Non invasive di visualizzazione 3D con sub-micron Risoluzione Utilizzando sincrotrone a raggi-X, la tomografia

Summary

Abbiamo usato sincrotrone tomografia a raggi X alla European Synchrotron Radiation Facility (ESRF) a non invasivo produrre set di dati 3D tomografiche con un pixel-risoluzione di 0.7μm. Utilizzando il software di rendering del volume, questo permette la ricostruzione di strutture interne allo stato naturale, senza gli artefatti prodotti dal sezionamento istologico.

Abstract

Poco si sa circa l'organizzazione interna di molte micro-artropodi corpo con dimensioni inferiori a 1 mm. Le ragioni di che sono le dimensioni ridotte e la cuticola dura che rende difficile utilizzare protocolli di istologia classica. Inoltre, sezionamento istologici distrugge il campione e non può quindi essere utilizzato per materiale unico. Quindi, un metodo non distruttivo è auspicabile che consente di visualizzare all'interno di piccoli campioni, senza la necessità di sezionamento.

Abbiamo usato sincrotrone tomografia a raggi X alla European Synchrotron Radiation Facility (ESRF) a Grenoble (Francia) per non invasivo produrre set di dati 3D tomografiche con un pixel-risoluzione di 0.7μm. Utilizzando il software di rendering del volume, questo ci permette di ricostruire l'organizzazione interna nel suo stato naturale, senza gli artefatti prodotti dal sezionamento istologico. Queste data può essere utilizzato per la morfologia quantitativa, punti di riferimento, o per la visualizzazione di film d'animazione per capire la struttura delle parti del corpo nascoste ed a seguire sistemi di organi o tessuti completi attraverso i campioni.

Protocol

Animali utilizzati in questo studio

I campioni dell'acaro partenogenetica oribatid Archegozetes longisetosus (Acari, Oribatida) sono state prese dalla nostra cultura di laboratorio. La cultura si sviluppa su un intonaco di Parigi / mix carbone (9:1) in vasi di plastica, nel buio costante a 20-23 ° C con circa il 90% di umidità dell'aria.

Preparazione del campione

1. I campioni sono stati prelevati dalla cultura, pulita con un pennello fine e collocato in una miscela 06:03:01 del 80% etanolo, 35% di formaldeide e il 100% di acido acetico per 24 ore.
2. Successivamente, i campioni sono stati....

Discussion

In questa presentazione, ci siamo concentrati sulla visualizzazione 3D dell'anatomia interna di un chelicerate micro-artropodi. I raggi X di sincrotrone misurazioni permettono un pixel di risoluzione fino a 0.3μm, a seconda delle dimensioni del campione. Qui, abbiamo dimostrato con dati 0.7μm pixel di risoluzione. In generale, sincrotrone tomografia a raggi X può essere utile per analizzare piccoli materiali biologici (o tessuti) a basso raggi X attenuazione. La risoluzione raggiunge quasi quella della microscopia ottica convenzionale. .......