Name: Esecuzione ed elaborazione di FNA anteriore Fat Pad per Amiloide (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-10-30T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 41 s
Description: Impara l'aspirazione con ago fine del grasso sottocutaneo anteriore per diagnosticare l'amiloidosi sistemica. Questa tecnica minimamente invasiva include anestesia locale e elaborazione dei campioni per microscopia elettronica.

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Ringraziamo la signora Bonnie Phetteplace, RN per l&#39;assistenza durante il video graficamente la dimostrazione procedura FNAB.

Introduzione Amiloidosi sistemica è una malattia altamente variabile che fa riferimento alla deposizione extracellulare di proteine ​​diverse che vengono indicate collettivamente come amiloide. Deposizione di queste fibrille amiloidi con beta configurazione pieghettata porta a diverse presentazioni cliniche a seconda degli organi coinvolti. Le manifestazioni più clinicamente rilevanti di amiloidosi sistemiche sono notati quando c'è il coinvolgimento di organi critici come il cuore, il fegato, e / o renali. Storicamente, questi organi coinvolti sarebbero sottoposte a biopsia per dimostrare la presenza di amiloide. Queste procedure moderatamente invasivi effettuato un rischio significativo tra cui emorragia. Aspirazione cuscinetto adiposo è stato poi dimostrato di fornire un metodo affidabile e non invasivo per la rilevazione di amiloide in amiloidosi sistemica 1. Questa procedura è sostanzialmente paragonabile alla liposuzione del grasso sottocutaneo della parete addominale anteriore in anestesia locale per il recupero del tessuto fibroadipose per la valutazione dei depositi di amiloide scarsa in piccole pareti dei vasi sanguigni 2. Il metodo più frequentemente utilizzato per l'identificazione amiloide nel tessuto rimane la caratteristica verde mela modello di birifrangenza visto quando Congo sezioni colorate rosso sono visualizzati al microscopio a luce polarizzata 3. Quando l'aspirazione cuscinetto adiposo viene eseguito, il Congo macchie rosse può essere fatto su entrambi diapositive direttamente macchiate o preparati blocco delle cellule del tessuto adiposo aspirato. Tuttavia, i pazienti in fase iniziale di amiloidosi sono scarsi depositi di amiloide, che riduce notevolmente la sensibilità del Congo sezioni cellula colorata blocco rosso 4,5. Valutazione ultrastrutturale di aspirati cuscinetto adiposo con la microscopia elettronica ha una migliore riproducibilità e sensibilità migliorata 4. Pertanto, si raccomanda di presentare tutti aspirati cuscinetto adiposo sia per la preparazione di un blocco di celle e per l'esecuzione di microscopia elettronica 2. Aspirazione cuscinetto adiposo è un costo relativamente basso e il metodo non invasivo per l'ottenimento di tessuto per la diagnosi amiloidosi sistemica. Questo articolo descrive grasso procedura di aspirazione pad con i dettagli circa l'elaborazione del campione a presentare esemplare sia per colorazione rosso Congo e la valutazione ultrastrutturale al microscopio elettronico. In questo video, dimostriamo questa procedura riproducibile e semplice per recuperare materiale diagnostico ottimale. 1. Esecuzione della FNA anteriore del cuscinetto adiposo A. anestesia del territorio (Figura 1 e 2) <ol><li> Utilizzando tamponi imbevuti di alcool o usato per disinfettare la pelle preferita da una particolare istituzione, pulire la pelle sulla zona quadrante inferiore dell'addome laterale alla linea mediana e sotto l'ombelico (Figura 1). </li><li> Segna una superficie a forma di rombo di circa 2 x 2 pollici, come mostrato nella Figura 1 con un pennarello. </li><li> Aspirare circa 10 ml di lidocaina 1% con un ago da 18G. Collegare un ago 25G 1 ½ pollice alla siringa. Rimuovere l'aria intrappolata toccando la siringa in posizione verticale mentre si tiene premuto lo stantuffo fino a liquido erogato e non siano presenti bolle d'aria. </li><li> Anestetizzare lungo i confini dell'area romboidale già segnato come mostrato nella Figura 2. Iniziare inserendo l'ago 25G appena sotto la pelle nel punto A e spingere l'ago per via sottocutanea al punto X. Tirare indietro lo stantuffo della siringa per assicurare che non si è all'interno di una nave. Poi spingere lentamente lo stantuffo per infiltrarsi fino a 2,5 ml di lidocaina (circa ¼ della lidocaina nella siringa da 10 ml), mentre estrarre l'ago al punto A senza che l'ago esce dalla pelle nel punto A (Figura 2a3). Con l'ago ancora sotto la pelle cambiare la direzione verso il punto Y (Figura 2a4) e spingere l'ago per via sottocutanea al punto Y (Figura 2b1). Come prima, confermano che l'ago non è in un vaso e versare circa 2,5 ml di lidocaina, mentre lentamente ritirando l'ago attraverso il punto A (Figura 2b3 attraverso 2B4). Ripetere i passaggi simili a partire dal punto B e la dispensazione lidocaina sottocutaneo da punti B e B a X a Y (Figura attraverso 2c1 2d4). Prevenire le emorragie dal punge A e B con l'applicazione ditta di pezzi sterile calibro. </li><li> È ora possibile verificare che la zona è anestetizzato da toccano leggermente la pelle all'interno della romboidale anestetizzato da punta / angolo del pezzo di garza di cotone, dal confronto con adiacente la pelle non anestetizzati. </li></ol> B. Esecuzione di aspirazione di grasso pad (Figura 3) (Applicazione della anestesia locale prima della performance di aspirazione cuscinetto adiposo può essere bypassato, a seconda delle preferenze regionali e individuali. Correttamente eseguita procedura FNAB per aspirazione anteriore cuscinetto adiposo può essere completato in un cazzo. Tuttavia, a seconda della soglia del dolore del singolo paziente , le manovre di aghi 18G avanti e indietro per il tessuto grasso sottocutaneo è relativamente distrescantare. Il metodo di anestesia descritto raggiunge qui l'effetto in soli due punture con aghi 25G e scongiura il dolore con una maggiore tolleranza alla procedura.) <ol><li> Montare l'ago 18G 1 ½ pollice su una siringa da 10 ml. Montare la siringa con ago di montaggio nella morsa siringa ("presa FNAB / pistola") per la corretta applicazione e il rilascio del vuoto. </li><li> Inserire la punta dell'ago nel grasso sottocutaneo all'interno dell'area puliti e anestetizzato romboidale (Figura 3a). </li><li> Rientrare completamente lo stantuffo della siringa con l'ago inserito nel tessuto sottocutaneo di generare vuoto (Figura 3b). </li><li> Mantenere il vuoto e manovra l'ago avanti e indietro in direzioni diverse al grasso sottocutaneo (Figura 3c attraverso 3i). Ogni colpo deve essere il più lungo possibile con la lunghezza dell'ago selezionato senza che l'ago esce dalla pelle. Di campionamento massima si ottiene cambiando direzione ad ogni corsa (Figura 3i). E 'importante mantenere la direzione dell'ago tangente alla sierosa e parallela alla superficie della pelle per evitare la puntura della cavità peritoneale. </li><li> Il tessuto fibroadipose si accumula nella siringa. Una volta abbastanza frammenti di tessuto fibroadipose (fino a 1 ml di campione di sangue ricco di frammenti misti) vengono recuperati, rilasciare il vuoto e rimuovere l'ago (figura 3k). </li><li> Hanno il paziente o l'assistente esercitare una pressione decisa sulla zona di procedura con un tampone di garza per evitare stravaso di sangue. </li></ol> 2. Campione di elaborazione <ol><li> Luogo almeno 5-6 frammenti di tessuto fibroadipose in soluzione glutaraldeide per la microscopia elettronica (Figura 4B). </li><li> A seconda del protocollo istituzionale, un paio di strisci di frammenti di tessuto del fibroadipose può essere preparata ripartendoli tra due vetrini (Figura 4A). </li><li> Il materiale rimanente viene lasciato coagulare nella siringa (questo può richiedere 5-7 minuti, a seconda del tempo di coagulazione) (Figura 4C). </li><li> Aspirare formalina al 10% nella siringa in modo che il materiale tessuto coagulato fibroadipose è staccato dalla parete della siringa e variabile libera (Figura 4C2). Togliere lo stantuffo dalla siringa (Figura 4C3) e trasferire il tessuto coagulato fibroadipose nel contenitore di formalina al 10% dalla fine della siringa aperta di fronte alla fine degli ugelli (Figura 4C4). </li><li> Etichettare i contenitori in modo appropriato e presentare la glutaraldeide per la microscopia elettronica e la formalina per H &amp; E sezione e Congo macchia rossa per la valutazione sotto microscopio polarizzatore. Se le sbavature sono preparati, possono essere trattati secondo il protocollo del singolo laboratorio. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Area di essere anestetizzati per FNAB anteriore di cuscinetto adiposo. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Anestesia del territorio. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig3.jpg" alt="Figura 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3. L'esecuzione di FNAB anteriore cuscinetto adiposo. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig4.jpg" alt="Figura 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 4"> Figura 4. Trattamento dei anteriore cuscinetto adiposo aspirato da sottoporre al laboratorio per la rilevazione di depositi di amiloide. 3. Rappresentante Risultati <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig5.jpg" alt="Figura 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 5"> Figura 5. Amiloide nella parete dei piccoli vasi sanguigni in frammenti di tessuto fibroadipose. Tessuti Fibroadipose è stato elaborato in formalina, inclusi in paraffina, colorate con rosso Congo, ed esaminate dalla polarizzazione microscopio ottico. Amiloide nella parete dei piccoli vasi sanguigni mostra birifrangenza verde mela (freccia bianca). <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig6.jpg" alt="Figura 6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 6"> Figura 6. Tessuto manca amiloidosi. La birifrangenza verde mela è assente nei tessuti di un paziente diverso senza amiloidosi. Birifrangenza blu (freccia bianca) delle fibre di collagene, di solito sono presenti in quasi tutti i campioni. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig7.jpg" alt="Figura 7" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 7"> Figura 7. Fibrille amiloidi in linea con la parete dei vasi sanguigni. Microscopio elettronico di diritto, non ramificati, a caso sparsi 8-10 nm di diametro fibrille formate da amiloide nella parete dei vasi sanguigni.

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La diagnosi di amiloidosi viene ottenuto con una biopsia dei tessuti degli organi colpiti, come il rene, il fegato, e / o del cuore. Questo approccio è ad alto rendimento diagnostico, tuttavia, è invasiva e può essere associata a complicanze tra cui emorragia 2. Rettale, gengivale, e le biopsie del midollo osseo sono stati preferiti per la diagnosi come approccio relativamente meno invasivo in 6,7,8 1960. Aspirazione cuscinetto adiposo addominale è stato segnalato nel 1973 come sicura, minimamente invasiva, procedura semplice e meno costoso per la diagnosi del tessuto di amiloidosi sistemica 1. Tuttavia, i dettagli della procedura e l&#39;approccio al trattamento del campione recuperate non è coerentemente riportato. Questo video e l&#39;articolo descrivere la procedura passo passo. L&#39;approccio per la rilevazione di amiloide in aspirazione cuscinetto adiposo, allo stesso modo, inoltre, non è ben standardizzato con pochi studi a confronto e valutare diversi approcci 1,5,6,7,8. Valutazione dei anteriore aspirati cuscinetto adiposo con colorazione rosso Congo è meno sensibile di riproducibilità tra osservatori più bassi soprattutto nei primi casi di amiloidosi con depositi di amiloide scarsa 5. Immunoistochimica eseguita su formalina fissi incluse in paraffina blocco di celle e sezioni rosso Congo fluorescenza eseguite su prelievi citologici sono stati segnalati per migliorare la sensibilità diagnostica 9,10. La microscopia elettronica migliora la rilevazione e l&#39;identificazione di fibrille amiloidi scarsa nelle pareti piccoli vasi sanguigni nel tessuto fibroadipose di grassi pad aspirati 4, 5. Sulla base di queste informazioni, questo articolo descrive il trattamento del campione per preparare blocchi di celle (per la valutazione del Congo sezioni cellula colorata blocco rosso al microscopio polarizzatore per la diagnostica birifrangenza verde mela e anche per l&#39;immunoistochimica, come indicato) e per la microscopia elettronica. Tuttavia, a seconda dell&#39;approccio scelto per la valutazione del campione per l&#39;amiloide, può essere sottoposto a preparazione striscio citologico, blocco preparazione delle cellule, e di elaborazione per la microscopia elettronica. Alcuni laboratori di eseguire le prove del strisci preparati da frammenti di tessuto aspirato fibroadipose e colorate con rosso Congo per studiare la fluorescenza 10. Generalmente in tarda amiloidosi, la microscopia ottica con microscopio rosso Congo polarizzante può essere sufficiente, tuttavia, nelle prime fasi della malattia colorazione rosso Congo con polarizzazione microscopio su sezioni di blocco di celle è meno sensibile e affidabile per il grasso aspirato pad 4,5,11 . Altre colorazioni speciali comprese Thioflavin T può essere usato con limitazioni simili. Altri approcci per rilevare amiloide includere la valutazione di strisci di amiloide aspirato con microscopia rosso Congo polarizzazione e fluorescenza 10. Nella nostra esperienza questo metodo è meno riproducibile. Valutazione dei vasi sanguigni nel cuscinetto adiposo per l&#39;amiloide da microscopia elettronica supera queste limitazioni 4,11. Un&#39;ulteriore caratterizzazione di amiloide è stata riportata al microscopio immunoelectron 12, tuttavia, questi metodi potrebbero non essere disponibili ampiamente in un non-contesto di cura terziaria. Aghi usati per l&#39;esecuzione di procedure di aspirazione possono essere classificati in base alle loro dimensioni valutare in fine (21-25G), intermedio (18-20G) e grandi (ad esempio-14G) 11. Anteriore aspirazioni cuscinetto adiposo sono stati segnalati per essere eseguita utilizzando indicatori variabile da intermedia (da 18 a 20 G) di multa (da 21 a 22G) 2,10. La maggior parte delle lesioni di massa sono aspirati con aghi calibro più fine (come 25G) per ottenere una buona prelievi citologici con ulteriori passaggi con gauge più ampia (come 18G) per recuperare campione supplementare per i blocchi delle celle. Durante l&#39;aspirazione anteriore cuscinetto adiposo, il tessuto fibroadipose coesa non aspirare bene con aghi più sottili. Bloccare la preparazione delle cellule e la microscopia elettronica sono importanti per la valutazione dei muretti dei vasi sanguigni nel tessuto frammenti fibroadipose nel aspirati grasso. Aghi calibro più ampia (come 18G) sono raccomandati per produrre materiale diagnostico adeguato 2,10. Poiché la procedura è paragonabile alla FNAB convenzionale, aspirazione cuscinetto adiposo viene indicato come FNAB anche se aghi calibro più ampio può essere utilizzato per l&#39;esecuzione di esso 5.

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Safwan S. Jaradeh
instead of:
Safwan S. Jardeh

Erratum: Performing and Processing FNA of Anterior Fat Pad for Amyloid

Tamponi imbevuti di alcool, garze, pennarello, 10 ml siringhe x2, 1% di lidocaina (anestetico locale lidocaina-Se viene utilizzata da sola, provoca una sensazione iniziale bruciore dopo l&#39;instillazione. Questo può essere evitato utilizzando una miscela 1:1 di 1% lidocaina e l&#39;1% di sodio-bi-carbonato), 18 gauge (G) 1 ½ pollici aghi x2 (per l&#39;esecuzione di FNAB), 25G 1 ½ ago pollice (per l&#39;iniezione di anestetico locale), titolare siringa FNA (&quot;pistola&quot;), bendaggio, flacone di glutaraldeide (per microscopia elettronica), e contenitore biopsia di formalina al 10%.

esecuzione ed elaborazione di fna anteriore fat pad per amiloide

Performing and Processing FNA of Anterior Fat Pad for Amyloid

Storicamente, le biopsie del cuore, fegato e reni sono stati eseguiti per dimostrare depositi di amiloide in amiloidosi. Dal momento che la presentazione clinica di questa malattia è così variabile e non specifico, i rischi associati di queste biopsie sono troppo grandi per il rendimento diagnostico. Altri siti che hanno un minor rischio biopsia, come la pelle o gengivale, sono anche relativamente invasivi e costosi. Inoltre, queste biopsie non può sempre avere depositi di amiloide sufficienti per stabilire una diagnosi. Aspirazione cuscinetto adiposo ha dimostrato una buona correlazione clinica a basso costo e morbilità minima. Tuttavia, non ci sono protocolli standardizzati per l&#39;esecuzione di questa procedura o la trasformazione del campione aspirato, che porta a risultati variabili e non riproducibili. La modalità più frequentemente utilizzate per la rilevazione di amiloide nei tessuti è un verde mela birifrangenza sul Congo sezioni rossi colorati con un microscopio polarizzatore. Questa tecnica richiede blocco preparazione delle cellule di materiale aspirato. Sfortunatamente, i pazienti che presentano in fase iniziale di amiloidosi sono minime quantità di amiloide che riduce notevolmente la sensibilità del Congo sezioni cellula colorata blocco rosso di aspirati cuscinetto adiposo. Pertanto, la valutazione ultrastrutturale di aspirati cuscinetto adiposo con la microscopia elettronica deve essere utilizzato, data la sua maggiore sensibilità per il rilevamento di amiloide. Questo articolo illustra una procedura semplice e riproducibile per l&#39;esecuzione di aspirazione anteriore grasso pad per la rilevazione di amiloide utilizzando sia colorazione rosso Congo di sezioni di blocco di celle e la microscopia elettronica per l&#39;identificazione ultrastrutturale.

Aspirazione cuscinetto adiposo è un preferito, l&#39;approccio mini-invasivo di costo e bassa rispetto ad altri metodi per rilevare amiloide per la diagnosi di amiloidosi sistemica. In questo articolo video dimostra uno schema procedurale per l&#39;esecuzione di aspirazione di grasso pad con l&#39;elaborazione appropriata del campione per l&#39;esito diagnostico ottimale.

Esecuzione ed elaborazione di FNA anteriore Fat Pad per Amiloide

Storicamente, le biopsie di cuore, fegato e rene venivano eseguite per dimostrare la presenza di depositi amiloidi nell'amiloidosi. Poiché la presentazione clinica di questa...

Questo video illustra l'aspirazione con ago sottile, la biopsia del cuscinetto adiposo anteriore e una procedura per la preparazione dei campioni bioptici per la microscopia. La zona nell'area quadrante inferiore dell'addome, laterale rispetto alla linea mediana e al di sotto dell'ombelico, viene pulita e un'area di forma romboidale viene delimitata con un pennarello. La zona locale viene anestetizzata e viene eseguita una biopsia del cuscinetto adiposo anteriore mediante aspirazione con ago sottile.Da cinque a sei frammenti di tessuto fibroadiposo vengono trasferiti dalla siringa della biopsia nella soluzione di glutaraldeide, e il materiale rimanente viene lasciato coagulare nella siringa. Viene aspirata nella siringa formalina al 10% e il pistone viene rimosso per trasferire il tessuto fibroadiposo coagulato nella formalina al 10%. Salve, sono la dottoressa Ham del Dipartimento di Anatomia Patologica della Medical College of Wisconsin di Milwaukee.Sono il dottor Parri. Provengo dalla divisione di Disturbi Neoplastici e Malattie Correlate del Medical College of Wisconsin. Oggi illustreremo una procedura per eseguire una biopsia con ago sottile del tessuto adiposo, mediante aspirato, allo scopo di studiare l'amilosiosi AMY.Questo è un protocollo che utilizziamo per prelevare tessuto fibroadiposo dal grasso addominale anteriore al fine di dimostrare ed escludere un'amiloiosi. Cominciamo dunque. Quando viene eseguita correttamente, la biopsia con ago sottile o procedura di aspirato con ago sottile (FNAB) per il prelievo dal cuscinetto adiposo anteriore può essere completata con una sola puntura.Tuttavia, muovere avanti e indietro un ago da 18 gauge nel tessuto adiposo sottocutaneo è relativamente fastidioso. Il metodo di anestetizzazione qui descritto raggiunge l'effetto con sole due punture mediante un ago da 25 gauge, riducendo il dolore e migliorando così la tolleranza alla procedura. Prepararsi alla procedura raccogliendo tutti i materiali necessari, inclusa una miscela uno a uno di lidocaina all'1% e bicarbonato di sodio all'1%, tamponi alcolici, garze, un pennarello indelebile, due siringhe da 10 millilitri, due aghi da 18 gauge lunghi una pollice e mezzo, un ago da 25 gauge lungo una pollice e mezzo, un supporto o pistola per siringa FNA, una benda, un flacone di glutaraldeide per microscopia elettronica e un contenitore per biopsia con formalina al 10%.Utilizzando tamponi alcolici, pulire la cute nell'area del quadrante inferiore dell'addome, laterale rispetto alla linea mediana e al di sotto del marcatore dell'ombelico. Delimitare un'area di forma rotonda di circa cinque centimetri per cinque centimetri con un pennarello. Utilizzando un ago da 18 gauge e una siringa da 10 millilitri, aspirare circa 10 millilitri della soluzione di lidocaina 1% e bicarbonato di sodio 1% da utilizzare come anestetico locale.Sebbene la lidocaina allo 0,9% possa essere utilizzata da sola, il bicarbonato di sodio aggiunto previene la breve sensazione di bruciore iniziale. Dopo l'installazione, staccare la siringa piena di lidocaina dall'ago da 18 gauge ancora inserito nel flacone di lidocaina. Collegare la siringa a un ago da 25 gauge e una lunghezza di un pollice e mezzo, tenendo la siringa in posizione verticale.Premere lo stantuffo e battere leggermente sul corpo della siringa per rimuovere qualsiasi aria intrappolata nella siringa. Anestetizzare lungo i margini della zona roidea. Iniziare inserendo l'ago da 25 gauge appena sotto la pelle nel punto A. Quindi spingere con attenzione l'ago in modo sottocutaneo e tangenziale, parallelamente alla superficie cutanea sovrastante, verso il punto X. Nel punto X, aspirare leggermente lo stantuffo della siringa per accertarsi che l'ago non si trovi all'interno di un vaso sanguigno.Quindi, mentre si ritira l'ago per puntare lentamente, premere lo stantuffo per infiltrare fino a 2,5 millilitri di lidocaina. Non permettere all'ago di uscire dalla pelle. Ora cambiare direzione e spingere l'ago sottocutaneamente verso il punto Y. Come in precedenza, verificare che l'ago non si trovi all'interno di un vaso tirando indietro lo stantuffo della siringa ed erogare fino a 2,5 millilitri di lidocaina mentre si ritira lentamente l'ago attraverso il punto A. Dopo aver rimosso l'ago, prevenire il sanguinamento applicando fermamente garza sterile.Successivamente, partendo dal punto B, ripetere questa procedura somministrando lidocaina per via sottocutanea dal punto X al punto B. Quindi dal punto B al punto Y. Applicare nuovamente una garza per prevenire il sanguinamento. Verificare ora che la zona sia anestetizzata toccando leggermente la pelle all'interno del romboide con l'angolo di un pezzo di cotone e confrontando la sensibilità con quella della pelle adiacente non anestetizzata. Applicare un ago da 18 gauge e un pollice e mezzo a una siringa da 10 millilitri.Montare l'insieme ago della siringa nella pistola con impugnatura per siringa FNAB per facilitare l'applicazione e la rilascio corretti del vuoto. Inserire la punta dell'ago nel tessuto adiposo sottocutaneo all'interno dell'area romboidale pulita e anestetizzata, quindi arretrare completamente lo stantuffo della siringa per generare il vuoto. Mantenendo il vuoto, muovere l'ago avanti e indietro all'interno del tessuto adiposo sottocutaneo.Ogni passata deve essere il più lunga possibile senza permettere che l'ago esca dalla pelle. Il campionamento massimo si ottiene cambiando direzione ad ogni passata. È importante mantenere la direzione dell'ago tangenziale alla sierosa e parallela alla superficie della pelle per evitare la perforazione della cavità peritoneale.Una volta accumulato circa un millilitro di frammenti di tessuto fibroadiposo nella siringa, rilasciare il vuoto e rimuovere l'ago. Chiedere al paziente di applicare una pressione ferma sull'area dell'intervento con una garza per minimizzare l'escavazione sottocutanea di sangue. Il campione può ora essere processato per essere inviato al laboratorio.Per ulteriori analisi, rimuovere l'ago della siringa e trasferire cinque-sei frammenti di tessuto adiposo fibroso nella soluzione di glutaraldeide al 2% attraverso il beccuccio della siringa. Dispensare ulteriori piccoli frammenti di tessuto attraverso il beccuccio della siringa su un vetrino, spargendoli tra due vetrini. Per preparare i preparati, lasciare coagulare il materiale rimanente all'interno della siringa.Questo potrebbe richiedere da cinque a sette minuti. Successivamente, aspirare il formalina al 10% nella siringa in modo che il materiale di tessuto fibroadiposo coagulato si stacchi dalle pareti della siringa e galleggi liberamente. Ora, rimuovere lo stantuffo dalla siringa e trasferire il tessuto fibroadiposo coagulato nel contenitore etichettato con formalina al 10% partendo dall'estremità aperta della siringa opposta all'estremità del beccuccio.I campioni raccolti possono ora essere sottoposti a microscopia elettronica, preparazione di blocco cellulare e inclusione in paraffina oppure a microscopia fluorescente; il tessuto fibroadiposo ottenuto è stato fissato e processato utilizzando il metodo mostrato in questo video ed è stato incluso in paraffina, colorato con rosso Congo ed esaminato mediante microscopia a luce polarizzata. L'amiloide presente nella parete dei piccoli vasi sanguigni nel tessuto fibroadiposo mostra una birifrangenza verde mela, come indicato dalla freccia gialla.Il verde mele per ence è assente nei tessuti di un paziente diverso senza amiloidosi. Il blu per ence indicato dalla testa della freccia gialla delle fibre di collagene è solitamente presente in quasi tutti i campioni. Nella nostra esperienza, questa birifrangenza blu correlata al collagene può risultare difficile da distinguere dalla birifrangenza verde mele dell'amiloide.Questa è una trappola significativa durante l'interpretazione di campioni colorati con Rosso Congo al microscopio polarizzatore. Questa microfotografia elettronica mostra fibrille dritte, non ramificate, disposte in modo casuale, con un diametro di otto-dieci nanometri, compatibili con l'amiloide, all'interno della parete di un vaso sanguigno.Abbiamo appena mostrato come eseguire l'aspirato con ago sottile, biopsia del cuscino adiposo anteriore per amiloide. Quando si esegue questa e altre procedure simili di FNAB, è molto importante applicare e rilasciare il vuoto nella sequenza corretta. Inoltre, per il chiaro timore di entrare nella cavità peritoneale, l'ago non deve mai essere diretto obliquamente.Pertanto, è importante mantenere la direzione dei movimenti avanti e indietro parallela alla pelle nel piano sottocutaneo del tessuto fibroso. Questi sono punti molto importanti. Ecco tutto.Grazie per aver guardato. Grazie mille.

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Questo video descrive una tecnica per colorare gli amiloidi in sezioni di tessuto utilizzando un colorante oligotiofene coniugato luminescente - acido acetico eptamero-formil tiofene, o hFTAA - per l'imaging a fluorescenza. Gli amiloidi sono aggregati proteici anomali ricchi di fogli di β. La loro rilevazione in campioni di tessuto è utile nella diagnosi e nel trattamento delle malattie associate all'amiloide o delle proteinopatie.

Colorazione hFTAA dei depositi di amiloide: una tecnica per visualizzare le fibrille amiloidi utilizzando un colorante a base di oligotiofene per l'imaging a fluorescenza in sezioni di tessuto

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La sostituzione del tessuto muscolare sano con grasso intramuscolare è una caratteristica importante delle malattie e delle condizioni umane. Questo protocollo delinea come visualizzare, visualizzare e quantificare il grasso intramuscolare, consentendo lo studio rigoroso dei meccanismi alla base della formazione di grasso intramuscolare.

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