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pressione del fluido interstiziale o IFP è la forza esercitata dal fluido negli spazi tra le cellule di un tessuto. Innanzitutto, anestetizzare un topo portatore di tumore con isofluorano al 2% miscelato con ossigeno e immobilizzarlo sulla piattaforma robotica per tomografia computerizzata o CT-IFP. Ora, iniettare nella vena laterale della coda di un topo dei liposomi incapsulati con un mezzo di contrasto per visualizzare il tumore. Rimetti l'animale nella sua gabbia e lascialo riprendere.
Tra le 48 e le 72 ore dopo l'iniezione, fissare il topo anestetizzato sulla piattaforma CT-IFP e selezionare alcune posizioni uniformemente distanziate sul tumore per misurare l'IFP. Quindi, lavare l'ago del sistema IFP con una soluzione salina di eparina prima dell'inserimento. Portare l'ago nella posizione selezionata e inserirlo all'interno del tessuto tumorale.
Ora acquisisci le immagini in tutte le posizioni e misura l'IFP utilizzando il software. L'IFP nel tumore è solitamente alto a causa della sua natura densa, dei vasi sanguigni anormali e del sistema linfatico difettoso. Ciò può portare all'accumulo di liposomi nella periferia del tumore. Nel seguente protocollo, dimostreremo la tecnica per misurare l'IFP in un tumore solido.
Per misurare l'IFP, fissare l'animale sulla piattaforma robotica CT-IFP, in modo che il tumore sia immobilizzato e accessibile al sistema robotico CT-IFP. Ottenere una micro TAC anatomica come appena dimostrato, quindi caricare i dati di inserimento pre-ago nel software di allineamento del robot CT-IFP e regolare la finestra e il livello per visualizzare il tumore. Fare clic sul bordo del tumore in qualsiasi immagine, seguito dalla selezione di una seconda posizione del bordo sul lato adiacente del tumore.
Il software calcolerà una serie di posizioni lungo una linea lineare tra i due punti. Quindi seleziona le coordinate x, y e z per una serie di cinque-otto posizioni equidistanti dall'elenco. Quindi lavare l'ago del sistema IFP con una soluzione salina di eparina e inserire le prime posizioni predeterminate dell'ago nelle finestre di coordinate XYZ del software di controllo robot CT-IFP.
Premere il pulsante Vai per spostare il robot nella posizione desiderata. Quindi, per ogni posizione dell'ago a turno, fare clic sul pulsante Inserisci ago per inserire l'ago nel fazzoletto. Pizzicare e rilasciare il tubo PE-20 per confermare una buona comunicazione del fluido tra l'ago IFP e il tessuto e osservare che la misurazione IFP aumenta e ritorna al valore di pre-pizzicamento sul software di acquisizione IFP. Infine, acquisisci una TAC anatomica con l'ago inserito, facendo clic sul pulsante Ritrai ago alla fine della scansione per rimuovere l'ago dal tessuto.
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