Preparazione di campioni tumorali inclusi in paraffina fissati in formalina: un protocollo per conservare campioni di tessuto e citologia dal carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC)

- Per iniziare, ottenere campioni di tumore polmonare come campioni di tessuto o come campioni citologici da lavaggi bronchiali, un lavaggio salino contenente cellule dall'interno delle vie aeree. Per preparare i campioni di tessuto, trasferire il tessuto polmonare appena sezionato in una cassetta di inclusione. Fissare e conservare il tessuto con l'opportuna concentrazione di formalina.

Per preparare i campioni citologici, trattare innanzitutto i lavaggi bronchiali con DL-ditiotreitolo per l'omogeneizzazione. Centrifugare e rimuovere il surnatante. Successivamente, trattare con una soluzione mucolitica per liquefare il muco e separare le cellule. Centrifuga per pellettizzare le celle e fissarle con formalina. Trattare le cellule con un reagente adatto per la preparazione del blocco cellulare per concentrare il campione mentre si lavora con piccoli volumi di pellet.

Trasferire il pellet in una cassetta da incasso. Processare entrambi i tipi di campioni disidratandoli attraverso una serie di bagni alcolici graduati. Rimuovere l'alcol utilizzando un detergente appropriato seguito da infiltrazione di cera. Incorporare la cassetta nella cera di paraffina liquida e lasciarla solidificar