Selezione delle cellule di leucemia basata su colonna G-10: un metodo per purificare le cellule di leucemia linfoblastica acuta dalle cellule stromali del midollo osseo

- Per iniziare, aggiungere la tripsina a una piastra contenente cellule leucemiche co-coltivate con cellule stromali del midollo osseo per la dissociazione cellulare. Centrifugare e risospendere il pellet utilizzando un terreno preriscaldato per mantenere la vitalità cellulare. La colonna G-10 contiene perle di destrano reticolate che si gonfiano in acqua per formare una matrice di gel.

Equilibrare la colonna G-10 con mezzi preriscaldati per riempire lo spazio tra le perline, garantendo una lenta elusione dei supporti dalla colonna. Mantenere una temperatura adeguata nella colonna per evitare la formazione di bolle d'aria. Caricare lentamente la miscela di celle sulle perle di gel nella colonna G-10. Incubare le cellule sulla colonna G-10 a temperatura ambiente per la durata desiderata. In base alle caratteristiche e alle dimensioni della superficie cellulare, le perle di gel limitano preferenzialmente le cellule stromali del midollo osseo più grandi, consentendo la separazione delle cellule leucemiche.

Aggiungere il terreno preriscaldato alla colonna e raccogliere la sospensione delle cellule leucemiche. Centrifugare la sospensione cellulare e risospendere il pellet in un tampone