Nuovo Apparato e metodo per il rinforzo della droga

Questo video dimostra un nuovo approccio allo studio dell'abuso di droghe combinando la tradizionale preferenza condizionata del luogo e le procedure di autosomministrazione. In primo luogo, vengono determinate le preferenze di base per due ambienti operanti distinti. Iniziano quindi le sessioni di autosomministrazione in cui i ratti si autosomministrano la cocaina in uno solo degli ambienti operativi distintivi.

Dopo il condizionamento, viene misurata la quantità di tempo che gli animali scelgono di trascorrere in uno degli ambienti operativi, i cambiamenti di luogo, le preferenze e i tassi di autosomministrazione del farmaco possono quindi essere misurati e correlati. Ciao, sono Allison Fiducia del laboratorio della Dott.ssa Christine Elle presso il College of Pharmacy, la divisione di farmacologia e tossicologia dell'Università del Texas ad Austin. E io sono Christine Elle.

Oggi vorremmo mostrarvi un nuovo apparato che può essere utilizzato in diversi modi per studiare il rinforzo e la dipendenza da farmaci nei ratti. Utilizziamo questa procedura nel nostro laboratorio per studiare gli effetti condizionali dell'autosomministrazione di cocaina. Quindi iniziamo.

Per iniziare i preparativi per gli esperimenti di rinforzo dei farmaci, per prima cosa addestrate i ratti maschi a premere una leva per ottenere una ricompensa in cibo. Successivamente costruire cateteri endovenosi, che verranno utilizzati per l'autosomministrazione del farmaco. I cateteri sono realizzati con cannula in acciaio inossidabile e tubo Celeste e devono essere lavati con metanolo e acqua.

Quindi asciugati all'aria durante la loro preparazione il giorno dell'intervento, bagnali in etanolo al 70%. Quando i cateteri sono completati, i ratti vengono sottoposti a una procedura chirurgica di cateterismo giugulare per consentire l'autosomministrazione del farmaco. Durante gli esperimenti, anestetizzare un ratto con due isis e mezzo al 4% di fluoro.

Successivamente, radere la testa e il torace, disinfettare le aree con la soluzione di Betadine. Quindi posizionarlo su un tampone sterile dopo l'intervento chirurgico. Monitorare il ratto per diverse ore prima di rimetterlo nella colonia animale.

Mantenere la pervietà del catetere mediante lavaggio quotidiano con 0,1 millilitri di soluzione fisiologica allo 0,9%, eparina e mentone per preparare la cocaina utilizzata negli esperimenti, scioglierla in una soluzione salina isotonica nelle concentrazioni di dose appropriate in base al peso degli animali con gli animali e alla somministrazione del farmaco preparata. Diamo un'occhiata all'apparato che viene utilizzato durante gli esperimenti. L'apparato utilizzato durante gli esperimenti è costituito da due camere a leva singola, dotate di luci domestiche e di stimolo, e da tre serie di fasci fotografici, che vengono utilizzati per misurare l'attività locomotoria.

Le camere sono unite tra loro da un vicolo in plexiglass costruito. Il vicolo è composto da due pareti nere con strisce bianche e due pareti metalliche, un piano in plexiglass trasparente e un pavimento in plexiglass bianco. Le due camere operative sono dotate di pavimenti in tondino di griglia in acciaio installati su fondi di gabbie metalliche rimovibili.

Segnali visivi e olfattivi sono posizionati all'interno della camera operativa per creare ambienti unici e distinguibili. In uno degli ambienti, la minaccia avrà accesso alle iniezioni di cocaina. Nell'ambiente alternativo, la minaccia avrà accesso solo alle iniezioni di soluzione salina.

Gli spunti visivi sono costituiti da materiale di feltro bianco o nero attaccato alle pareti anteriore e posteriore e sopra la parte superiore della gabbia. Gli spunti olfattivi sono il senso a base di olio di file o cannella che satura un batuffolo di cotone situato sotto il pavimento dell'asta della camera. Durante gli esperimenti, le risposte di Libra e i dati sull'attività locomotoria vengono registrati con un computer Med Pentium da 100 megahertz dotato di software per PC med.

Ora che abbiamo visto l'apparato sperimentale, vediamo come raccogliere i dati. La procedura sperimentale si svolge nell'arco di più giorni, iniziando con test di preferenza di base della durata di due giorni, seguiti da sessioni di autosomministrazione del farmaco della durata di otto o 16 giorni e terminando con un test di preferenza di luogo condizionato. Per iniziare a raccogliere le misurazioni delle preferenze di base, posizionare il ratto nel vicolo centrale con accesso a entrambe le camere operative per 20 minuti.

Immediatamente dopo aver posizionato il ratto nella camera, attivare contemporaneamente la videocamera, il programma software per PC e il timer. Dopo 20 minuti, rimuovi il ratto dalla camera e rimettilo nella gabbia di casa. Il giorno dopo l'ultimo test di base, iniziare le sessioni di autosomministrazione del farmaco.

Per prima cosa, posiziona i segnali sensoriali e poi posiziona un pannello per bloccare l'accesso dal vicolo centrale in plexiglass alla camera. Ora collega l'ingresso del catetere dell'animale alla siringa del farmaco montata per iniziare la sessione. Per prima cosa, posiziona l'animale nella camera.

Dopo aver chiuso la porta della camera operativa, avviare il programma PC medico e il timer in modo che la cocaina acceda per un'ora. La cocaina viene somministrata utilizzando un programma di rinforzo a rapporto progressivo. Questo programma richiede progressivamente più risposte di leva per ricevere ogni successiva iniezione di cocaina.

Ogni iniezione consiste in una dose di 0,75 milligrammi per chilogrammo a giorni alterni. Nell'ambiente alternativo, il programma del rapporto progressivo viene utilizzato anche per le iniezioni di soluzione fisiologica. Al termine di ogni sessione di autosomministrazione, scollegare l'involucro dal tubo del farmaco, rimuoverlo dalla camera e riporlo nella gabbia di casa.

Il giorno dopo l'ultima sessione di autosomministrazione, eseguire il test di preferenza di luogo condizionato. La procedura per questo test è la stessa delle misurazioni di base. Vediamo ora come valutare e analizzare i dati.

Durante la valutazione dei dati e le assegnazioni dei gruppi ciechi degli sperimentatori, determina la quantità di tempo che l'animale ha trascorso in ciascun compartimento. Lo sperimentatore esamina la videocassetta per contare le entrate e le uscite tra i compartimenti per un periodo di 15 minuti, a partire da cinque minuti dopo il posizionamento all'interno dell'apparato. Le stesse procedure utilizzate per determinare la preferenza di base e i punteggi dei test CPP.

Le differenze tra le misurazioni di base e i punteggi CPP post-condizionamento vengono utilizzate per determinare gli effetti del condizionamento dei farmaci. I punteggi di differenza post-condizionamento vengono calcolati sottraendo la quantità di tempo trascorso nel compartimento accoppiato saliente dalla quantità di tempo trascorso nel compartimento accoppiato del farmaco durante il test CPP. I punteggi di differenza di base sono calcolati in modo simile e sottratti dai punteggi di differenza CPP.

È possibile eseguire analisi statistiche su diverse variazioni di punteggio dal basale alle sessioni di test per determinare gli effetti del condizionamento farmacologico. Qui è mostrato un grafico rappresentativo dei punteggi dei test di base e CPP. I punteggi dei test CPP erano significativamente maggiori dei punteggi basali, indicando una preferenza per l'ambiente della cocaina.

Dopo il condizionamento, l'analisi della correlazione per le risposte totali al congedo per droga e i punteggi dei test di differenza CPP sono illustrati qui. Il gruppo a lungo termine sulla cocaina è stato l'unico gruppo a mostrare una correlazione positiva significativa tra le risposte all'abbandono per droga e i punteggi dei test CPP. Abbiamo appena mostrato come combinare la condizione tradizionale, la preferenza di luogo e i metodi di autosomministrazione per un nuovo approccio allo studio del rinforzo dei farmaci nei ratti.

Quando si esegue questa procedura, è importante mantenere una buona tenuta dei registri. Quindi questo è tutto. Grazie per aver guardato e buona fortuna con i tuoi esperimenti.