La scelta corretta degli anestetici per la chirurgia e altre procedure potenzialmente dolorose deve essere determinata da un veterinario. Questo si basa su numerosi aspetti, tra cui l'estensione e la durata della procedura, la specie e il ceppo, l'età e lo stato fisiologico dell'animale.
Gli anestetici sono disponibili come inalanti o iniettabili. L'anestesia chirurgica può essere eseguita utilizzando una combinazione di anestetici iniettabili e inalanti. 2
1. Induzione dell'anestesia inalante
L'anestesia inalante comprende isoflurano, sevoflurano e desflurano, con l'isoflurano usato più comunemente. Questi anestetici sono usati più spesso perché, con loro, è più facile controllare la profondità dell'anestesia. L'induzione dell'anestesia mediante anestetici per inalazione può essere effettuata con un barattolo a campana o una camera di induzione montata su un vaporizzatore di precisione.
2. Induzione dell'anestesia con anestetici iniettabili
Gli anestetici iniettabili sono principalmente una miscela di ketamina e sedativi o rilassanti muscolari.
Le combinazioni comuni sono: 1) Rodent Cocktail, che consiste di ketamina (100 mg / ml), xilazina (20 mg / ml), acepromazina (10 mg / ml) e soluzione salina sterile (0,9% NaCl); 2) ketamina / xilazina 2: 1, che consiste di ketamina (100 mg / ml), xilazina (20 mg / ml) e soluzione salina sterile (0,9% NaCl); e 3) ketamina / xilazina Mouse Mix, che consiste di ketamina (100 mg / ml), xilazina (20 mg / ml) e soluzione salina sterile (0,9% NaCl). Quando si utilizza la combinazione di ketamina / xilazina, il potenziamento deve essere fatto solo con ketamina, non con xilazina, a causa dell'emivita di questi farmaci.
La combinazione di ketamina con sedativi e/o miorilassanti deve essere preparata come soluzione stock da cui possono essere prelevate dosi individuali. Gli agenti devono essere misurati con precisione e diluiti con soluzione salina sterile per garantire che agli animali vengano somministrate dosi adeguate. Poiché la ketamina è una sostanza controllata, la quantità utilizzata dalle bottiglie deve essere annotata su un "Registro dei farmaci controllati" e le miscele devono avere singoli "Registri delle sostanze controllate". Quando si preparano le miscele, aggiungere lentamente la ketamina alla bottiglia, poiché tende a schiumare se iniettata con forza. Per la miscela viene utilizzato un flacone sterile da 20 ml con tappo. Le bottiglie devono essere adeguatamente etichettate con il nome dei composti, la data miscelata, la data di scadenza, il numero di lotto di ketamina (in quanto si tratta di una sostanza controllata) e il dosaggio suggerito. La data di scadenza può essere determinata dalla data di scadenza dell'ingrediente (dipende dalle regole / linee guida della struttura / stato). Per una registrazione accurata della ketamina, sia la bottiglia vuota che la bottiglia piena devono essere pesate. Quindi, i pesi devono essere registrati sull'etichetta della miscela e sul singolo foglio di registro della sostanza controllata che viene preparato per ogni bottiglia. Conservare le miscele di ketamina in un'area buia e a temperatura controllata per mantenere la potenza.
3. Valutazione dell'anestesia
La profondità anestetica può essere valutata testando la risposta a vari stimoli. Il movimento volontario deriverà da stimoli fisici del corpo. Vedere la Tabella 1 per un elenco dei metodi fisici utilizzati per la valutazione della profondità anestetica.
| Metodo | Procedimento | Risposta |
| Pizzicamento della dita dei dita dei | Estendere la gamba e isolare la cinghia tra le dita dei piedi. Quest'area viene saldamente pizzicata usando le unghie o la pinza atraumatica. | Un riflesso positivo è indicato dalla retrazione della gamba o dal ritiro del piede. L'animale non è su un piano chirurgico di anestesia se c'è movimento della gamba o del corpo, vocalizzazione o marcato aumento delle respirazioni. |
| Pizzico di coda | La punta della coda viene pizzicata usando le dita o la pinna atraumatica. | Una reazione positiva è indicata da contrazioni o movimenti della coda. L'animale non è su un piano chirurgico di anestesia se c'è movimento della coda, vocalizzazione o marcato aumento delle respirazioni. |
| Pizzico all'orecchio | Usando le dita o la pinna atraumatica, pizzicare la punta della pinna. | Una reazione positiva è scuotere la testa o il movimento dei baffi in avanti. Se c'è movimento della testa, baffi, vocalizzazione o marcato aumento delle respirazioni, l'animale non è su un piano chirurgico di anestesia. |
| Riflesso palpebrale | Usando la punta delle dita, toccare il canthus mediale (angolo interno) dell'occhio. | Un riflesso positivo è indicato da un battito di ciglia in risposta al tocco delle palpebre. Se c'è movimento delle palpebre, baffi o marcato aumento delle respirazioni, l'animale non è su un piano chirurgico di anestesia. |
| Riflesso corneale | Utilizzando un applicatore con punta di cotone, toccare delicatamente la cornea (bulbo oculare). | Una risposta positiva è indicata da un battito di ciglia. Se c'è movimento delle palpebre, baffi o marcato aumento delle respirazioni, l'animale non si trova su un piano sufficientemente profondo di anestesia chirurgica. |
Tabella 1. Metodi di stimoli fisici per la valutazione della profondità anestetica. 2
Dovrebbero essere utilizzati anche indicatori fisiologici come frequenza cardiaca, frequenza respiratoria, pressione sanguigna, colore delle mucose e tempo di ricarica capillare. Mentre le osservazioni generali possono essere utili per rilevare i cambiamenti nella frequenza respiratoria degli animali, per utilizzare la frequenza cardiaca o la pressione sanguigna per la valutazione della profondità, sono necessarie attrezzature specializzate. Se è disponibile un elettrocardiografo, è possibile misurare la velocità e la forza dei battiti cardiaci. Per misurare la pressione sanguigna, ci sono una varietà di dispositivi che sono montati sopra la coda o anche su tutto il corpo. Gli stimoli fisici descritti nella Tabella 1 causeranno un aumento di tutti e tre questi parametri.
Il colore delle mucose, degli occhi, delle orecchie, della bocca, del naso, dell'ano e, in misura minore, delle zampe e della coda sono osservati per i cambiamenti. Le aree dovrebbero essere rosa, indicando un'adeguata respirazione e funzione cardiaca. Quando l'animale passa all'anestesia allo stadio IV, le respirazioni cessano, con conseguente cianosi - indicata da un colore blu o grigio - alle mucose e alla pelle circostante.
Il tempo di ricarica capillare è definito come la quantità di tempo impiegata affinché il colore ritorni a un letto capillare esterno dopo che è stato sbollentato dall'applicazione di pressione sull'area. Un bastoncino applicatore o un dito viene premuto sulle gengive, sulla pinna o sui letti ungueale degli animali anestetizzati. Il numero di secondi necessari affinché l'area sbollentata ritorni a un colore rosa non deve essere superiore a 1-2 secondi. Un tempo di ricarica prolungato suggerisce una riduzione della frequenza cardiaca o della forza delle contrazioni cardiache, indicando che l'animale potrebbe essere troppo profondamente anestetizzato e vicino alla morte.
È importante utilizzare diversi parametri per valutare la profondità anestetica. L'uso dello stesso dito o orecchio per pizzichi ripetuti desensibilizzerà l'area e la risposta sarà repressa e non fornirà una valutazione accurata della profondità dell'anestetico. Utilizzare siti alternativi per le valutazioni del pizzico delle dita dei dita e dell'orecchio. La profondità dell'anestetico deve essere rivalutata ogni 10-30 minuti durante l'intervento chirurgico. 2
Gli studi hanno dimostrato che ci sono cambiamenti cardiorespiratori in un animale anestetizzato. Mentre anestetizzati con farmaci iniettabili, gli animali sperimentano una frequenza respiratoria stabile; tuttavia, dimostrano variabilità nella gittata cardiaca. La risposta agli anestetici iniettabili è stata segnalata per variare notevolmente tra i diversi ceppi, quindi è difficile standardizzare il dosaggio. 7 Gli agenti inalanti tendono a diminuire la frequenza respiratoria ma hanno un impatto minore sul sistema cardiovascolare. Poiché il dosaggio dell'anestesia inalante è facilmente regolabile per tutta la durata della procedura, è spesso il metodo preferito.
Fonte: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Università di Notre Dame, IN
La Guida per la cura e l'uso degli animali da lab…
La scelta corretta degli anestetici per la chirurgia e altre procedure potenzialmente dolorose deve essere determinata da un veterinario. Questo si basa su numerosi aspetti, tra cui l'estensione e la durata della procedura, la specie e il ceppo, l'età e lo stato fisiologico dell'animale.
Gli anestetici sono disponibili come inalanti o iniettabili. L'anestesia chirurgica può essere eseguita utilizzando una combinazione di anestetici iniettabili e inalanti. 2
1. Induzione dell'anestesia inalante
L'anestesia inalante comprende isoflurano, sevoflurano e desflurano, con l'isoflurano usato più comunemente. Questi anestetici sono usati più spesso perché, con loro, è più facile controllare la profondità dell'anestesia. L'induzione dell'anestesia mediante anestetici per inalazione può essere effettuata con un barattolo a campana o una camera di induzione montata su un vaporizzatore di precisione.
2. Induzione dell'anestesia con anestetici iniettabili
Gli anestetici iniettabili sono principalmente una miscela di ketamina e sedativi o rilassanti muscolari.
Le combinazioni comuni sono: 1) Rodent Cocktail, che consiste di ketamina (100 mg / ml), xilazina (20 mg / ml), acepromazina (10 mg / ml) e soluzione salina sterile (0,9% NaCl); 2) ketamina / xilazina 2: 1, che consiste di ketamina (100 mg / ml), xilazina (20 mg / ml) e soluzione salina sterile (0,9% NaCl); e 3) ketamina / xilazina Mouse Mix, che consiste di ketamina (100 mg / ml), xilazina (20 mg / ml) e soluzione salina sterile (0,9% NaCl). Quando si utilizza la combinazione di ketamina / xilazina, il potenziamento deve essere fatto solo con ketamina, non con xilazina, a causa dell'emivita di questi farmaci.
La combinazione di ketamina con sedativi e/o miorilassanti deve essere preparata come soluzione stock da cui possono essere prelevate dosi individuali. Gli agenti devono essere misurati con precisione e diluiti con soluzione salina sterile per garantire che agli animali vengano somministrate dosi adeguate. Poiché la ketamina è una sostanza controllata, la quantità utilizzata dalle bottiglie deve essere annotata su un "Registro dei farmaci controllati" e le miscele devono avere singoli "Registri delle sostanze controllate". Quando si preparano le miscele, aggiungere lentamente la ketamina alla bottiglia, poiché tende a schiumare se iniettata con forza. Per la miscela viene utilizzato un flacone sterile da 20 ml con tappo. Le bottiglie devono essere adeguatamente etichettate con il nome dei composti, la data miscelata, la data di scadenza, il numero di lotto di ketamina (in quanto si tratta di una sostanza controllata) e il dosaggio suggerito. La data di scadenza può essere determinata dalla data di scadenza dell'ingrediente (dipende dalle regole / linee guida della struttura / stato). Per una registrazione accurata della ketamina, sia la bottiglia vuota che la bottiglia piena devono essere pesate. Quindi, i pesi devono essere registrati sull'etichetta della miscela e sul singolo foglio di registro della sostanza controllata che viene preparato per ogni bottiglia. Conservare le miscele di ketamina in un'area buia e a temperatura controllata per mantenere la potenza.
3. Valutazione dell'anestesia
La profondità anestetica può essere valutata testando la risposta a vari stimoli. Il movimento volontario deriverà da stimoli fisici del corpo. Vedere la Tabella 1 per un elenco dei metodi fisici utilizzati per la valutazione della profondità anestetica.
| Metodo | Procedimento | Risposta |
| Pizzicamento della dita dei dita dei | Estendere la gamba e isolare la cinghia tra le dita dei piedi. Quest'area viene saldamente pizzicata usando le unghie o la pinza atraumatica. | Un riflesso positivo è indicato dalla retrazione della gamba o dal ritiro del piede. L'animale non è su un piano chirurgico di anestesia se c'è movimento della gamba o del corpo, vocalizzazione o marcato aumento delle respirazioni. |
| Pizzico di coda | La punta della coda viene pizzicata usando le dita o la pinna atraumatica. | Una reazione positiva è indicata da contrazioni o movimenti della coda. L'animale non è su un piano chirurgico di anestesia se c'è movimento della coda, vocalizzazione o marcato aumento delle respirazioni. |
| Pizzico all'orecchio | Usando le dita o la pinna atraumatica, pizzicare la punta della pinna. | Una reazione positiva è scuotere la testa o il movimento dei baffi in avanti. Se c'è movimento della testa, baffi, vocalizzazione o marcato aumento delle respirazioni, l'animale non è su un piano chirurgico di anestesia. |
| Riflesso palpebrale | Usando la punta delle dita, toccare il canthus mediale (angolo interno) dell'occhio. | Un riflesso positivo è indicato da un battito di ciglia in risposta al tocco delle palpebre. Se c'è movimento delle palpebre, baffi o marcato aumento delle respirazioni, l'animale non è su un piano chirurgico di anestesia. |
| Riflesso corneale | Utilizzando un applicatore con punta di cotone, toccare delicatamente la cornea (bulbo oculare). | Una risposta positiva è indicata da un battito di ciglia. Se c'è movimento delle palpebre, baffi o marcato aumento delle respirazioni, l'animale non si trova su un piano sufficientemente profondo di anestesia chirurgica. |
Tabella 1. Metodi di stimoli fisici per la valutazione della profondità anestetica. 2
Dovrebbero essere utilizzati anche indicatori fisiologici come frequenza cardiaca, frequenza respiratoria, pressione sanguigna, colore delle mucose e tempo di ricarica capillare. Mentre le osservazioni generali possono essere utili per rilevare i cambiamenti nella frequenza respiratoria degli animali, per utilizzare la frequenza cardiaca o la pressione sanguigna per la valutazione della profondità, sono necessarie attrezzature specializzate. Se è disponibile un elettrocardiografo, è possibile misurare la velocità e la forza dei battiti cardiaci. Per misurare la pressione sanguigna, ci sono una varietà di dispositivi che sono montati sopra la coda o anche su tutto il corpo. Gli stimoli fisici descritti nella Tabella 1 causeranno un aumento di tutti e tre questi parametri.
Il colore delle mucose, degli occhi, delle orecchie, della bocca, del naso, dell'ano e, in misura minore, delle zampe e della coda sono osservati per i cambiamenti. Le aree dovrebbero essere rosa, indicando un'adeguata respirazione e funzione cardiaca. Quando l'animale passa all'anestesia allo stadio IV, le respirazioni cessano, con conseguente cianosi - indicata da un colore blu o grigio - alle mucose e alla pelle circostante.
Il tempo di ricarica capillare è definito come la quantità di tempo impiegata affinché il colore ritorni a un letto capillare esterno dopo che è stato sbollentato dall'applicazione di pressione sull'area. Un bastoncino applicatore o un dito viene premuto sulle gengive, sulla pinna o sui letti ungueale degli animali anestetizzati. Il numero di secondi necessari affinché l'area sbollentata ritorni a un colore rosa non deve essere superiore a 1-2 secondi. Un tempo di ricarica prolungato suggerisce una riduzione della frequenza cardiaca o della forza delle contrazioni cardiache, indicando che l'animale potrebbe essere troppo profondamente anestetizzato e vicino alla morte.
È importante utilizzare diversi parametri per valutare la profondità anestetica. L'uso dello stesso dito o orecchio per pizzichi ripetuti desensibilizzerà l'area e la risposta sarà repressa e non fornirà una valutazione accurata della profondità dell'anestetico. Utilizzare siti alternativi per le valutazioni del pizzico delle dita dei dita e dell'orecchio. La profondità dell'anestetico deve essere rivalutata ogni 10-30 minuti durante l'intervento chirurgico. 2
Gli studi hanno dimostrato che ci sono cambiamenti cardiorespiratori in un animale anestetizzato. Mentre anestetizzati con farmaci iniettabili, gli animali sperimentano una frequenza respiratoria stabile; tuttavia, dimostrano variabilità nella gittata cardiaca. La risposta agli anestetici iniettabili è stata segnalata per variare notevolmente tra i diversi ceppi, quindi è difficile standardizzare il dosaggio. 7 Gli agenti inalanti tendono a diminuire la frequenza respiratoria ma hanno un impatto minore sul sistema cardiovascolare. Poiché il dosaggio dell'anestesia inalante è facilmente regolabile per tutta la durata della procedura, è spesso il metodo preferito.
L'induzione e il mantenimento dell'anestesia costituiscono parte integrante delle cure veterinarie degli animali da laboratorio sottoposti a qualsiasi forma di procedura chirurgica. L'obiettivo dell'anestesia è immobilizzare adeguatamente l'animale e alleviare tutte le sensazioni di dolore. Oltre all'induzione, è necessario un monitoraggio preciso e costante per mantenere in sicurezza la corretta profondità dell'anestesia durante tutta la procedura.
In questo video, discuteremo brevemente i livelli di anestesia dei roditori e quale stadio si dovrebbe mirare a raggiungere. Successivamente, esamineremo i diversi metodi di induzione e mantenimento, i vari modi per garantire che l'animale sia sempre nella fase anestetica desiderata e, infine, alcuni esperimenti del mondo reale che prevedono l'uso di diversi anestetici per vari scopi.
Iniziamo discutendo i livelli. Ci sono quattro fasi di anestesia e quattro piani all'interno della fase tre o della fase chirurgica.
Durante la prima fase, l'animale diventa disorientato. La seconda fase è caratterizzata da una frequenza respiratoria irregolare e dalla perdita del riflesso raddrizzante. Nel primo piano del terzo stadio, i riflessi palpebrale e di deglutizione sono assenti. Durante il secondo piano, i riflessi laringei e corneali vengono persi. Fino a questo punto, l'anestetico non ha indotto amnesia o analgesia.
È al terzo piano che l'amnesia e l'analgesia progrediscono da parziali a complete e l'animale viene completamente anestetizzato per una procedura chirurgica. Il piano tre è anche indicato dalla paralisi dei muscoli intercostali, che si traduce in una respirazione diaframmatica che è una respirazione superficiale. Nel piano quattro, l'animale è stato sovradosato e può procedere rapidamente allo stadio quattro, dove c'è una paralisi completa sia dei muscoli intercostali che del diaframma, che può causare arresto respiratorio e infine portare alla morte.
Gli anestetici sono disponibili come inalanti o iniettabili e un veterinario deve decidere cosa usare per la procedura da eseguire. Questa scelta si basa su numerosi aspetti tra cui: l'entità e la durata della procedura, la specie e il ceppo, l'età e lo stato fisiologico dell'animale.
La classe degli anestetici inalanti comunemente usati comprende composti come l'isoflurano, il sevoflurano e il desflurano. Questi composti consentono un facile controllo della profondità dell'anestesia. Ci sono alcune opzioni di apparecchiature tra cui si può scegliere per somministrare anestetici inalanti.
Una delle scelte è una campana di vetro, che dovrebbe essere utilizzata sotto il cofano - e non sul banco - per evitare l'esposizione del personale ai gas anestetici. Assemblare il barattolo con una piattaforma forata in ceramica o plastica creando uno spazio tra il fondo del barattolo e la piattaforma. Successivamente, indossando guanti impermeabili, saturare un batuffolo di cotone con anestetico e posizionarlo sotto la piattaforma in modo che poggi sul fondo del barattolo. Quindi fissare immediatamente il coperchio per evitare la fuoriuscita del vapore anestetico. Per posizionare l'animale, far scorrere il coperchio da un lato, introdurre l'animale e fissarlo immediatamente. Successivamente, osservare l'attività e la respirazione per determinare la profondità dell'anestesia ed esporre l'animale all'inalante per effetto. Si noti che la piattaforma funge da barriera e impedisce all'animale di entrare in contatto diretto con l'anestetico liquido.
Un'alternativa alla campana di vetro è una camera di induzione utilizzata in combinazione con un vaporizzatore di precisione collegato a un serbatoio di ossigeno. Il primo passo è assicurarsi che il vaporizzatore sia riempito con una quantità adeguata di anestetico liquido. Quindi, controllare il sistema di evacuazione dei gas di scarico. Se si tratta del sistema passivo comunemente usato, pesare il contenitore per determinare se è ancora efficace. Generalmente un aumento di cinquanta grammi rispetto al peso iniziale è il punto in cui si spende la tanica. Il prossimo passo è assemblare la camera di induzione. Assicurarsi che l'ingresso provenga dal vaporizzatore e l'uscita sia al sistema di evacuazione dei gas di scarico.
Per iniziare, posizionare l'animale nella camera di induzione e chiudere il coperchio. Una volta che l'animale è nella camera, avviare prima il flusso di ossigeno alla velocità di 1 litro al minuto, quindi regolare l'impostazione del vaporizzatore di precisione su un livello di induzione del 3-4% per l'isoflurano. Come una campana di vetro, esponi l'animale all'anestetico per effetto. Una volta che l'animale è completamente anestetizzato, sciacquare la camera con l'ossigeno spegnendo l'isoflurano prima di rimuovere delicatamente l'animale. Questo per prevenire l'esposizione del personale ai gas anestetici.
Un altro metodo per l'induzione dell'anestesia è tramite cono nasale o maschera facciale, anch'essi collegati al vaporizzatore di precisione. Tuttavia, poiché i gas anestetici hanno un odore sgradevole, gli animali possono obiettare all'essere mascherati per l'induzione. Inoltre, c'è anche il rischio di causare asfissia a causa di una presa troppo salda. Pertanto, il metodo preferito è quello di utilizzare la scatola di induzione o la campana di vetro per indurre l'anestesia seguita dal mantenimento con il cono del naso. Il più delle volte, l'assemblaggio è tale che il cono e la camera di induzione sono entrambi collegati allo stesso vaporizzatore con una levetta intermedia per commutare l'erogazione del vapore anestetico dalla camera di induzione al cono del naso e viceversa. Dopo aver anestetizzato l'animale nella camera, fissare il suo muso nel cono e azionare la levetta sul tubo per reindirizzare il flusso di gas al cono anteriore. Monitorare la respirazione e, dopo aver verificato che l'animale è rilassato, ridurre l'anestetico a un livello di mantenimento dello 0,5 - 1,5 %. Inoltre, applicare un unguento oftalmico sugli occhi per prevenire l'essiccazione corneale.
Per gli anestetici iniettabili, una miscela di ketamina e altri sedativi o rilassanti muscolari tra cui xilazina e/o acepromazina. Diverse combinazioni possono essere preparate utilizzando questi composti. Vedere il testo seguente per i rapporti di uso comune. Si noti che la ketamina è una sostanza controllata e quindi la quantità utilizzata deve essere annotata nel registro delle droghe controllate e le miscele devono avere i loro registri di sostanze controllate individuali. A seconda della specie, dell'età e dello stato di salute dell'animale, vengono selezionate la miscela e la dose dell'anestetico e la soluzione può essere iniettata per via intraperitoneale o intramuscolare. Di solito, gli anestetici per iniezione e inalazione vengono utilizzati in combinazione per ottenere l'anestesia chirurgica.
Ora che sai come indurre l'anestesia, impariamo a conoscere la valutazione della profondità dell'anestesia, che è importante monitorare ogni 10-30 minuti per assicurarsi che l'animale non venga danneggiato durante la procedura. Esistono diversi metodi per farlo nei roditori.
Un metodo comunemente usato è il pizzicamento delle dita. Estendi la zampa dell'animale e isola la fettuccia tra le dita dei piedi. Quindi pizzica con decisione l'area usando le unghie o una pinza atraumatica. Un riflesso positivo è indicato dalla retrazione della gamba o dal ritiro del piede. Un altro metodo è il pizzicamento della coda eseguito sulla punta della coda. Una reazione positiva è dimostrata da contrazioni o movimenti della coda. Puoi anche pizzicare la punta del padiglione auricolare e, se c'è uno scuotimento della testa o il movimento dei baffi in avanti, l'animale non si trova sul piano chirurgico dell'anestesia.
Per controllare la profondità dell'anestesia, si può anche toccare il canto mediale o l'angolo interno dell'occhio per suscitare il riflesso palpebrale, indicato da un battito di ciglia in risposta al tocco delle palpebre. Anche se c'è movimento delle palpebre, dei baffi o un marcato aumento della respirazione, l'animale non si trova sul piano chirurgico dell'anestesia.
Infine, si può controllare il riflesso corneale toccando la cornea con un dito guantato o un applicatore con punta di cotone. Una risposta positiva è indicata da un lampeggio.
È importante alternare i siti per valutare la profondità dell'anestetico. L'uso dello stesso dito o orecchio per pizzichi ripetuti desensibilizzerà l'area e la risposta sarà repressa e non fornirà una valutazione accurata della profondità dell'anestetico.
Oltre a questi metodi di valutazione degli stimoli fisici, è necessario monitorare anche gli indicatori fisiologici tra cui la frequenza cardiaca, la frequenza respiratoria, la pressione sanguigna, il colore delle mucose e il tempo di riempimento dei capillari. Mentre le osservazioni generali possono essere utili per rilevare i cambiamenti nella frequenza respiratoria, per utilizzare la frequenza cardiaca per la valutazione della profondità, possono essere utilizzate apparecchiature specializzate come l'elettrocardiografo. Per misurare la pressione sanguigna, ci sono una varietà di dispositivi che possono essere montati sulla coda o anche su tutto il corpo. Anche il colore delle mucose, degli occhi, delle orecchie, della bocca, del naso, dell'ano, delle zampe e della coda può indicare la profondità dell'anestesia. Queste aree dovrebbero essere rosa, suggerendo una respirazione e una frequenza cardiaca adeguate.
Per controllare il tempo di ricarica capillare, premere sul padiglione auricolare degli animali anestetizzati e contare il numero di secondi necessari affinché l'area sbollentata torni a un colore rosa. Questo non deve essere più di 1 o 2 secondi. Un tempo di ricarica prolungato suggerisce una riduzione della frequenza cardiaca o della forza della contrazione cardiaca, indicando che l'animale potrebbe essere troppo profondamente anestetizzato e vicino alla morte. Dopo aver rimosso l'animale dall'anestesia, non deve essere riportato nella struttura di stabulazione fino a quando non si è ripreso dall'anestesia, a meno che non sia continuamente monitorato nell'area di stabulazione.
Ora che abbiamo appreso i principi e le procedure dell'induzione e del mantenimento dell'anestesia dei roditori, diamo un'occhiata ad alcune delle frequenti applicazioni degli anestetici nella ricerca biomedica di oggi.
Probabilmente l'uso più comune dell'anestesia dei roditori è prima e durante l'intervento chirurgico. Ad esempio, qui i ricercatori volevano sviluppare un modello di ictus causato dalla formazione di coaguli nel cervello. Per raggiungere questo obiettivo, hanno indotto l'anestesia nei topi e poi hanno perforato il cranio per creare una finestra sottile. E mentre l'animale era ancora sedato, questi scienziati hanno iniettato un colorante fotosensibile nella circolazione. Successivamente, hanno indotto la fotoattivazione con l'aiuto di un laser attraverso il cranio perforato per causare la formazione di un coagulo nel sistema vascolare cranico.
Un altro caso in cui è necessaria l'anestesia dei roditori è l'esecuzione di analisi fisiologiche. Ad esempio, gli scienziati usano spesso elettrodi ECG su animali anestetizzati per monitorare l'attività cardiaca. Oppure usano sonde a ultrasuoni per determinare la velocità di movimento del diaframma per quantificare in modo più accurato la frequenza respiratoria.
Infine, l'uso dell'anestesia è obbligatorio quando si eseguono esperimenti di sopravvivenza in utero. Ad esempio, l'elettroporazione in utero -- un metodo in cui una femmina incinta viene anestetizzata, viene praticata un'incisione per esporre gli embrioni in via di sviluppo e vengono utilizzati elettrodi per indurre l'assorbimento cellulare embrionale del materiale genetico iniettato.
Hai appena visto il video di JoVE sulla somministrazione e la manutenzione dell'anestesia. Poiché l'anestesia dei roditori facilita l'esecuzione di una così vasta gamma di esperimenti biologici, è imperativo che ogni scienziato possieda l'abilità di indurre e mantenere la corretta profondità dell'anestetico durante un esperimento. Come sempre, grazie per la visione!
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Chapters in this video
0:15
Overview
1:10
Levels of Anesthesia
2:49
Anesthesia Induction Procedures: Inhalation and Injection
8:25
Anesthetic Depth Assessment
11:55
Applications
13:34
Summary
Videos from this collection: