Stimolazione ex vivo delle cellule T nel tumore del pancreas: un metodo per aumentare la produzione di citochine nelle cellule T

- Le cellule T attivate si spostano nel microambiente tumorale del pancreas, dove rilasciano citochine come l'interferone-gamma, o IFN gamma, e il fattore di necrosi tumorale-alfa, o TNF alfa, che aiuta a mediare un'efficace risposta antitumorale. Poiché le citochine si spostano rapidamente fuori dalla cellula T, i livelli intracellulari possono essere non rilevabili. Pertanto, la cellula T richiede una stimolazione per aumentare la produzione di citochine basali per studiare il loro ruolo terapeutico nel tumore.

Inizia prendendo una sospensione di cellule tumorali dal pancreas del topo. Ora, trattare le cellule T presenti in sospensione cellulare con un cocktail di stimolazione delle citochine e incubare la miscela per il tempo desiderato. Questo cocktail facilita il rilascio di ioni calcio dal reticolo endoplasmatico al citoplasma. Alti livelli di calcio, a loro volta, attivano alcuni fattori di trascrizione nucleare, portando ad un aumento della produzione di citochine nelle cellule T.

Successivamente, trattare le cellule con un cocktail di inibitori del trasporto proteico e incubare la provetta. Questo cocktail blocca il trasporto delle citochine dal reticolo endoplasmatico al