Coltura tridimensionale di cellule di carcinoma polmonare: un metodo per studiare le interazioni cellula-matrice

- Innanzitutto, scongelare le fiale della matrice della membrana basale a 4 gradi Celsius durante la notte. La matrice della membrana basale è costituita da proteine presenti nel microambiente tumorale che aiutano a mantenere le caratteristiche delle cellule tumorali in vitro. Il giorno successivo, posizionare la fiala della matrice della membrana basale sul ghiaccio per mantenere la matrice allo stato liquido. Prendi le cellule tumorali del polmone in una provetta da centrifuga pre-raffreddata e centrifuga a 4 gradi Celsius. Aspirare il surnatante e picchiettare delicatamente per rimuovere il pellet e metterlo sul ghiaccio. Quindi, aggiungere un volume appropriato di miscela di membrana basale in questa provetta e mescolare per ottenere una sospensione cellulare uniforme. Eseguire tutti i passaggi a bassa temperatura per evitare che la membrana basale si gelifichi.

Trasferire un volume appropriato di sospensione di matrice cellulare al centro di ciascun pozzetto in una piastra a pozzetti preraffreddata, coprendo l'intero pozzetto. Incubare la piastra a pozzetti per solidificare la matrice. Esaminare al microscopio per garantire una distribuzione uniforme delle cellule all'interno