Preparazione e utilizzo lesioni Phantom alla pratica Belle biopsie agoaspirazione

Per preparare una lesione fantoccio, tagliare un pezzo di cartone di sei per sei pollici da utilizzare come piastra di base. Coprire la piastra di base con uno strato di sigillante spesso mezzo pollice. Quindi tagliare un pezzo di banana lungo due pollici e mezzo e premere delicatamente nella sigillante.

La banana funge da nucleo della lesione fantasma. Inserire completamente il nucleo nel mastice senza intrappolare bolle d'aria. Coprire il nucleo con un pezzo di pellicola trasparente e modellare una superficie liscia a forma di cupola. Lasciare indurire il supporto di mastice in un luogo caldo dopo che il mastice è diventato rigido e completamente indurito.

Rimuovere la pellicola di plastica e praticare la FNA per acquisire padronanza nel prelievo del campione dal centro della banana ed esercitarsi nella preparazione dello striscio. Sono il dottor Vino della Divisione di Citopatologia del Dipartimento di Anatomia Patologica del Medical College del Wisconsin. E io sono il dottor George Varszegi, borsista in Citopatologia nello stesso dipartimento.

Oggi illustreremo una procedura per preparare una lesione fantoccio al fine di esercitarsi nella competenza nell'esecuzione della FNAV, utilizzando strumenti e materiali semplici e facilmente reperibili. Utilizziamo generalmente questa tecnica per introdurre i fellow in citopatologia e i residenti in anatomia patologica alla procedura finale di biopsia con agoaspirato. Successivamente, durante la loro formazione, i fellow e i residenti affineranno le proprie abilità eseguendo agoaspirati su lesioni clinicamente palpabili sotto la supervisione del personale docente.

Cominciamo. Preparare la lesione simulata uno o due giorni prima della sessione prevista di pratica di FNA (agoaspirato con ago sottile). Prima di iniziare, tenere pronti sul banco un pezzo di cartone, una pistola per sigillante, una banana non sbucciata e della pellicola trasparente.

Il primo passo nella preparazione di una lesione fantoccio è tagliare un pezzo di cartone di sei pollici per sei pollici da utilizzare come piastra di base. Successivamente, tagliare un segmento di banana lungo circa due pollici, che fungerà da nucleo della lesione fantoccio. Una volta pronto il nucleo della lesione fantoccio, prendere una pistola per sigillante e stendere uno strato di sigillante spesso circa mezzo pollice sulla piastra di base.

Premere leggermente il nucleo della lesione simulata nel sigillante umido. Aggiungere ora altro sigillante sopra il nucleo della lesione simulata per incorporarlo completamente. Fare attenzione a non intrappolare bolle d'aria nel sigillante indossando i guanti.

Spalmare manualmente il sigillante sul nucleo della lesione fantoccio per assicurarsi che sia completamente circondato. Coprire ora l'ammasso con un pezzo di pellicola trasparente di 15 x 15 cm e modellare l'ammasso in una forma convessa liscia. Collocare l'ammasso di sigillante in un luogo caldo per farlo indurire da sei a otto ore in più rispetto al tempo di indurimento indicato per la marca specifica di sigillante utilizzata.

Il sigillante si indurisce quando esposto all'aria. È possibile lasciare il mucchio a temperatura ambiente superiore a 60 gradi Fahrenheit oppure incubarlo a 37 gradi Celsius per accelerare l'indurimento. Dopo l'indurimento, il sigillante è rigido e si può facilmente rimuovere la pellicola di plastica.

La lesione simulata per FNA è ora pronta per essere utilizzata nella pratica della procedura di FNA. Ora che avete preparato la lesione simulata e questa si è indurita, potete usarla per esercitarvi nella procedura di FNAB. Qui stiamo utilizzando il raccoglitore di tessuti con valvola funzionante, ma potete usare qualsiasi sistema di FNA in breve tempo.

Il THFB è composto da un ago per perforare il campione, un manicotto dell'ago per raccogliere il materiale aspirato, una siringa per controllare la pressione all'interno del dispositivo e una valvola per collegare e scollegare il manicotto dell'ago dalla siringa. Iniziare preparando l'insieme per FNA con la valvola che collega il manicotto dell'ago alla siringa chiusa. Ora estrarre lo stantuffo della siringa per creare un vuoto all'interno del cilindro della siringa.

Quindi inserire la punta dell'ago nella lesione. Aprire la valvola per collegare il connettore dell'ago al vuoto nella siringa. Il vuoto aspira il materiale dalla lesione all'interno dell'ago e nel connettore dell'ago.

Spostare l'ago avanti e indietro nella lesione per aspirare un campione rappresentativo di componenti cellulari. Mantenendo il vuoto, campionare diverse aree della lesione inserendo l'ago nella lesione in direzioni diverse. Al termine del campionamento, ruotare la valvola per disconnettere il vuoto nel corpo della siringa ed equalizzare la pressione con le condizioni esterne aprendo la valvola.

Successivamente, ruotare la valvola per disconnettere l'esterno e il corpo della siringa. Rimuovere l'ago dalla lesione con la valvola chiusa. Mantenere la valvola chiusa conserva una leggera pressione negativa nell'estremità del connettore e impedisce al campione di defluire nuovamente nella lesione per azione capillare.

Paragonabile al fenomeno della pipettaggio, il campione di tessuto è ora al sicuro all'interno del connettore dell'ago. Dopo aver rimosso l'ago dalla sede, aspirare il contenuto sul vetrino per preparare uno striscio diretto. Una volta depositata una goccia di aspirato sul vetrino, è possibile spargerla utilizzando diversi metodi, a seconda della natura dell'aspirato; di solito si spalma il campione tra due vetrini usando il metodo qui mostrato.

Se un campione effettivo deve essere diluito con sangue, eliminare l'eccesso di sangue inclinando il vetrino prima di posizionare il secondo vetrino sopra. Se il prelievo è prevalentemente una sospensione senza microframmenti, come nei casi di lesioni linfoproliferative, può essere steso utilizzando il metodo a coste, in cui il bordo di un vetrino viene usato per creare una serie di strisci a coste su un altro vetrino, oppure si può utilizzare il metodo di diffusione, in cui un vetrino viene usato per formare un film su un secondo vetrino. Una volta preparati gli strisci, è possibile processarli e fissarli in diversi modi.

Per diversi metodi di colorazione, l'approccio migliore consiste nell'essiccare rapidamente all'aria tutti i preparati entro uno o due minuti. L'essiccazione dei preparati più spessi e umidi può essere accelerata muovendo lateralmente i vetrini nell'aria o, preferibilmente, utilizzando un asciugacapelli o un ventilatore portatile alimentato a batteria. Quando si utilizza un ventilatore, prestare attenzione a evitare l'aerosolizzazione, specialmente nei casi di lesioni che si presume siano infette; una volta essiccati i preparati, colorarli in modo appropriato in base ai propri esperimenti.

Qui stiamo dimostrando la colorazione di uno striscio essiccato all'aria con il colorante D quick, che è uno dei coloranti di Romanowski per i tempi. Seguire le istruzioni del produttore. Riteniamo che l'essiccazione all'aria migliori notevolmente la chiarezza della colorazione, come mostrato in questo esempio di strisci colorati con il metodo Pap.

L'analisi di questi colorazioni iniziali determinerà ulteriori test che si potrebbe desiderare eseguire, come microscopia elettronica selettiva su blocco cellulare, colture microbiologiche o altri. Il corretto completamento dell'aspirazione della lesione simulata permetterà un'adeguata aspirazione del materiale lesionale, in questo caso materiale vegetale pastoso proveniente dalla banana. Questo materiale può essere spalmato su vetrini per esercitarsi nella stesura e nella colorazione.

Abbiamo appena mostrato come preparare una lesione fantoccio per esercitarsi nella competenza della FNAB. Durante l'esecuzione di questo esperimento, è importante ricordare che la lesione fantoccio deve essere preparata almeno 36 ore prima della sessione di valutazione della competenza, poiché il gel sigillante richiede un certo tempo per solidificare. Un altro aspetto fondamentale è l'applicazione e la successiva liberazione del vuoto in una sequenza corretta, al fine di ottenere un campione ottimale durante l'esecuzione della procedura FNAV.

Ecco fatto. Grazie per aver guardato e buona fortuna nella pratica. E grazie mille.