Isolamento dei cheratinociti della pelle umana: un metodo per coltivare i cheratinociti primari da campioni di pelle
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0 visualizzazioni • 5:36 min. • April 30th, 2023
- I cheratinociti sono le cellule più importanti presenti nell'epidermide, o lo strato più esterno della pelle. Si dispongono in più strati sopra il derma, associati a vari altri tipi di cellule come melanociti, cellule dendritiche e cellule di Merkel.
Per isolare i cheratinociti, inizia prelevando il tessuto epidermico dalla pelle umana. Successivamente, trattare con un tampone enzimatico per la digestione. Gli enzimi nel tampone degradano le proteine della matrice extracellulare presenti nel tessuto epidermico, avviando così la dissociazione cellulare. Ora, aggiungi un mezzo adatto e disgrega meccanicamente il tessuto.
Per rilasciare le cellule dissociate in sospensione, filtrare la sospensione cellulare epidermica attraverso un colino per rimuovere eventuali grumi o detriti cellulari. Centrifuga per pellettizzare le cellule epidermiche e separarle dal surnatante contenente l'enzima. Rimuovere il surnatante e risospendere le cellule utilizzando un terreno di coltura per cheratinociti preferito. Coltivare le cellule per la durata desiderata.
Durante la coltura, i terreni ottimizzati arricchiscono l'espansione dei cheratinociti promuovendo la loro crescita selettiva rispetto agli a
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