Name: Generazione di Human CD40 delle cellule B attivate (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-10-16T23:30:00.000+00:00
Duration: 13 min 27 s
Description: Impara a generare cellule B attivate da CD40 umane da PBMC per studi di immunologia. Questo metodo esplora le funzioni anticorpali-indipendenti delle cellule B e il loro ruolo nella presentazione dell'antigene.

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Il protocollo per la generazione di umani CD40 delle cellule B attivate da PBMC è diviso in due parti: la parte A dimostra la preparazione di ligando CD40 esprimere NIH/3T3 celle, che sarà usato come piatto legato cellule nutrici. Parte B descrive l&#39;attuale B CD40-cultura. A. Preparazione di cellule di alimentazione (tCD40L NIH/3T3) Il NIH/3T3 tCD40L è un aderente murino linea cellulare di fibroblasti, che non dovrebbe mai diventare completamente confluenti. Le cellule sono quindi suddivisi due volte alla settimana. Coltura per più di 6 settimane non è raccomandato. <ol><li> Rimuovere medio vecchio dalla coltura primaria con una pipetta sterile e lavare le cellule con 10 ml di PBS 1x. Aspirare il PBS dopo il lavaggio. </li><li> Aggiungere 4 ml di tripsina / EDTA in un centimetro 75 2 fiasco per 5-10 minuti a 37 ° C. Usa picchiettando leggermente per staccare le cellule. </li><li> Aggiungere 10 ml di medium di tipo selvatico e girevole con delicatezza. </li><li> Trasferire la sospensione cellulare in un tubo da 50 ml con una pipetta sterile e girare le celle in basso a 225 xg per 5 min. </li><li> Rimuovere il supernatante e risospendere il pellet in 10 ml di medium di tipo selvatico. Contare il numero di cellulare di una aliquota della sospensione cellulare e preparare tre da 50 mL con il numero appropriato di cellule: <ol><li> 1,5 x 10 6 cellule per subcolture </li><li> 0,2 x 10 6 cellule / pozzetto di irradiazione utilizzate nel CD40-B colture cellulari </li><li> resto di congelare (se necessario). </li></ol></li><li> Spin le cellule verso il basso a 225 xg per 5 min. </li><li> Rimuovere il surnatante. <ol><li> Per subcolture: risospendere 1,5 x 10 6 cellule in 10 ml di tipo medio selvatici in un CM 75 2 fiasco coltura cellulare (cellule densità di 1,5 x 10 5 cellule / ml), aggiungere G-418 [0,7 mg / ml] e incubare le cellule a 37 ° C con 5% di CO 2. Dividere le celle due volte alla settimana. </li><li> Per la B CD40-coltura cellulare: Avete bisogno di 1,2 x 10 6 cellule per un 6-pozzetti. Risospendere le cellule in terreno di tipo selvatico ad una densità di 0,1 x 10 6 cellule / ml e irradiare li a 78 Gy. Tavola 2 ml di sospensione cellulare in ciascun pozzetto e incubare loro a 37 ° C con 5% di CO 2. Utilizzare questa piastre preparate per la stimolazione delle cellule B quando tCD40L NIH/3T3 cellule sono aderenti (almeno 4 ore: controllare l&#39;aderenza con il microscopio, non aspettare più di 24 ore per iniziare la stimolazione delle cellule B). (Continua con B.) </li></ol></li></ol> B. CD 40-B di coltura cellulare I. Preparazione di PBMC per CD40-stimolazione (giorno 0): Attenzione: prima di continuare a constatare che le cellule feeder siano aderenti. Aggiungere sempre soluzioni fresche di interleuchina-4 e ciclosporina A per il terreno di coltura immediatamente prima dell&#39;uso. <ol><li> Prendete PBMC, fresco o opportunamente scongelati. Risospendere PBMC due volte in 50 mL di PBS 1x di lavarli e spin down prima volta a 265 xg per 7 min e una seconda volta a xg 190 per 7 minuti per eliminare altre cellule. Gettare il surnatante e risospendere le cellule in 20 ml di PBS. Determinare il numero di cellule in una parte aliquota della sospensione cellulare. </li><li> Spin down quantità necessaria di cellule a 225 xg per 5 min. Per un 6-pozzetti 4 x 10 6 cellule / pozzetto sono necessari, quindi 24 x 10 6 cellule per piastra. </li><li> Rimuovere il supernatante e risospendere il PBMC con 1 x 10 6 cellule / ml in B CD40-terreno di coltura fresco integrato con 50 U / mL di interleuchina-4 come un fattore di crescita e di 0,63 mg / ml ciclosporina A per prevenire conseguenza di cellule T (concentrazioni indicati si riferiscono a un mezzo ml di cultura!). </li><li> Rimuovere il surnatante da 6 pozzetti di pre-incubazione piatto con tCD40L NIH/3T3 cellule. </li><li> Lavare l&#39;aderente tCD40L NIH/3T3 cellule con 2 ml di PBS per primo pozzo e in una seconda fase con 2 ml di CD40-B medio di lavaggio. </li><li> Delicatamente aggiungere 4 ml di sospensione PBMC (1 x 10 6 cellule / ml) in ciascun pozzetto della piastra ben 6. </li><li> Incubare le cellule a 37 ° C con 5% di CO 2. </li><li> Il giorno 7, reculture le cellule (Continua al punto 3.2.). </li></ol> II. Ricoltivazione di cellule CD40-B (7 ° giorno e poi ogni 3-4 giorni): <ol><li> Cluster raccolta di cellule CD40-B da 6 pozzetti da risospendere con una pipetta da 10 mL e la piscina in un tubo da 50 ml. </li><li> Spin down a 225 xg per 7 minuti e sostituire completamente il sopranatante con CD40-B medio di lavaggio. Mentre conta la quantità delle cellule di una aliquota, girare la celle in basso a 225 xg per 5 minuti. Risospendere le cellule B CD40-CD40-B in terreno di coltura ad una concentrazione di 1 x 10 6 cellule / ml. </li><li> Aggiungi soluzioni fresche di interleuchina-4 in una concentrazione di 50 U / mL e 0,63 mcg / mL ciclosporina A per la media. </li><li> Rimuovere il surnatante da un 6-pozzetti pre-incubate con tCD40L NIH/3T3 cellule. </li><li> Lavare le cellule aderenti con 2 ml di PBS per primo pozzo e in una seconda fase con 2 ml di CD40-B medio di lavaggio. </li><li&gt; delicatamente aggiungere 4 ml (1 x 10 6 cellule / ml) di sospensione CD40-B in ciascun pozzetto della piastra ben 6. </li><li> Incubare le piastre a 37 ° C con 5% di CO 2. </li><li> Cellule sottocultura di nuovo ogni 3-4 giorni per finire con elevata purezza umano CD40 delle cellule B attivate dopo un totale di 14 giorni. </li></ol> C. Soluzione dei problemi - Che cosa succede se le cellule CD40-B non crescono? <ol><li> Hai controllato di espressione ligando CD40 delle cellule alimentatore? </li><li> La piastra-bound cellule alimentatore utilizzato per la stimolazione non deve essere più di 24 ore? </li><li> È una possibile contaminazione con micoplasma? </li><li> È stata la interleuchina-4 soluzione utilizzata per la supplementazione appena scongelato e aveva l&#39;attività biologica appropriata? </li><li> È stato aggiunto ciclosporina A nella concentrazione giusta? </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1373/1373fig1tmb.jpg" border="0" alt="Figura 1" /> Figura 1. Si prega di <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1373/1373fig1.jpg">cliccare qui</a> per una versione più grande della figura 1. <img src="/files/ftp_upload/1373/1373fig2tmb.jpg" border="0" alt="Figura 2" /> Figura 2. Si prega di <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1373/1373fig2.jpg">cliccare qui</a> per una versione più grande della figura 2.

<ol><li>Schultze, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD40-activated+human+B+cells%3A+an+alternative+source+of+highly+efficient+antigen+presenting+cells+to+generate+autologous+antigen-specific+T+cells+for+adoptive+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">CD40-activated human B cells: an alternative source of highly efficient antigen presenting cells to generate autologous antigen-specific T cells for adoptive immunotherapy.</a> J Clin Invest. 100, 2757-2765 (1997).</li>
<li>Schultze, J. L., Grabbe, S., vonBergwelt-Baildon, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DCs+and+CD40-activated+B+cells%3A+current+and+future+avenues+to+cellular+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Immunol%22%5BJournal%5D)">DCs and CD40-activated B cells: current and future avenues to cellular cancer immunotherapy.</a> Trends Immunol. 25, 659-664 (2004).</li>
<li>Bergwelt-Baildon, M. von <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD40-activated+B+cells+express+full+lymph+node+homing+triad+and+induce+T-cell+chemotaxis%3A+potential+as+cellular+adjuvants%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">CD40-activated B cells express full lymph node homing triad and induce T-cell chemotaxis: potential as cellular adjuvants.</a> Blood. 107, 2786-2789 (2006).</li>
<li>Wiesner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditional+immortalization+of+human+B+cells+by+CD40+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Conditional immortalization of human B cells by CD40 ligation.</a> PLoS ONE. 3, 1464-14 (2008).</li>
<li>Urashima, M., Chauhan, D., Uchiyama, H., Freeman, G. J., Anderson, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD40+ligand+triggered+interleukin-6+secretion+in+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">CD40 ligand triggered interleukin-6 secretion in multiple myeloma.</a> Blood. 85, 1903-1912 (1995).</li>
<li>Lapointe, R., Bellemare-Pelletier, A., Housseau, F., Thibodeau, J., Hwu, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD40-stimulated+B+lymphocytes+pulsed+with+tumor+antigens+are+effective+antigen-presenting+cells+that+can+generate+specific+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">CD40-stimulated B lymphocytes pulsed with tumor antigens are effective antigen-presenting cells that can generate specific T cells.</a> Cancer Res. 63, 2836-2843 (2003).</li>
<li>von Bergwelt-Baildon, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+primary+and+memory+cytotoxic+T+lymphocyte+responses+are+efficiently+induced+by+means+of+CD40-activated+B+cells+as+antigen-presenting+cells%3A+potential+for+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Human primary and memory cytotoxic T lymphocyte responses are efficiently induced by means of CD40-activated B cells as antigen-presenting cells: potential for clinical application.</a> Blood. 99, 3319-3325 (2002).</li>
<li>Kondo, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD40-activated+B+cells+can+be+generated+in+high+number+and+purity+in+cancer+patients%3A+analysis+of+immunogenicity+and+homing+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Immunol%22%5BJournal%5D)">CD40-activated B cells can be generated in high number and purity in cancer patients: analysis of immunogenicity and homing potential.</a> Clin Exp Immunol. 155, 249-256 (2009).</li>
<li>Mason, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA-loaded+CD40-activated+B+cells+stimulate+antigen-specific+T-cell+responses+in+dogs+with+spontaneous+lymphoma%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">RNA-loaded CD40-activated B cells stimulate antigen-specific T-cell responses in dogs with spontaneous lymphoma.</a> Gene Ther. 15, 955-965 (2008).</li>
</ol>

A. Preparazione dei supporti: <table border="1"cellspacing="0"><tbody><tr><td colspan="2"> Alimentatore cellule wild type media </td><td colspan="2"> Alimentatore cellulare medio selezione </td></tr><tr><td> Reagente </td><td> Concentrazione </td><td> Reagente </td><td> Concentrazione </td></tr><tr><td> DMEM-Ham / F12 </td><td></td><td> DMEM-Ham / F12 </td><td></td></tr><tr><td> L-Glutammina </td><td> 365 mg / ml </td><td> L-Glutammina </td><td> 365 mg / ml </td></tr><tr><td> FBS </td><td> 10% </td><td> FBS </td><td> 10% </td></tr><tr><td> HEPES </td><td> 10 mM </td><td> HEPES </td><td> 10 mM </td></tr><tr><td> Gentamicina </td><td> 15 mg / ml </td><td> Gentamicina </td><td> 15 mg / ml </td></tr><tr><td></td><td></td><td> G-418 </td><td> 0,7 mg / ml </td></tr></table><table cellspacing="0" border="1"><tbody><tr><td colspan="2"> CD40-B lavaggio medio </td><td colspan="2"> CD40-B terreno di coltura </td></tr><tr><td> Reagente </td><td> Concentrazione </td><td> Reagente </td><td> Concentrazione </td></tr><tr></tr></tbody><tbody><tr><td> IMDM </td><td> </td><td> IMDM </td><td> </td></tr></tbody><tbody><tr><td> L-Glutammina </td><td> 584 mg / ml </td><td> L-Glutammina </td><td> 584 mg / ml </td></tr></tbody><tbody><tr><td> HEPES </td><td> 25 mM </td><td> HEPES </td><td> 25 mM </td></tr></tbody><tbody><tr><td> Gentamicina </td><td> 15 mg / ml </td><td> Gentamicina </td><td> 15 mg / ml </td></tr></tbody><tbody><tr><td> </td><td> </td><td> rh transferrina </td><td> 50 mg / mL </td></tr></tbody><tbody><tr><td> </td><td> </td><td> L&#39;insulina rh </td><td> 5 mcg / ml </td></tr></tbody><tbody><tr><td> </td><td> </td><td> AB-Humanserum </td><td> 10% </td></tr></tbody></table> B. Varie Reagenti: <table cellspacing="0" border="1"><tbody><tr><td> Reagente </td><td> Azienda </td><td> Il decreto n. </td></tr><tr></tr><tr><td> DMEM / Ham F12 </td><td> PAA </td><td> Cat No: E15-813 </td></tr><tr><td> IMDM </td><td> Invitrogen Gibco ® </td><td> REF 21980-032 </td></tr><tr><td> Dulbecco PBS (10x) </td><td> PAA </td><td> Nessun gatto H15-011 </td></tr><tr><td> AB-siero umano </td><td> Invitrogen </td><td> Nessun gatto 34005100 </td></tr><tr><td> olo-transferrina umana </td><td> Sigma </td><td> Nessun gatto T0665 </td></tr><tr><td> Insulina umana </td><td> Sigma </td><td> Nessun gatto I2643 </td></tr><tr><td> Gencin ® </td><td> Delta Select </td><td> Art. n. 7395800 </td></tr><tr><td> Ricombinante umano interleuchina-4 </td><td> Immunotools </td><td> Nessun gatto 11130045 </td></tr><tr><td> Ciclosporina A </td><td> Novartis </td><td> Nessun gatto NDC 0078-0109-01 </td></tr><tr><td> FBS </td><td> LONZA </td><td> Nessun gatto DE14-802C </td></tr><tr><td> HEPES Buffer </td><td> PAA </td><td> Nessun gatto S11-001 </td></tr><tr><td> G-418 Solfato </td><td> PAA </td><td> Nessun gatto P02-012 </td></tr><tr><td> Tripsina / EDTA (10x) </td><td> Invitrogen Gibco ® </td><td> REF 15400-054 </td></tr></tbody></table> C. Varie Forniture: <table cellspacing="0" border="1"><tbody><tr><td> Reagente </td><td> Azienda </td><td> Il decreto n. </td></tr><tr></tr><tr><td> Puntali sterili </td><td> Sarstedt </td><td></td></tr><tr><td> 6 pozzetti </td><td> NUNC </td><td> Nessun gatto 140675 </td></tr><tr><td> 50mL tubo conico </td><td> BD Falcon ™ </td><td> Nessun gatto 352070 </td></tr><tr><td> Tessuto cultura fiasco </td><td> Sarstedt </td><td> Nessun gatto 83.1813.002 </td></tr></tbody></table>

generazione di human cd40 delle cellule b attivate

Generation of Human CD40-activated B cells

CD40-attivate le cellule B (linfociti B CD40-) sono stati identificati come fonte alternativa di immuno-stimolatorie cellule presentanti l&#39;antigene (APC) per l&#39;immunoterapia del cancro 1-3. Rispetto alle cellule dendritiche (DC), il miglior APC caratterizzato, le cellule CD40-B hanno diverse proprietà distinte biologici e tecnici. Simile alla DC, le cellule B mostrano un aumento dell&#39;espressione di MHC e molecole co-stimolatorie (Fig.1b), mostrano una forte capacità migratoria e presentazione dell&#39;antigene presente in modo efficiente alle cellule T, dopo stimolazione con il ligando dell&#39;interleuchina-4 e CD40 (CD40L). Tuttavia, a differenza di DC immature o mature, le cellule B CD40-esprimono la piena triade nodo homing linfa composto da CD62L, CCR7/CXCR4, e la funzione dei leucociti antigene-1 (LFA1, CD11a/CD18), necessaria per homing di organi linfatici secondari (Fig.1a) 3. Cellule CD40-B può essere generato senza difficoltà da piccolissime quantità di sangue periferico che può essere ulteriormente espanse in vitro di grandi quantità di altamente puri-CD40 delle cellule B (&gt; 10 9 cellule per paziente) da donatori sani e come il cancro pazienti (Fig.1c, d) 1,4. In questo protocollo dimostriamo come ottenere pienamente attivato le cellule B CD40-da PBMC umane. Molecole chiave per la coltura cellulare sono ligando CD40, l&#39;interleuchina-4 (IL-4) e ciclosporina A (CsA), che viene rifornito in un ciclo di 3-4 cultura giorno. Per scopi di laboratorio CD40-stimolazione è fornito da NIH/3T3 cellule che esprimono CD40 ligando ricombinante umano (tCD40L NIH/3T3) 5. Per evitare la contaminazione con le cellule non transfettate, espressione del ligando CD40 umano sulla trasfettate deve essere controllata regolarmente (Fig.2). Dopo 14 giorni CD40-B colture cellulari costituiti da oltre il 95% delle cellule B puro e una espansione del CD40 delle cellule B con più di 65 giorni è spesso possibile senza alcuna perdita di funzione 1, 4. Le cellule B CD40-in modo efficiente raccogliere, trasformare e antigeni presenti alle cellule T 6. Non solo naϊve primo, ma anche di espandere le cellule T di memoria 7,8. CD40-attivate le cellule B possono essere utilizzati per studiare l&#39;attivazione delle cellule B, la differenziazione e la funzione. Inoltre, essi rappresentano uno strumento promettente per la vaccinazione terapeutica o preventiva contro i tumori 9.

In questo video vi presentiamo il<em&gt; Ex vivo</em&gt; Generazione ed espansione dei diritti umani CD40 delle cellule B attivate (CD40-B) dalle cellule mononucleari del sangue periferico (PBMC) attraverso la stimolazione con il ligando CD40 e l&#39;interleuchina-4.

Generazione di Human CD40 delle cellule B attivate

Le cellule B attivate da CD40 (cellule B-CD40) sono state identificate come una fonte alternativa di cellule presentanti l'antigene (APC) immunostimolanti per il cancro...

Ciao, mi chiamo Alexander Shiku Van Hagen. Sono un membro del Laboratorio di Immunologia e Immunologia del Trapianto presso l'Ospedale Universitario di Colonia. In questo video, vi mostreremo come possiamo generare cellule B umane attivate tramite CD40 a partire da cellule mononucleate del sangue periferico.Uno dei principali interessi del nostro laboratorio è lo studio delle funzioni delle cellule B indipendenti dagli anticorpi. Oltre al loro ruolo di produttrici di anticorpi, le cellule B svolgono un'importante funzione come cellule presentanti l'antigene sia in condizioni fisiologiche sia nelle malattie autoimmuni. Dopo l'attivazione, le cellule B possono acquisire potenti capacità di presentazione dell'antigene e di stimolazione immunitaria, in particolare quando vengono attivate tramite CD40.CD40. Le cellule B attivate presentano diversi vantaggi rispetto alle cellule dendritiche. Possono essere facilmente espanse a un costo relativamente basso a partire da piccole quantità di sangue periferico, anche da pazienti affetti da cancro.Ora la nostra studentessa di dottorato, Tanya Leic, e la nostra tecnica LER, vi forniranno un'introduzione passo dopo passo su come generare linfoci

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In questo video, dimostriamo la procedura di CD40-attivazione e l'espansione delle cellule B da splenociti murini di C57BL / 6 topi, che può essere utilizzato come modello di una cellula presentanti l'antigene (APC) per studiare l'induzione di immunità.

Modello murino di CD40-attivazione delle cellule B

Un efficiente sistema di struttura e analisi funzionale di un gene in...

Produzione ricombinante retrovirali e infezione delle cellule B

Questo video mostra un test in vitro per generare cellule dendritiche plasmacitoidi (pDC) da cellule progenitrici linfoidi comuni (CLP). Dopo la co-coltura di CLP purificati con cellule feeder irradiate con γ in presenza del ligando tirosin-chinasi-3 (FL) Fms-like, i CLP si differenziano in pDC non aderenti, la cui presenza è confermata mediante citometria a flusso.

Generazione in vitro di cellule dendritiche plasmacitoidi da progenitori linfoidi comuni

Questo video mostra un test per generare cellule T CD8αβ+ derivate da cellule staminali pluripotenti indotte (iPSC) derivate da cellule T CD8αβ+ specifiche per l'antigene tumorale. Le iPSC antigene-specifiche del tumore vengono coltivate su un monostrato di cellule stromali e differenziate in cellule progenitrici ematopoietiche (HPC). Le HPC sono differenziate in cellule T CD4+ CD8+ doppiamente positive utilizzando un mezzo di differenziazione. Queste cellule vengono quindi stimolate a generare...

Generazione di singole cellule T CD8 positive da cellule staminali pluripotenti indotte

Questo articolo descrive un metodo per la generazione e la propagazione di cloni di cellule T umane che rispondono specificamente a un alloantigene definito. Questo protocollo può essere adattato per la clonazione di cellule T umane specifiche per una varietà di ligandi peptidici-MHC.

Generazione di Human alloantigene-specifiche cellule T da sangue periferico

Qui si descrive un nuovo metodo per generare recettori delle cellule T antigene-specifiche (TCR) accoppiando la TCRα o TCRβ di un TCR esistente, che possiede l'antigene-specificità di interesse, con hemichain complementare del T periferico recettore delle cellule repertorio. I TCR de novo generati conservano antigene-specificità con vari affinità.

Generazione<em&gt; De Novo</em&gt; Antigene-specifici T umana recettori cellulari di trasduzione retrovirale di Centric Hemichain

Qui, dimostriamo come i monociti vengono isolati mediante separazione di biglie magnetiche dalle cellule mononucleate del sangue periferico dopo la centrifugazione in gradiente di densità del sangue umano anticoagulato. Dopo un'incubazione di 5 giorni, i monociti umani vengono differenziati in cellule dendritiche immature e sono pronti per le procedure sperimentali in un contesto non clinico.

Generazione di derivate da monociti cellule dendritiche umane da sangue intero

Descriviamo un metodo per la produzione di anticorpi umani specifici per un antigene di interesse, a partire da rari linfociti B circolanti nel sangue umano. Generazione di questi anticorpi naturali è efficiente e rapido, e gli anticorpi ottenuti in grado di discriminare tra antigeni altamente correlati.

Generazione di anticorpi monoclonali umani discriminante da rari B antigene-specifiche cellule circolanti nel sangue

Utilizzando sistemi di coltura di multi-step, segnaliamo un in vitro delle cellule B al modello di differenziazione delle cellule di plasma.

In Vitro modello di differenziazione delle cellule di memoria umana normale B a plasmacellule longevo

Questo protocollo fornisce un flusso di lavoro semplificato per generare e testare cellule T regolatorie del recettore dell'antigene chimerico umano (CAR Tregs).

Generazione di cellule T regolatorie del recettore dell'antigene chimerico umano

Impara a generare cellule B attivate da CD40 umane da PBMC per studi di immunologia. Questo metodo esplora le funzioni anticorpali-indipendenti delle cellule B e il loro ruolo nella presentazione dell'antigene.

Generazione di Human CD40 delle cellule B attivate

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