analizzati i principali modi di fallimento tecnico riscontrati durante l’apprendimento del metodo, al fine di fornire indicazioni pratiche ai ricercatori che intendono stabilire un modello murino di TSHM mandibolare.

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Protocollo

Tutte le procedure sono state approvate dal Comitato Etico della Scuola di Stomatologia di West China, Università di Sichuan (WCHSIRB-D-2025-188), e sono state eseguite nel rispetto delle linee guida istituzionali per la cura degli animali.

NOTA: Utilizzare topi maschi C57BL/6 di 8 settimane di età, del peso di 22–29 g. Mantenere gli animali con una dieta standard a base di mangime e acqua fornita ad libitum in condizioni abitative standard (21°C–24°C, umidità 40%–60%, ciclo luce-buio di 12 ore). Utilizzare i materiali e gli strumenti elencati nella Tabella dei Materiali. Utilizzare 24 topi per la valutazione comparativa e la presentazione dei casi falliti. Utilizzare topi aggiuntivi per la formazione dell'operatore prima dell'esperimento comparativo.

1. Preparazione preoperatoria

  1. Preparazione dello strumento
    1. Preparare aghi per siringa da 25 G da utilizzare come elevatori (opzionale). Curvare la punta smussata di ciascun ago a circa 20°–40°13.
    2. Preparare pinzette oftalmiche dentate da utilizzare come pinze dentali. Ispezionare la punta dentata con l'ausilio di una lente d'ingrandimento per verificare che i denti siano correttamente allineati e privi di deformazioni.
    3. Assemblare un retrattore per bocca utilizzando un elastico e quattro aghi per siringa da 25 G. Preparare una tavola di polistirolo o cartone come piattaforma operatoria, del nastro adesivo per fissare gli arti del topo e una lampada frontale per illuminare il campo operatorio.
    4. Preparare una piastra riscaldante per il recupero postoperatorio e preriscaldarla a circa 38°C prima dell'intervento. Preparare batuffoli di cotone per l'emostasi e una quantità adeguata di soluzione fisiologica per la pulizia della cavità orale.
    5. Preparare un copridito da indossare sul pollice per proteggere l'operatore durante la procedura di estrazione.
    6. Posizionare un tessuto non tessuto sterile sulla superficie operatoria e sulla piastra riscaldante per mantenere un campo sterile.
  2. Preparazione dell'anestesia
    1. Disinfettare l'addome del topo utilizzando un batuffolo di cotone imbevuto di soluzione antisettica a base di povidone-iodio. Somministrare pentobarbital sodico al 1% (50 mg/kg) per via intraperitoneale14. Valutare la profondità dell'anestesia mediante il test di pizzicamento delle dita dei piedi e somministrare anestetico supplementare se necessario.
      NOTA: Se il riflesso al pizzicamento delle dita dei piedi ritorna o se la procedura si avvicina alla durata anestetica prevista, interrompere l'intervento e somministrare anestetico supplementare secondo il protocollo veterinario istituzionale approvato.
    2. Applicare immediatamente dopo l'anestesia un unguento oftalmico veterinario su entrambi gli occhi per prevenire l'essiccamento della cornea.
  3. Preparazione della disinfezione e sterilizzazione
    1. Disinfettare la piattaforma chirurgica, la piastra riscaldante, il nastro adesivo, il copridito e l'area di lavoro circostante con etanolo al 75%. Utilizzare nuovi bastoncini sterili, tessuto non tessuto, elastici e aghi per ogni topo. Sterilizzare le pinzette dentate e la soluzione fisiologica seguendo il protocollo istituzionale standard di sterilizzazione a vapore prima dell'uso.
      ATTENZIONE: L'etanolo al 75% è infiammabile. Utilizzarlo in un'area ben ventilata, lontano da fonti di calore, scintille, fiamme libere e altri possibili inneschi. Indossare l'apposita attrezzatura di protezione individuale. Attendere che strumenti e superfici trattati con etanolo siano completamente asciutti prima di iniziare la procedura.
    2. Eseguire l'igiene delle mani prima di iniziare la procedura. Indossare camice chirurgico pulito, cuffia sterile, mascherina chirurgica e guanti sterili.

2. Procedura chirurgica

  1. Fissazione e pulizia del topo
    1. Posizionare il topo in posizione supina sulla piastra di fissaggio e fissare gli arti con del nastro adesivo. Inserire due aghi da 25 G nel supporto in schiuma a livello del piano orbito-auricolare e inserire altri due aghi da 25 G al di sotto della mandibola.
    2. Posizionare l'elastico sugli aghi e attraverso gli incisivi per mantenere la bocca aperta. Ritirare delicatamente la lingua e posizionarla sul lato opposto al sito di estrazione per evitare ostruzioni del campo operatorio. Utilizzare il primo molare mandibolare destro come esempio rappresentativo in tutto il protocollo.
    3. Rimuovere i residui di cibo e altri materiali estranei dalla cavità orale utilizzando una piccola pallina di cotone inumidita con soluzione salina.
      NOTA: Spremere accuratamente il cotone per rimuovere l'eccesso di soluzione salina ed evitare che il liquido entri nella cavità orale, il che potrebbe causare soffocamento.
  2. Eliminazione della resistenza distale e mesiale (opzionale)
    1. Utilizzare la pinzetta con la mano sinistra per ritirare l'angolo destro della bocca ed esporre completamente il primo molare mandibolare destro e i tessuti molli buccali e linguale circostanti.
    2. Impugnare la pinzetta con la mano destra. Successivamente, tenere un ago da 25 G con la mano sinistra e inserire con attenzione l'ago nel legamento parodontale buccale adiacente alla radice distale per creare uno spazio nel legamento parodontale.
    3. Avanzare lentamente l'ago verso la regione periapicale ruotandolo in direzione mesiale e linguale verso il molare, per allentare la radice dal suo alveolo.
    4. Inserire un ago da 25 G nella biforcazione radicolare dal lato buccale ed elevarlo in direzione occlusale con la mano sinistra. Inserire un secondo ago da 25 G nel legamento parodontale linguale adiacente alla radice mesiale con la mano destra per creare uno spazio nel legamento parodontale, quindi ruotare l'ago in direzione distale e buccale.
    5. Ritirare entrambi gli aghi dal campo operatorio dopo aver completato l'allentamento preliminare del legamento parodontale.
      NOTA: Eseguire l'allentamento preliminare del legamento parodontale solo quando il dente presenta scarsa mobilità e una resistenza marcata dopo le prime oscillazioni con la pinzetta.
  3. Oscillazione ed estrazione
    1. Stabilizzare la testa del topo utilizzando l'indice e il medio della mano sinistra. Appoggiare il pollice, protetto da un manicotto per dito, sugli incisivi mandibolari per ottenere un supporto stabile mentre si impugna la pinzetta con la mano destra.
    2. Posizionare le punte della pinzetta perpendicolari al piano occlusale e parallele all'asse longitudinale del dente. Posizionare le punte dentellate all'interno della biforcazione radicolare per ottenere una trazione stabile.
      NOTA: Non afferrare direttamente la radice del dente con la pinzetta poiché ciò potrebbe causare frattura radicolare.
    3. Agganciare la corona con la pinzetta ed esercitare movimenti oscillatori leggeri in direzione buccolinguale. Limitare l'angolo di oscillazione verso la parte buccale a 30° e quello verso la parte linguale a 50°. Eseguire un movimento oscillatorio ogni 1–1,5 s.
    4. Mantenere la trazione lungo l'asse longitudinale del molare, dall'apice verso la corona, esercitando contemporaneamente un supporto contrapposto stabile contro gli incisivi mandibolari con il pollice sinistro per stabilizzare la mandibola.
      NOTA: Mantenere un supporto contrapposto continuo e stabile, evitando compressioni eccessive o spostamenti degli incisivi e dei tessuti molli adiacenti.
    5. Continuare i movimenti oscillatori finché il dente diventa gradualmente mobile e la superficie occlusale si solleva visibilmente al di sopra dei molari adiacenti. Mantenere le punte della pinzetta parallele all'asse longitudinale del dente per tutta la durata della procedura, quindi estrarre il dente una volta raggiunta la mobilità sufficiente.
      NOTA: Prima di applicare la forza finale di estrazione, valutare la mobilità del dente oscillando delicatamente la corona in direzione buccolinguale. Procedere con l'estrazione solo quando la corona può essere spostata con minima resistenza e l'ampiezza del movimento buccolinguale raggiunge circa metà della larghezza della corona. Rivalutare immediatamente la profondità dell'anestesia prima dell'estrazione completa. Somministrare anestesia supplementare se necessario (Figura 2).

Confronto tra tecniche di estrazione dentale, diagramma e risultati; metodi convenzionali e modificati con radici estratte.
Figura 2. Confronto tra i metodi convenzionali e modificati di estrazione del primo molare mandibolare murino. 
(A) Illustrazione schematica del metodo convenzionale di estrazione, in cui un ago curvato da 25 G viene inserito nel legamento parodontale e utilizzato come leva per lussare il dente. (B) Illustrazione schematica del metodo di estrazione modificato, in cui pinze oftalmiche dentate afferrano la corona ed esercitano una trazione parallela all’asse longitudinale del dente. (C) Immagine rappresentativa della punta curvata dell’ago da 25 G utilizzato come sollevatore. (D) Immagine rappresentativa delle pinze oftalmiche dentate utilizzate come strumento microchirurgico per l’estrazione. (E) Immagine intraoperatoria rappresentativa che mostra la cavità alveolare immediatamente dopo l’estrazione del primo molare mandibolare; le linee tratteggiate indicano le cavità alveolari. (F) Vista vestibolare di un primo molare mandibolare estratto con successo. (G) Vista linguale dello stesso primo molare mandibolare estratto. Le barre della scala corrispondono a 2 mm (C,D) e 400 µm (E–G). Cliccare qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.

3. Esame dei denti estratti e delle alveole di estrazione

  1. Esaminare il dente estratto per confermare l'avvenuta rimozione completa e l'integrità strutturale. Verificare che la morfologia radicolare sia preservata, con una radice mesiale più lunga, una radice distale più corta e un allargamento apicale15. Accertarsi che non siano presenti frammenti ossei alveolari ancora attaccati al dente estratto.
  2. Esaminare l'alveolo estrattivo per confermare che sia pulito e privo di frammenti radicolari residui (Figura 2).
    NOTA: Se durante l'estrazione si sospetta la presenza di una radice residua o fratturata, evitare manovre ripetute poiché tentativi eccessivi potrebbero peggiorare i difetti dell'alveolo. Ispezionare la sede estrattiva con l'ausilio della magnificazione per confermare la presenza di frammenti radicolari residui. Registrare i casi con radici residue o fratturate come estrazioni fallite ed escluderli dalla successiva valutazione del modello. Gestire questi animali in conformità al protocollo animale approvato.

4. Cura postoperatoria

  1. Applicare cotone asciutto per ottenere emostasi. Pulire la cavità orale utilizzando una piccola pallina di cotone inumidita con soluzione salina e quindi riposizionare la lingua.
    NOTA: Inumidire la pallina di cotone con il volume minimo di soluzione salina sterile necessario ad ammorbidirne la superficie senza produrre liquido libero.
  2. Somministrare carprofene (5 mg/kg, per via sottocutanea) dopo l'intervento chirurgico per l'analgesia postoperatoria.
  3. Posizionare l'animale su un tappetino riscaldante e monitorarlo continuamente fino al recupero della coscienza.
  4. Dopo il risveglio dall'anestesia, fornire cibo standard ammorbidito o una dieta in gel sulla base della gabbia per 3 giorni, con acqua disponibile ad libitum. Riprendere la dieta standard con cibo solido dopo aver confermato un comportamento alimentare normale.
  5. Monitorare l'assunzione di cibo, il peso corporeo, l'attività, il comportamento di toeletta, il gonfiore facciale, il sanguinamento orale e i segni di dolore o malessere a intervalli predeterminati.

5. Formazione degli operatori

  1. Assegnare casualmente due operatori, nessuno dei quali abbia esperienza pregressa con modelli di rigenerazione dei tessuti duri del topo, al gruppo di estrazione convenzionale o modificato. Addestrare i due operatori separatamente sotto la supervisione dello stesso istruttore, esperto sia nell'approccio convenzionale che in quello modificato.
  2. Nella prima settimana, istruire ciascun operatore ad esercitarsi sulla procedura di estrazione assegnata utilizzando cadaveri di topo, al fine di familiarizzare con il flusso chirurgico.
  3. Nella seconda settimana, supervisionare l’addestramento su topi vivi per valutare e perfezionare l’applicazione pratica di ciascuna tecnica. Monitorare ogni procedura per garantire un’adeguata anestesia e prevenire complicazioni chirurgiche impreviste, come lesioni accidentali ai tessuti molli circostanti causate da un uso improprio degli strumenti o danni alle strutture alveolari. Confermare la competenza dell’operatore quando riesce a eseguire in modo indipendente tre estrazioni consecutive con successo. Al termine dell’addestramento supervisionato, procedere agli esperimenti comparativi di estrazione.

6. Preparazione del campione

  1. Eutanasia i topi mediante dislocazione cervicale. Disseca le mandibole dalla testa e rimuovi i tessuti molli aderenti.
  2. Fissare le mandibole in soluzione di paraformaldeide al 4% per 48 h. Conservare i campioni in PBS prima di µCT scansione

7. µCT e analisi

  1. Scansionare le mandibole utilizzando un µCT scanner. Impostare i parametri di scansione su 80 kV, 500 µA, 10 µm risoluzione del voxel e scansione strato per strato.
  2. Calibrare il µCT sistema utilizzando un fantoccio in idrossiapatite. Scansionare il fantoccio ed esportare le immagini ricostruite utilizzando DataViewer.
    1. Analizzare le immagini del fantoccio utilizzando CTAn. Stabilire una curva di calibrazione correlando i valori misurati di attenuazione TC dei settori del fantoccio con le loro densità minerali note, al fine di convertire i valori di attenuazione in DMO.
    2. Applicare parametri di scansione e ricostruzione identici a tutti i campioni.
    3. Ricostruire tutti i dataset utilizzando il flusso di lavoro di ricostruzione standardizzato in CTAn associato al µCT Sistema. Applicare identiche impostazioni di ricostruzione, definizione di ROI e criteri di analisi quantitativa a tutti i campioni. Eseguire la ricostruzione tridimensionale separatamente utilizzando Mimics Research per una visualizzazione rappresentativa, seguendo la stessa definizione di ROI utilizzata per l'analisi quantitativa con CTAn.
  3. Definire la regione di interesse (ROI) selezionando la regione apicale della radice del primo molare mandibolare estratto. Acquisire 100 sezioni trasversali consecutive che si estendono in direzione apicale dalla giunzione amelo-cementizia del secondo molare adiacente.
    1. Delimitare manualmente la regione di interesse (ROI) in ogni sezione lungo il margine dell'osso alveolare neoformato che circonda la cavità estrattiva. Eseguire il successivo processamento delle immagini e l'analisi quantitativa utilizzando CTAn con parametri di analisi identici per tutti i campioni.
  4. Eseguire la ricostruzione tridimensionale utilizzando Mimics Research. Calcolare l'incidenza di fratture radicolari e difetti della parete alveolare come proporzione dei campioni mandibolari che presentano ciascuna condizione rispetto al numero totale di campioni mandibolari.
  5. Eseguire tutte le analisi statistiche e generare i grafici utilizzando GraphPad Prism v10.1.2. Valutare la normalità delle variabili continue mediante il test di Shapiro–Wilk.
    1. Definire il singolo topo e la relativa alveolo di estrazione come unità sperimentale per tutte le analisi.
    2. Confrontare il tempo di estrazione, la densità minerale ossea (BMD) e il rapporto BV/TV tra i gruppi utilizzando un test t di Student a due code non appaiato t test. Confrontare l'incidenza di fratture radicolari e difetti della parete alveolare mediante il test esatto di Fisher.
    3. Indicare la significatività statistica come segue: *, p < 0.05; **, p < 0,01; e ***, p < 0,001. Utilizzare "ns" per indicare l'assenza di differenza statisticamente significativa tra i due gruppi.

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Risultati

Le caratteristiche anatomiche rilevanti per l'estrazione del primo molare mandibolare sono illustrate nella Figura 1, mentre i metodi estrattivi convenzionale e modificato sono mostrati schematicamente nelle Figure 2A,B. Immagini rappresentative dell'ago preparato e della pinzetta oftalmica dentata, dei siti estrattivi freschi e del primo molare mandibolare estratto sono mostrate nelle Figure 2C–G. ...

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Discussione

L'instaurazione con successo del TSHM richiede la rimozione completa del dente preservando al contempo l'architettura alveolare circostante, poiché lesioni correlate all'estrazione possono compromettere la successiva rigenerazione ossea16. Pertanto, la riproducibilità della procedura di estrazione rappresenta un determinante critico dell'affidabilità del modello17. In questo studio, un approccio modificato per l'estrazione del primo molare mandibolare mediante pinze è stato...

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Dichiarazioni

Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interessi.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato sostenuto dal National Natural Science Foundation of China (Grant No. 82571084) e dal programma scientifico e tecnologico della provincia di Sichuan (Grant No. 2024JDKXJ0001).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Aghi per siringa 25 GBeyotimeFS802-30pcsAghi per siringa monouso utilizzati per il retrattore orale e il pre-allentamento facoltativo del legamento parodontale
Soluzione di paraformaldeide al 4%SolarbioP1110Soluzione di paraformaldeide al 4% utilizzata per la fissazione del campione
Etilene al 75%Ouse Medical Devices StoreN/AEtilene di grado medico al 75% utilizzato per la disinfezione superficiale
Topi C57BL/6Charles River213Topi maschi C57BL/6 di 8 settimane, del peso di 22–29 g
CarprofeneSolarbioC5350Analgesico postoperatorio somministrato per via sottocutanea a 5 mg/kg
Palline di cotoneOuning Medical DevicesN/APalline di cotone sterili utilizzate per la pulizia orale e l’emostasi
CTAn v1.18.4.0+SkyScanN/ASoftware utilizzato per l’analisi delle immagini μCT
DataViewer v1.5.6.2SkyScanN/ASoftware utilizzato per visualizzare ed esportare le immagini μCT ricostruite
Guaine per ditaLeSu OfficeMEKU-1/2/3BGuaine per dita utilizzate per proteggere il pollice durante l’estrazione
Tavola in polistirolo espansoDongguan Lijianglong Industrial Co., Ltd.N/ATavola in polistirolo espanso utilizzata come piattaforma operatoria e di fissazione
Dieta in gelReadyDietechJ10001Dieta postoperatoria fornita sul fondo della gabbia per 3 giorni, quando utilizzata
GraphPad Prism v10.1.2GraphPadRRID: SCR_002798Software utilizzato per l’analisi statistica e la generazione di grafici
Lampada frontaleBazhou Pengen Protective Equipment FactoryN/ALampada frontale utilizzata per illuminare il campo operatorio
Pad riscaldanteShijiazhuang Jianuan Electrical Appliances Co., Ltd.N/APad riscaldante preriscaldato a circa 38 °C per il recupero postoperatorio
Fantoccio di idrossiapatiteQRMQRM-70127Fantoccio di calibrazione utilizzato per convertire i valori di attenuazione TC in densità minerale ossea
Dispositivo di ingrandimentoOlympus CorporationSZX10Dispositivo utilizzato per ispezionare le punte delle pinzette dentate e l’alveolo estrattivo con ingrandimento
MascherinaSenlun Medical Devices Specialty StoreN/AMascherina chirurgica
Scanner di microtomografia computerizzataBruker SkyScanSkyScan 1276Scanner μCT utilizzato a 80 kV, 500 μA e risoluzione del voxel di 10 μm
Mimics Research v21.0MaterialiseRRID: SCR_015802Software utilizzato per la ricostruzione tridimensionale
Sodio pentobarbitaleSigma-AldrichP3761Sale di sodio del pentobarbital utilizzato come soluzione anestetica al 1%
Soluzione salina tamponata al fosfatoSolarbioP1010Polvere di soluzione salina tamponata al fosfato 0,01 M, pH 7,2–7,4
Soluzione antisettica di iodopovidoneBelkon Pharmacy Flagship StoreN/ASoluzione di iodopovidone utilizzata per la disinfezione addominale
ElasterFoshan Puli Rubber Products FactoryN/AElaster utilizzati per assemblare il retrattore orale
Soluzione salinaThermo FisherBR0053GCompresse saline utilizzate per preparare la soluzione per la pulizia orale
Dieta standard in mangimeJiangsu Xietong Pharmaceutical and Biotechnology Engineering Co., Ltd.XTC01WC-001Mangime standard utilizzato per l’alloggio abituale e ammorbidito per l’alimentazione postoperatoria
Sterilizzatore a vaporeStruttura istituzionaleN/AAttrezzatura utilizzata per sterilizzare le pinzette dentate e la soluzione salina
Tampone di cotone sterileKangbailai Medical Devices StoreN/ATampone di cotone sterile monouso
Guanti steriliSenlun Medical Devices Specialty StoreN/AGuanti sterili in lattice
Tessuto non tessuto sterileShandong Xinhua Infection Control Supplies Hangzhou StoreN/ATessuto non tessuto sterile utilizzato per coprire la superficie operatoria e il pad riscaldante
Cuffia chirurgica sterileSenlun Medical Devices Specialty StoreN/ACuffia chirurgica sterile
Tenuta chirurgicaSenlun Medical Devices Specialty StoreN/ATenuta chirurgica pulita indossata durante la procedura
Nastro adesivoThermo Fisher15947Nastro adesivo utilizzato per fissare gli arti del topo
Pinzette oftalmiche dentateBeyotimeFS229Pinze oftalmiche dentate utilizzate come pinze dentali
Unguento oftalmico veterinarioDechra Veterinary Products143-16Unguento oftalmico applicato dopo l’anestesia per prevenire l’essiccazione della cornea

Riferimenti

  1. Chavez MB, et al. Bone sialoprotein is critical for alveolar bone healing in mice. J Dent Res. 2023;102(2):187-196.
  2. Guan B, Liu L, Liu Y. Application and characterisation of four genetically engineered animal models (mouse/zebrafish/rhesus monkey/drosophila) in acute myeloid leukemia. Gene. 2025;963:149607.
  3. Varshney GK, Burgess SM. Crispr-based functional genomics tools in vertebrate models. Exp Mol Med. 2025;57(7):1355-1372.
  4. Phanrungsuwan A, Donnelly B, Millán JL, Foster BL. Targeted alkaline phosphatase therapy enhances alveolar bone healing in X-linked hypophosphatemia in mice. J Periodontal Res. 2026;61(3):309-322. doi:10.1111/jre.70044.
  5. Mohamed FF, et al. Dentoalveolar defects and impaired alveolar bone healing in a neural crest-directed conditional knockout mouse model of hypophosphatasia. Bone. 2025;198:117538.
  6. Oka H, et al. Subset of the periodontal ligament expressing leptin receptor contributes to part of hard tissue-forming cells. Sci Rep. 2023;13(1):3442.
  7. Chen S, Rittel D, Shemtov Yona K. The normal stiffness of the edentulous alveolar process. Bone Rep. 2021;14:101066.
  8. Lungová V, et al. Tooth-bone morphogenesis during postnatal stages of mouse first molar development. J Anat. 2011;218(6):699-716.
  9. Iwama H, et al. Acellular extrinsic fiber cementum is invariably present in the superficial layer of apical cementum in mouse molar. J Histochem Cytochem. 2024;72(2):109-120.
  10. Hadad H, et al. Rodents as an animal model for studying tooth extraction-related medication-related osteonecrosis of the jaw: Assessment of outcomes. Arch Oral Biol. 2024;159:105875.
  11. Mouraret S, et al. A pre-clinical murine model of oral implant osseointegration. Bone. 2014;58:177-184.
  12. Yu F, Liu L, Xia L, Fang B. Establishment of a C57BL/6 mandibular critical-size bone defect model. J Craniofac Surg. 2021;32(7):2562-2565.
  13. Yu C, Yu F, Li F, Ye L. The establishment of a murine mandibular molar extraction socket healing model. J Vis Exp. 2023;(191). doi:10.3791/64855.
  14. University of Michigan Unit for Laboratory Animal Medicine. Guidelines on anesthesia and analgesia in mice. Updated January 23, 2026. Available at: https://az.research.umich.edu/animalcare/guidelines/guidelines-anesthesia-and-analgesia-mice/. Accessed August 5, 2026.
  15. Qiu Y, et al. Investigation of the furcation morphology of permanent mandibular first molars by using micro-computed tomography. BMC Oral Health. 2024;24(1):1150.
  16. Vieira AE, et al. Intramembranous bone healing process subsequent to tooth extraction in mice: Micro-computed tomography, histomorphometric and molecular characterization. PLoS One. 2015;10(5):e0128021.
  17. Jiang J, Mou J, Wang S, Liu J. Protocol for establishing a mouse model of bilateral maxillary first molar extraction to study alveolar bone healing. STAR Protoc. 2026;7(1):104366.
  18. Liang B, Zhang W, Xue Y. Observation and analysis of tooth extraction wound healing process of maxillary first molars in C57BL/6 mice. Chin J Pract Stomatol. 2019;12(232):e6.

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