1. Scruffing
I topi sono più spesso trattenuti usando la tecnica di scruffing, ma anche i giovani ratti possono essere trattenuti con questo metodo. I ratti adulti sono più difficili da trattenere con questa tecnica a causa di un collo più muscoloso, una ridotta quantità di pelle sciolta e un'avversione a questo metodo.

Figura 1: Metodo di ritenuta con una e due mani per i topi
2. Guanti
Ci sono una varietà di guanti disponibili per i gestori da indossare per la protezione dai morsi di ratto. Sono generalmente inadatti al lavoro con i topi a causa della perdita di destrezza. Spesso, gli svantaggi di molti tipi di guanti superano i vantaggi.
3. Contenimento del corpo

Figura 2: Presa T-rex e metodo incrociato degli arch per trattenere i ratti
4. Dispositivi di ritenuta

Figura 3: Dispositivo di ritenuta in stile Broome

Figura 4: Restrainer per roditori a fondo piatto

Figura 5: Dispositivo di ritenuta del tubo

Figura 6: Restrainer flessibile
5. Metodi di contenimento per procedure tecniche specifiche
Fonte: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Università di Notre Dame, IN
È stato dimostrato che anche una minima manipolazione di topi e ratti è stressante per gli animali. La manipolazione per il cambio di gabbia e altre procedure non invasive provoca un aumento della frequenza cardiaca, della pressione sanguigna e di altri parametri fisiologici, come i livelli sierici di corticosterone. Le fluttuazioni possono continuare fino a diverse ore. I metodi di contenzione richiesti per le iniezioni e i prelievi di sangue causano anche cambiamenti fisiologici che possono potenzialmente influenzare i dati scientifici. La formazione nella corretta gestione di topi e ratti è necessaria per ridurre al minimo gli effetti sugli animali. 1 Topi e ratti possono essere trattenuti manualmente con dispositivi di ritenuta o con agenti chimici. I metodi manuali e l'uso di dispositivi di ritenuta sono trattati in questo manoscritto. Tutti i metodi di contenimento includono il processo di sollevamento degli animali dalla loro gabbia domestica.
1. Scruffing
I topi sono più spesso trattenuti usando la tecnica di scruffing, ma anche i giovani ratti possono essere trattenuti con questo metodo. I ratti adulti sono più difficili da trattenere con questa tecnica a causa di un collo più muscoloso, una ridotta quantità di pelle sciolta e un'avversione a questo metodo.

Figura 1: Metodo di ritenuta con una e due mani per i topi
2. Guanti
Ci sono una varietà di guanti disponibili per i gestori da indossare per la protezione dai morsi di ratto. Sono generalmente inadatti al lavoro con i topi a causa della perdita di destrezza. Spesso, gli svantaggi di molti tipi di guanti superano i vantaggi.
3. Contenimento del corpo

Figura 2: Presa T-rex e metodo incrociato degli arch per trattenere i ratti
4. Dispositivi di ritenuta

Figura 3: Dispositivo di ritenuta in stile Broome

Figura 4: Restrainer per roditori a fondo piatto

Figura 5: Dispositivo di ritenuta del tubo

Figura 6: Restrainer flessibile
5. Metodi di contenimento per procedure tecniche specifiche
I roditori sono organismi modello ampiamente utilizzati per indagare su diverse questioni scientifiche ed è stato dimostrato che anche una manipolazione minima è stressante per questi animali.
La manipolazione per attività semplici come il cambio della gabbia può causare un aumento della frequenza cardiaca, della pressione sanguigna e dei livelli sierici di corticosterone e queste fluttuazioni possono continuare per diverse ore. I metodi di contenzione necessari per le comuni procedure di iniezione e prelievo di sangue possono anche causare cambiamenti fisiologici, che possono potenzialmente influenzare i dati scientifici. Pertanto, è necessaria una formazione per una corretta gestione di topi e ratti per ridurre al minimo questi effetti sugli animali.
In questo video, esamineremo prima le tecniche di base per la gestione dei roditori, quindi discuteremo le procedure di contenzione dei roditori, comprese le tecniche manuali e i metodi che prevedono l'uso di dispositivi di contenzione.
Iniziamo discutendo le basi della gestione dei roditori. Uno dei metodi più comuni per spostare un topo adulto o un ratto è sollevare l'animale per la coda. Durante questa operazione, è imperativo che la coda sia afferrata alla base vicino alla groppa. Se l'animale viene sollevato per l'estremità della coda, la pelle può essere strappata a causa del peso corporeo e può portare a una lesione con conseguente amputazione della coda. È importante sottolineare che lo spostamento di un animale da un luogo all'altro dovrebbe essere fatto in modo rapido e costante. Sospendere l'animale in aria per un certo periodo di tempo non solo causerà angoscia, ma causerà anche la torsione o la lotta dell'animale, causando eventualmente danni alla coda. Inoltre, il conduttore non dovrebbe mettere una mano sotto l'animale, perché potrebbe cercare di afferrarlo per sicurezza, provocando un morso.
Un altro metodo per maneggiare i roditori adulti è usare il forcipe. I tipi di pinze comunemente usati sono le pinze a medicazione lunga o le pinze per la lingua con tubi in gomma, plastica o silicone posizionati sopra le estremità per fornire un cuscino. Il forcipe può afferrare il topo sia alla collottola che alla base della coda. L'uso di pinze riduce al minimo la contaminazione incrociata da animale ad animale ed è più rapido e meno costoso rispetto alla sostituzione dei guanti tra una gabbia e l'altra. I principianti dovranno essere addestrati su quanto strettamente afferrare i topi con il forcipe, specialmente alla collottola in quanto potrebbe interferire con la respirazione. Quando si utilizza la pinza sulla coda, è necessario prestare attenzione a posizionare la pinza vicino alla base della coda per evitare lesioni. Ricordati di conservarli a faccia in giù in etanolo al 70% tra la manipolazione di diversi gruppi di animali.
Inoltre, si possono usare tubi fatti di un materiale non poroso per trasferire gli animali. Questi tubi possono essere aggiunti a una gabbia come luogo in cui l'animale può ripararsi o cercare un rifugio sicuro. La maggior parte dei topi o dei ratti entrerebbe volentieri nei tubi quando la loro gabbia viene aperta, oppure possono essere facilmente guidati nel tubo. Quando l'animale è all'interno, copri le estremità aperte con il palmo della mano e le dita. Successivamente, per incoraggiare l'animale ad andarsene, inclinare delicatamente il tubo verso l'alto nella nuova gabbia. Gli animali sono facilmente condizionati a questo metodo di cambio della gabbia, rendendo questo processo semplice e veloce per spostare gli animali da un luogo all'altro.
Alcune istituzioni preferiscono che gli animali, in particolare i ratti, vengano sollevati dal loro corpo, anche durante la manipolazione di routine. I ratti adulti vengono afferrati delicatamente intorno al torace, sollevati e rapidamente messi in un'altra gabbia. È importante che gli animali siano abituati a questo metodo di manipolazione fin dalla tenera età. Quando si lavora con ratti giovani, mettere una mano sulla schiena del ratto lo farà saltare nel palmo del conduttore permettendogli di essere afferrato. Potrebbe essere necessaria una seconda mano per evitare che il topo si dimeni dalla presa.
Quando si cambiano gabbie con topi o ratti neonati, è spesso necessario rimuoverli mantenendo intatto il nido. Usa due mani per raccogliere il nido e i cuccioli dal fondo della gabbia in una nuova gabbia. Tieni le dita vicine per evitare di far cadere i cuccioli. Una volta che il nido è stato spostato in una nuova gabbia, è importante verificare che tutti i cuccioli siano presenti. In alternativa, è possibile utilizzare una paletta di plastica per spostare i roditori neonati nei loro nidi. Mentre lo fai, è importante posizionare la mano sopra la parte superiore della paletta per evitare che i neonati si muovano o saltino fuori. Rispetto alla gestione individuale dei cuccioli, raccogliere l'intero nido è meno angosciante sia per i cuccioli che per le madri.
Ora che abbiamo discusso le basi della gestione dei roditori, approfondiamo le procedure dettagliate per la contenzione dei roditori. Per prima cosa illustreremo come trattenere manualmente questi animali. I topi e i ratti giovani possono essere trattenuti usando la tecnica a una mano o a due mani. Tuttavia, per i ratti adulti, la contenzione di tutto il corpo utilizzando l'impugnatura T-rex o il metodo incrociato degli arti anteriori sono le tecniche preferite.
Cominciamo imparando il metodo di contenzione a due mani. Per prima cosa, posiziona l'animale su una superficie che può afferrare, come il coperchio della barra metallica. Con la mano dominante, tieni la coda alla base e tira delicatamente il mouse all'indietro. Questo fa sì che l'animale si aggrappi alla superficie e permetta al suo corpo di essere allungato. Quindi, blocca delicatamente il roditore con l'indice e il pollice non dominanti posizionati alla base del cranio e afferra la pelle flaccida sul collo per sollevare l'animale. Usa le dita rimanenti per stabilizzare l'animale con la schiena contro la base del pollice. Puoi fissare i quarti posteriori bloccando la coda con l'anulare contro il palmo della mano.
Per il metodo di contenzione con una sola mano, posizionare nuovamente l'animale su una superficie che possa afferrare. Tieni la coda tra il terzo e il quarto dito della mano non dominante e applica una leggera trazione all'indietro. Con l'indice e il pollice della stessa mano, appunta il roditore sulle spalle. Fai scorrere delicatamente il pollice e l'indice in avanti e afferra la pelle flaccida al collo e solleva l'animale. Usa il dito medio per stabilizzare l'animale lungo la schiena appuntando la pelle dorsale contro la base del pollice.
Il terzo metodo di contenzione di cui parleremo è l'impugnatura T-rex, un metodo di contenzione a due mani per i ratti. Per prima cosa, posiziona il topo su una superficie solida, come un tappetino, che possa afferrare. Tenendo la base della coda con una mano, metti l'altra mano sopra la spalla del topo con l'indice e il medio divisi su entrambi i lati. Questo per limitare il movimento laterale della testa. Una volta stabilizzata la testa, circondare il corpo dietro le zampe anteriori con il medio e l'anulare e il pollice. Evitare di comprimere il torace in modo che non comprometta la respirazione dell'animale. Infine, stabilizza la coda e i quarti posteriori afferrando la base della coda SENZA aggrapparti alle zampe posteriori, se prevedi di somministrare un gavagage orale; o CON l'aggrapparsi alle zampe posteriori, se l'intenzione è quella di iniettare l'animale.
Infine, per trattenere un ratto usando il metodo incrociato degli arti anteriori, posiziona l'animale su una superficie che può afferrare. Quindi, con la mano dominante, tieni la coda alla base e applica una leggera trazione all'indietro in modo che il corpo dell'animale si allunghi. Successivamente, con l'altra mano, afferra l'animale direttamente dietro le spalle, con le dita da un lato e il pollice dall'altro lato del petto, e fai scorrere la mano in avanti. Questo movimento costringerà le zampe anteriori dell'animale a incrociarsi sotto il mento, creando una barriera fisica che impedisce all'animale di muovere la testa verso il basso. Fare attenzione a evitare di comprimere il torace, che porterà a difficoltà respiratorie.
Ora che abbiamo esaminato le tecniche di contenzione manuale, impariamo come trattenere i roditori utilizzando dispositivi specializzati.
Il primo dispositivo che impareremo a conoscere è il dispositivo di ritenuta in stile Broome. Ha una fessura che corre lungo l'intera lunghezza del dispositivo e un nasello in plastica, che viene inserito per tenere l'animale in posizione. Inizia allentando la vite per rimuovere il nasello. Quindi, orientare il tubo di ritenuta in modo che la fessura sia rivolta verso l'alto. Afferrare l'animale alla base della coda e tirarlo delicatamente nel dispositivo di ritenuta, prima i quarti posteriori. Una volta che l'animale è dentro, fai scorrere nuovamente il nasello di plastica nel tubo per evitare che si apra. Posizionare il nasello in modo che il naso dell'animale sia centrato nell'apertura. Non posizionarlo così strettamente che l'animale non possa respirare.
Un altro esempio di dispositivo di ritenuta è il sistema di ritenuta per roditori a fondo piatto, che è un mezzo cilindro con aperture che consentono l'accesso dall'alto e dal basso del dispositivo. Dispone inoltre di fessure in cui è possibile inserire un cancello di plastica rigida per tenere l'animale in posizione. Per utilizzare questo contenitore, afferra il roditore per la base della coda con la mano dominante e posizionalo su una superficie liscia. Usando l'altra mano, tieni il tubo di ritenuta a fondo piatto in modo che l'estremità aperta sia alla testa dell'animale a 45? rispetto alla superficie. Posiziona il tubo sopra la testa dell'animale e picchietta immediatamente la groppa per evitare che l'animale indietreggi. Una volta inserito nel dispositivo, far scorrere il cancello di plastica nell'apposita fessura per fissare la posizione dell'animale.
Il terzo tipo di dispositivo di cui parleremo sono i sistemi di ritenuta per tubi. Si tratta di cilindri in plexiglass con un'estremità chiusa contenente fori per la circolazione dell'aria e una fessura all'estremità aperta. Per utilizzare un sistema di ritenuta a tubo, afferrare l'animale e posizionarlo su una superficie liscia. Quindi, posizionare l'estremità aperta del tubo sulla testa dell'animale a 45? angolo. Non appena il roditore entra nel tubo, picchiettare la groppa per evitare che si accumuli. Infine, occludi l'apertura imbottindo un grande guanto in lattice, che afferrerà la superficie in plexiglass e impedirà all'animale di uscire dal tubo.
Infine, discuteremo come utilizzare i sistemi di ritenuta flessibili, che sono coni di plastica flessibili usa e getta disponibili in diverse dimensioni. La selezione di un cono dipende dalle dimensioni dell'animale. Idealmente, dovrebbe essere abbastanza lungo da estendersi di 2-3 pollici oltre la groppa dell'animale. Come i metodi precedenti, posizionare l'animale su una superficie liscia e posizionare il cono di ritenuta a 45? sopra la testa dell'animale. Non appena l'animale entra nel cono, afferra l'estremità aperta e sigillala per costringere l'animale alla fine. Fissare l'apertura piegando la plastica su un lato della coda e applicando una clip per legante sulla plastica piegata, facendo attenzione a evitare di bloccare la coda o la pelle.
Dopo aver discusso le basi della manipolazione e le diverse tecniche di contenzione, esaminiamo il motivo per cui avere una comprensione di queste procedure è necessario per qualsiasi scienziato in vivo.
La conoscenza e la logica alla base di queste procedure di manipolazione di base sono al centro del mantenimento della salute dell'animale. Dal momento in cui nascono, gli animali vengono gestiti per semplici attività quotidiane come la pesatura, l'ispezione e il cambio della gabbia, che dovrebbero essere eseguite indipendentemente dall'obiettivo scientifico.
Le procedure di contenimento sono utili anche per la marcatura. Ad esempio, per eseguire procedure come il pugno all'orecchio, l'animale deve essere trattenuto con la collottola. D'altra parte, quando si inserisce un microchip nei ratti, è necessario utilizzare un dispositivo di contenzione in modo che possano essere etichettati in modo permanente.
Infine, i metodi di contenzione manuale vengono utilizzati per le comuni procedure di iniezione come la somministrazione sottocutanea e intraperitoneale. E la conoscenza dei dispositivi di contenzione è utile quando si esegue la somministrazione endovenosa, che richiede un movimento minimo dell'animale durante l'iniezione.
Hai appena visto l'introduzione di JoVE alle tecniche di base di manipolazione e contenzione per i roditori. Queste procedure richiedono un tocco sicuro e deciso, ma delicato. Gli approcci incerti possono provocare morsi da parte del conduttore, mentre una manipolazione aggressiva può causare lesioni al roditore. Pertanto, è importante apprendere a fondo queste tecniche e trovare un equilibrio tra una presa decisa ma delicata. Come sempre, grazie per la visione!
La manipolazione di routine per il cambio delle gabbie e le procedure tecniche sono causa di stress per gli animali da esperimento. Sebbene questo tipo di stress non sia una minaccia per il benessere generale dell'animale, può causare fluttuazioni nei parametri fisiologici che possono avere un effetto negativo sui dati della ricerca. L'uso di personale qualificato, tecniche e attrezzature adeguate può mitigare parte dello stress.
Chapters in this video
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Overview
1:13
Basics of Rodent Handling
5:09
Manual Restraining Methods
8:37
Rodent Restraint Devices
11:55
Applications
13:02
Summary
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