Name: Ortotopico Hind-Limb trapianto in topi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-07-12T17:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 3 s
Description: Impara il trapianto ortotopico dell'arto posteriore nel ratto per studiare l'allotrapianto di tessuti compositi. Questo modello esamina ischemia, reinfusione e risposte immunologiche per migliorare la sopravvivenza del trapianto.

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Operazione dei donatori e Hind-Limb Harvest <ol><li> Per la procedura operativa un insieme sterile di strumenti di microchirurgia viene utilizzato. Il chirurgo deve indossare abbigliamento adeguato compresi i guanti sterili, che devono essere modificati prima dell&#39;inizio della procedura chirurgica. </li><li> Il ratto è anestetizzato con un&#39;iniezione intraperitoneale di pentobarbital (IP 50mg/kg) e posto in posizione supina su un campo riscaldato operazione, che facilita una stabile la temperatura corporea degli animali durante tutta la procedura chirurgica. </li><li> Prima incisione cutanea l&#39;depositato di funzionamento è sterilizzata tre volte con entrambi, un disinfettante e alcol. Per evitare che le cornee animali si secchi, gli occhi sono lubrificati con una pomata oftalmica (Vidisic) prima dell&#39;intervento. </li><li> Una incisione cutanea è fatta attraverso l&#39;inguine destro circa a livello del legamento inguinale. I vasi femorali sono sezionati libero con cauterizzazione bipolare e dissezione smussa; rami profondi sono legatura con 8-0 seta. </li><li> 300μl (50 UI) di eparina sono iniettati attraverso la vena del pene per l&#39;anti-coagulazione. </li><li> Vasi femorali sono legatura a livello del legamento inguinale e tagliato distalmente alla legatura. </li><li> L&#39;arto posteriore viene lavata con ghiaccio freddo (4 ° C) soluzione HTK (5ml) attraverso l&#39;arteria femorale più di 5 minuti. </li><li> Tutti i gruppi muscolari sono nettamente divise con le forbici e osteotomia viene eseguita con una sega elettrica a rotazione a livello del terzo distale del femore. </li><li> L&#39;arto raccolto viene poi immerso in 20 mL di soluzione ghiacciata HTK per la conservazione e lo stoccaggio a freddo fino a trapianto. </li></ol> Destinatario di funzionamento e Trapianto <ol><li> Il ratto è anestetizzato con un&#39;iniezione intraperitoneale di pentobarbital e posto in posizione supina sul campo operativo. </li><li> Una incisione cutanea è fatta attraverso l&#39;inguine destro circa a livello del legamento inguinale. I vasi femorali sono sezionati libero con cauterizzazione bipolare e una dissezione smussa. </li><li> Vasi femorali sono legatura distale come possibile, ma in prossimità del decollo nave epigastrico. Pinze vascolari sono collocati a livello del legamento inguinale sulla arteria e vena. </li><li> Un bracciale in polietilene è tirato su l&#39;arteria (diametro interno della cuffia: 0,912 millimetri, bracciale-spessore: 0,010 mm, lunghezza bracciale: 2,0 mm) e la vena (diametro interno della cuffia: 1,151 millimetri; gemelli spessore: 0,010 mm, lunghezza bracciale : 2,0 mm). Il bordo del lume del vaso viene poi tirato con un vaso dilatatore e l&#39;arteria femorale e la vena sono estroflesso su tutto il corpo della cuffia (circa 2 mm) e fissato con una legatura circonferenziale 8-0 seta. </li><li> Per fare spazio per l&#39;arto donatore l&#39;arto destinatario viene rimosso con dissezione acuto di gruppi muscolari e osteotomia viene eseguita a metà del femore. </li><li> L&#39;arto donatore viene rimosso dalla soluzione HTK e il trapianto inizia con osteosintesi del femore con un ago calibro 18 (lunghezza: 1,5-2,0 cm) come una bacchetta intramidollare. </li><li> Gruppi di muscoli ventrali sono strettamente approssimato con Vicryl 4-0 o Prolene punti staccati. </li><li> Anastomosi vascolari vengono eseguite tirando la vena del donatore e l&#39;arteria oltre la vena destinatari e complessa della cuffia. Un circonferenziale 8-0 legatura in seta è di nuovo in grado di assicurare l&#39;anastomosi. </li><li> Il morsetto venoso viene rilasciato seguita dalla pinza arteriosa, e la riperfusione è visualizzato dal ritorno di colore alla distali degli arti e del piede, così come il flusso pulsatile attraverso l&#39;arteria. </li><li> Restanti gruppi muscolari dorsali sono ri-approssimato con Vicryl 4-0 o Prolene punti staccati. </li><li> La pelle è chiusa con Vicryl 4-0 o prolene punti staccati. </li><li> Il ratto destinatario è collocato su una piastra elettrica e strettamente monitorati fino al recupero. </li><li> Animali destinatario ricevere profilassi antibiotica (Cefazolina, 20 mg / die, IM) e Buprenex (0,1 mg / kg, SC) per tre giorni post-trapianto. </li></ol>

<ol><li>Shapiro, R. I., Cerra, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+reimplantation+and+transplantation+of+a+complex+organ%3A+the+rat+hind+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb.</a> J Surg Res. 24 (6), 501-506 (1978).</li>
<li>Petruzzo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+international+registry+on+hand+and+composite+tissue+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The international registry on hand and composite tissue transplantation.</a> Transplantation. 86 (4), 487-492 (2008).</li>
<li>Schneeberger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+forearm+transplantation%3A+outcome+at+3+years%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">First forearm transplantation: outcome at 3 years.</a> Am J Transplant. 7 (7), 1753-1762 (2007).</li>
</ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Decenni di ricerche sperimentali hanno preceduto e permesso di successo il trapianto di mano umana nel recente passato. Nel 1978, Shapiro et al. sviluppato un modello di trapianto ortotopico posteriori degli arti nei ratti, adatto per studiare vari aspetti patologici, fisiologici e immunologici così come risultato funzionale di innesti di tessuto composito. Abbiamo modificato la parte più impegnativa della procedura, vale a dire l&#39;anastomosi vascolari, con l&#39;introduzione di un non-tecnica di sutura della cuffia....

<table><tbody><tr><td>Nembutal&amp;#174;</td><td>OVATION Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eparina Immuno</td><td>Ebewe Pharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Soluzione Custodiol HTK</td><td>Essential Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forbici per avventizia</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;SAS-21 R-8T</td><td></td></tr><tr><td>Pinze</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;JFC-7</td><td></td></tr><tr><td>Pinze dilatatrici</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;D-5AZ</td><td></td></tr><tr><td>Tubi in polimide</td><td>River Tech Medical</td><td>#17; #19</td><td></td></tr></tbody></table>

ortotopico hind-limb trapianto in topi

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

Allotrapianto tessuto composito (CTA) rappresenta oggi una valida opzione terapeutica dopo la perdita di un avambraccio mano, o le cifre ed è diventato un&#39;entità romanzo terapeutico nella chirurgia ricostruttiva. Tuttavia, a lungo termine ad alto dosaggio multi-farmaco terapia immunosoppressiva è necessaria per garantire la sopravvivenza del trapianto, con il rischio di gravi effetti collaterali che cavezza una più ampia applicazione. Ulteriore progressione in questo campo può dipendere da una migliore comprensione di base di immunologia e di ischemia riperfusione in innesti di tessuto composito. Ad oggi, il trapianto ortotopico degli arti posteriori nei ratti è stato preferito il modello roditore per ricostruttiva trapianto (RT), tuttavia, è una procedura estremamente esigente che richiede competenze di microchirurgia straordinario per riattacco di vasi, ossa, muscoli e nervi. Abbiamo introdotto la tecnica di anastomosi vascolari bracciale a questo modello, fornendo un approccio rapido e affidabile per ratto trapianto degli arti posteriori. Questa tecnica semplifica e accorcia la procedura chirurgica e consente ai chirurghi con esperienza di microchirurgia di base per svolgere con successo l&#39;operazione con la sopravvivenza alto e basso tasso di complicanze. La tecnica sembra essere adatto per immunologici e ischemia riperfusione (IRI) studi.

Qui si descrive il ratto ortotopico arti posteriori procedura di trapianto, che sembra essere il gold standard<em&gt; In vivo</emModello&gt; per la ricerca dei tessuti compositi allotrapianto.

Ortotopico Hind-Limb trapianto in topi

L'allotrapianto di tessuto composito (CTA) rappresenta oggi un'opzione terapeutica valida in seguito alla perdita di una mano, dell'avambraccio o delle dita ed è diventato un nuovo...

Sono Robert Suha del Laboratorio di Ricerca Daniels Roski del Dipartimento di Chirurgia Addominale, dei Trapianti e Toracica dell'Università Medica di Innsbrook. Oggi vi mostreremo la procedura del trapianto di arto in modelli animali, introducendo una tecnica con manicotto per la rivascolarizzazione. Questo intervento di trapianto di arto viene eseguito dai nostri chirurghi in formazione, tra cui io stesso.Utilizziamo questo modello animale per studiare le lesioni associate all'ischemia e al ripristino della perfusione in un innesto allotrapiantato di tessuto composito. Inoltre, impieghiamo questa procedura per studiare gli eventi immunologici legati al rigetto dell'innesto allotrapiantato di tessuto composito, nonché le strategie per prevenire tale rigetto. Queste strategie includono la riduzione o persino l'evitamento dell'immunosoppressione di mantenimento mediante l'utilizzo di regimi immunomodulanti mirati.La procedura di trapianto dell'arto posteriore rosso inizia con il prelievo del graft di tessuto composito dal donatore, nel quale l'arto posteriore destro viene rimosso dal ratto donatore e conservato sul ghiaccio. Successivamente, l'arto posteriore destro viene asportato

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Immunology and Infection

Immunologia e Infezioni

Vi presentiamo uno facile da stabilire revisione della classica due-bracciale tecnica di trapianto di fegato nel ratto.

Trapianto di fegato in ratti

Trapianto di fegato nei ratti è un modello sperimentale indispensabile per la ricerca biomedica. Qui vi presentiamo le nostre procedure chirurgiche per il trapianto ortotopico di fegato di ratto con la ricostruzione arteriosa epatica con un trapianto parziale del 50%.

Procedure chirurgiche per un modello di Rat parziale trapianto di fegato con la ricostruzione arteriosa epatica

Questo nuovo modello per il trapianto degli arti posteriori ortotopico nel topo, applicando una tecnica bracciale non sutura per anastomosi super-microvascolare, fornisce un potente strumento per la ricerca in vivo meccanicistica immunologica relative al allotrapianto composito vascolarizzato (VCA).

Ortotopico degli arti posteriori del trapianto di mouse

L'alloinnesto in composito vascolarizzato offre benefici che alterano la vita ai riceventi trapianti, ma le cause biologiche del rigetto del trapianto e della vascolopatia restano poco comprese. Il modello chirurgico del roditore presentato qui offre un modello di trapianto riproducibile e clinicamente rilevante, permettendo ai ricercatori di valutare gli eventi di rigetto e le potenziali strategie terapeutiche per prevenirne l'insorgenza.

Modificato Eterotopic Hindarto Osteomyocutaneo flap modello nel ratto per traslazionale vascolarizzazione composito Allotransplantazione ricerca

Questo protocollo presenta un modello robusto e riproducibile di allotransplant composito vascolarizzato (VCA) orientato allo studio simultaneo dell'immunologia e del recupero funzionale. Il tempo investito in una tecnica meticolosa in un trapianto ortotopico dell'arto posteriore della coscia destra con anastomose vascolari cucite a mano e coaptation neurale produce la capacità di studiare il recupero funzionale.

Fare il passo successivo: un modello di trapianto di arto hind di coaptation neurale per massimizzare il recupero funzionale nel ratto

Descriviamo un modello di trapianto di cuore addominale eterotopico nei ratti, implicando modifiche delle strategie attuali, che portano a un approccio chirurgico semplificato. Inoltre, descriviamo un nuovo modello di rigetto mediante iniezione in-ear di cellule muscolari cardiache vitali, consentendo ulteriori analisi immunologiche dei trapianti nei ratti.

Un modello immunologico per il trapianto di cellule cardiache e cardiache cardiache cardiache cardiache cardiache cardiache

Questo documento presenta un protocollo di trapianto di lembi osteomiocutaneo eterotopico parziale nei ratti e i suoi potenziali risultati nel follow-up a medio termine.

Modello di trapianto parziale di arti posteriori eterotopiche nei ratti

Questo protocollo descrive una tecnica migliorata per il trapianto ortotopico di polmone sinistro nei ratti, concentrandosi sulla riduzione della difficoltà operativa e sul miglioramento dei tassi di sopravvivenza.

Trapianto ortotopico di polmone sinistro nei ratti

Questo protocollo dimostra come eseguire un'amputazione sotto il ginocchio nei ratti e come eseguire immediatamente una reinnervazione muscolare mirata (iTMR) per indagare strategie per trattare e prevenire il dolore correlato all'amputazione e per comprendere meglio i meccanismi dolorosi associati all'amputazione.

Modello di amputazione dell'arto posteriore del ratto sotto il ginocchio e reinnervazione muscolare mirata immediata

Presentiamo un modello murino riproducibile di allotrapianto composito vascolarizzato eterotopo da arto posteriore a collo. Questo protocollo supermicrochirurgico, che prevede anastomosi vasali da 0,3-0,5 mm, integra la guida del filamento di nylon e la cuffia venosa. Fornisce una piattaforma affidabile per studi traslazionali su tolleranza, lesioni ischemiche-reperfusione e meccanismi immunologici nell'allotrapiante composito vascolarizato.

Trapianto eterotopico da arto posteriore a collo nel topo: un modello supermicrochirurgico di allotrapianto composito vascolarizzato

Impara il trapianto ortotopico dell'arto posteriore nel ratto per studiare l'allotrapianto di tessuti compositi. Questo modello esamina ischemia, reinfusione e risposte immunologiche per migliorare la sopravvivenza del trapianto.

Ortotopico Hind-Limb trapianto in topi

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