Name: Contrast Imaging nave migliorata utilizzando microCT (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-27T17:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Scopri l'imaging vascolare con microCT a contrasto per analizzare le reti di vasi sanguigni in vivo nei topi. Questa tecnica rapida ed economica supporta la ricerca sullo sviluppo tumorale e le risposte terapeutiche.

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Questo lavoro è stato sostenuto in parte dal premio 5R01CA133229 NSC-03.

1. Iniezioni animali Prima dell'iniezione endovenosa vena della coda, la pelle della coda devono essere puliti con scrub alcool isopropilico per la sterilizzazione. I topi deve essere iniettata con 0,2 g di mL/20 un 20-mg iodio / ml agente di contrasto iodati bloodpool (VIE 160XL, Binito Biomedical, Inc. di Ottawa, ON, Canada) attraverso la vena della coda distale con basso spazio morto ½ CC U -100 28G ½ siringhe da insulina (Product # 329461, Becton Dickinson and Company, New Jersey, USA). 2. Preparazione degli animali Dopo 10 minuti dall'iniezione, gli animali devono essere preparati per microCT imaging. In primo luogo, l'animale deve essere anestetizzato in una scatola con 2% isoflurano in ossigeno al 100% a tasso di 2,5 litri al minuto. Un unguento oculare lubrificante deve essere applicato per prevenire l'essiccamento delle cornee durante l'anestesia. La temperatura corporea deve essere mantenuta a 37 ° C da un pad di calore. 3. MicroCT Imaging I topi allora dovrebbe essere esaminato in una unità microCT in grado di eseguire scansioni di animali vivi. Per ridurre al minimo gli artefatti movimento e stabilità, i topi possono essere inseriti in un normale multi-modalità camera (Numira Biosciences, Salt Lake City, UT), prevedendo per l'aria e di scarico. Per evitare un episodio ipotermico l'animale durante le scansioni microCT, Pads Gel (Hot Brace Crioterapia, CVS Pharmacy Woonsocket, RI), le dita dei piedi caldo (Fabbrica di calore, Vista, CA) o pad argilla Thermipaq (Thermionics, Springfield, IL) può essere utilizzato. Luogo questi pad riscaldamento sotto il letto di schiuma per mantenere il mouse a 37 ° C, evitando il contatto diretto con l'animale. Segni vitali di origine animale come la temperatura corporea, la respirazione e il battito cardiaco devono essere monitorati con il monitoraggio Piccoli Animali e sistemi di colata come SA Instruments (Stony Brook, NY). Il protocollo di imaging seguenti può essere utilizzato come linea guida per determinare i parametri di scansione appropriata per ogni unità microCT. Gli animali utilizzati in questo esperimento sono stati scansionati a 93 micron su una risoluzione CT scanner volumetrico GE eXplore Locus (GE Healthcare, London, Ontario). Questo scanner utilizza un volumetrico x 3500 1750 rivelatore CCD per Feldkamp cone-beam ricostruzione. I parametri piattaforma indipendente dal tempo corrente, tensione e l'esposizione sono state mantenute costanti a 450 μA, 80 KVP e 100 ms, rispettivamente. I parametri standard del tempo di esposizione, cornici per view e il numero di punti di vista può essere variato e potrebbe essere 100 ms, 5-8, e 360-720, rispettivamente con il tempo di scansione totale di circa 20 minuti. Le immagini sono state ricostruite con il software EVSBeam di proprietà del produttore. 4. Immagine di rendering I dati microCT ricostruiti possono essere utilizzati per avanzati isosuperficie, unidimensionale, bidimensionale o trasferire le immagini di rendering Seg3D funzione utilizzando il software di elaborazione delle immagini (Seg3D, <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software</a> ). 5. Rappresentante Risultati Vedere la figura allegata di un mouse tipo selvatico scansione con eXIA160XL con le impostazioni indicato nella sezione metodi. <img src="/files/ftp_upload/2377/2377fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Bidimensionali Transfer Function (2DTF) rendering delle immagini di un mouse tipo selvatico Seg3D creati utilizzando il software di elaborazione delle immagini (Seg3D, <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software</a> ). L'animale è stato iniettato con eXIA160XL e 10 minuti dopo microCT risoluzione di scansione a 93 micron isometrica con le impostazioni menzionati nella sezione metodi. Video 1. Bidimensionali Transfer Function (2DTF) rendering in base a 360 ° film di rotazione di un mouse tipo selvatico Imagevis3D creati utilizzando il software di elaborazione delle immagini (Imagevis3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software). L'animale è stato iniettato con eXIA160XL e 10 minuti dopo microCT risoluzione di scansione a 93 micron isometrica con le impostazioni menzionati nella sezione metodi. <a href="/files/ftp_upload/2377/2377_Suresh_Prajapati_Representative_Results.mov">Clicca qui per vedere il video</a>

<ol><li>Holdsworth, D. W., Thornton, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-CT+in+small+animal+and+specimen+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Micro-CT in small animal and specimen imaging.</a> Trends in Biotechnology. 20, 417-424 (2002).</li>
<li>Kindlmann, G. L., Weinstein, D. M., Jones, G. M., Johnson, C. R., Capecchi, M. R., Keller, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+Vessel+Imaging+by+Computed+Tomography+in+Live+Transgenic+Mouse+Models+for+Human+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Practical Vessel Imaging by Computed Tomography in Live Transgenic Mouse Models for Human Tumors.</a> Molecular Imaging. 4, 417-424 (2005).</li>
</ol>

All procedure di animali sono state condotte secondo le Linee guida per la cura e l&#39;uso di animali da laboratorio e sono stati approvati dalla cura degli animali e del Comitato Istituzionale uso (IACUC) presso l&#39;Università del Texas Health Science Center a San Antonio.

L&#39;obiettivo principale di questa tecnica di imaging nave contrasto maggiore con microCT è di fornire il metodo ottimale per la generazione di set di dati di alta qualità per l&#39;analisi delle reti vascolari in topi vivi. Per microCT imaging, migliore rapporto segnale-rumore dei tessuti molli si ottiene più volte la scansione con aumento del numero di punti di vista e numero di fotogrammi per view 2. Identificazione della nave è criticamente dipendente accurata identificazion...

<table><tbody><tr><td>eXIA 160XL</td><td>Binito Biomedical, Inc.</td><td>eXIA160XL-01</td><td></td></tr></tbody></table>

contrast imaging nave migliorata utilizzando microct

Contrast Enhanced Vessel Imaging using MicroCT

Microscopiche tomografia computerizzata (microCT) offre imaging ad alta risoluzione volumetrica dell&#39;anatomia del vivere piccoli animali. Tuttavia, il contrasto tra diversi tessuti molli e nei liquidi corporei è di per sé povera di micro-CT immagini 1. In queste circostanze, la visualizzazione dei vasi sanguigni diventa un compito quasi impossibile. Per superare questo e per migliorare la visualizzazione dei vasi sanguigni mezzi di contrasto esogeni possono essere utilizzati. Qui, presentiamo una metodologia per la visualizzazione della rete vascolare in un modello di roditore. Utilizzando una lunga durata d&#39;azione acquosa colloidale polidisperse iodati blood-pool mezzo di contrasto, VIE 160XL, abbiamo ottimizzato i parametri di acquisizione delle immagini e del volume-tecniche di rendering per la ricerca di vasi sanguigni di animali vivi. I nostri risultati suggeriscono che, per raggiungere un contrasto superiore tra osso e tessuti molli dalla nave, multiple-frame (almeno 5-8 / frame-per-view), e viste 360-720 (per una completa rotazione di 360 °) le acquisizioni erano obbligatorie. Abbiamo anche dimostrato l&#39;uso di un bidimensionale funzione di trasferimento (voxel dove il colore e l&#39;opacità è stato assegnato in proporzione al valore di CT e la grandezza del gradiente), nel visualizzare l&#39;anatomia e che evidenzino la struttura di interesse, la rete dei vasi sanguigni. Questo promettente lavoro pone le basi per la valutazione qualitativa e quantitativa di studi preclinici anti-angiogenesi utilizzando transgenici o xenotrapianto portatori di tumore nei topi.

Un migliore contrasto di piccole immagini nave sottoprodotti di origine animale microCT è un rapido, conveniente e ad alta velocità per la tecnica seriale<em&gt; In situ</emEsame&gt; per lo sviluppo del tumore, per analizzare la rete di vasi sanguigni che li nutrono, e per aver seguito la risposta del tumore a preclinici intervento terapeutico (s).

Contrast Imaging nave migliorata utilizzando microCT

La tomografia computerizzata microscopica (microCT) offre un'imaging volumetrico ad alta risoluzione dell'anatomia di piccoli animali viventi. Tuttavia, il contrasto tra...

Lo scopo di questa tecnica di imaging vascolare con contrasto mediante tomografia computerizzata microscopica, o micro-TC, è fornire un metodo ottimale per generare set di dati di alta qualità per l'analisi delle reti vascolari in topi vivi. Questo viene ottenuto mediante iniezione endovenosa di un agente di contrasto radio-opaco in vivo. Successivamente, l'animale viene preparato per l'imaging mediante micro-TC inducendo l'anestesia e posizionando stabilmente l'animale in una camera multimodalità per ridurre gli artefatti da movimento durante le scansioni con micro-TC.Dopo le scansioni, i dati di micro-TC vengono ricostruiti e caricati nel software di visualizzazione. L'ultimo passaggio della procedura consiste nell'aggiustare i parametri della funzione di trasferimento bidimensionale per migliorare la visibilità dei vasi sanguigni e assegnare colori diversi a vasi sanguigni, osso e tessuto molle al fine di distinguerli. In definitiva, si possono ottenere risultati che mostrano la rete vascolare in animali vivi mediante imaging con contrasto opaco alla TC e rendering con funzione di trasferimento bidimensionale.Ciao, sono Sue Resh, PJA Patti del Laboratorio di Imaging su Piccoli A

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Visualizzazione dei vasi coronarici è fondamentale per avanzare la nostra comprensione delle malattie cardiovascolari. Qui si descrive un metodo per la perfusione vascolare coronarica murino con una gomma di silicone radiopaco (Microfil), in preparazione per le micro-Tomografia Computerizzata (μCT) imaging.

Perfusione retrograda e riempimento del sistema vascolare coronarico mouse come preparazione per la Micro Computed Tomography Imaging

Fonte: Choi, J. P. et al. Induzione e imaging micro-CT di malformazioni cavernose cerebrali in modello murino. J. Vis. Exp. ( 2017)Questo video dimostra l'uso dell'imaging micro-CT per visualizzare le lesioni della malformazione cavernosa cerebrale (CCM) nel cervello di un topo. Descrive in dettaglio le fasi per la preparazione del campione, l'imaging e la ricostruzione dell'immagine 3D per valutare la densità e la posizione delle lesioni CCM nel tessuto cerebrale.

Imaging micro-CT con mezzo di contrasto di lesioni da malformazione cavernosa cerebrale in un cervello di topo

Questo metodo delinea l'uso della tomografia micro-computerizzata quantistica (MicroCT) per valutare la morfologia cardiaca, la funzione, la perfusione, il metabolismo e la vitalità con l'agente di contrasto iodato nei topi con ischemia miocardica indotta sperimentalmente. La tecnica può essere applicata per l'imaging longitudinale in vivo non distruttivo ad alto rendimento di vari modelli animali di cardiopatia umana.

In Vivo quantitativa valutazione della struttura del miocardio, la funzione, la perfusione e sostenibilità Utilizzando cardiaca micro-tomografia computerizzata

Questo protocollo descrive l'applicazione della tomografia combinata a fluorescenza nel vicino infrarosso (NIRF) imaging e micro-computerizzata (microCT) per la visualizzazione tromboembolie cerebrale. Questa tecnica consente la quantificazione del carico trombotico ed evoluzione. La tecnica di imaging NIRF visualizza fluorescente trombo nel cervello asportato, mentre la tecnica microCT visualizza trombo all'interno gli animali viventi utilizzando oro-nanoparticelle.

Imaging fluorescente combinata vicino infrarosso e la tomografia micro-computerizzata per Direttamente Visualizzazione cerebrale tromboembolie

Questo articolo descrive una metodologia dettagliata dell'utilizzo di una gomma di silicone radiopaco base di piombo per irrorare il vasculature murino per la quantificazione di diametro aortico in un modello murino di aneurisma e dissezione.

Analisi quantitativa di Micro-CT di Aortopathy in un modello murino di indotta da β-aminopropionitrile aneurisma e dissezione

Lo scopo di questa tecnica è la visualizzazione ex vivo delle reti arteriliiche polmonari dei primi topi postnatali e adulti attraverso l'inflazione polmonare e l'iniezione di un composto a base di polimeri radio-opaco attraverso l'arteria polmonare. Vengono inoltre discusse le potenziali applicazioni per i tessuti castati.

Casting vascolare di polmoni di mouse postnatali adulti e precoci per l'imaging Micro-CT

Qui, presentiamo un protocollo per ottenere immagini di micro tomografia computerizzata ad alta risoluzione di cuori interi di mammiferi sani e patologici con miglioramento del contrasto selettivo del collagene.

Tecniche di preparazione dei tessuti per l'imaging micromografico computerizzato con contrasto di modelli cardiaci di mammiferi di grandi dimensioni con malattia cronica

La tomografia micro-computerizzata a doppia colata di resina, o DUCT, consente la visualizzazione, la digitalizzazione e la segmentazione di due sistemi tubolari contemporaneamente per facilitare l'analisi 3D dell'architettura degli organi. DUCT combina l'iniezione ex vivo di due resine radiopace seguita dalla scansione tomografica micro-computerizzata e dalla segmentazione dei dati tomografici.

DUCT: Double Resin Casting seguito da Tomografia Micro-Computerizzata per Analisi 3D del Fegato

Qui, descriviamo un metodo di visualizzazione e quantificazione per i vasi murini degli arti posteriori utilizzando la tomografia computerizzata a micro-raggi X.

Preparazione del campione per la visualizzazione tridimensionale basata sulla tomografia computerizzata dei vasi dell'arto posteriore murino

Utilizzando un modello murino di steatosi epatica non alcolica (NAFLD) indotto dalla dieta, descriviamo l'uso di nuove tecniche di imaging di tomografia microcomputerizzata in vivo come metodo non invasivo per valutare le fasi di progressione della NAFLD, concentrandoci prevalentemente sulla rete vascolare epatica a causa del suo significativo coinvolgimento nella disregolazione epatica correlata alla NAFLD.

Nuove tecniche di imaging con tomografia microcomputerizzata in vivo per valutare la progressione della steatosi epatica non alcolica

In questo protocollo, discutiamo l'implementazione di un modello di trapianto ortotopico di fegato (OLT) di successo nei topi. Inoltre, vengono discussi anche gli adiuvanti per analizzare ulteriormente la pervietà dell'allotrapianto dopo il successo dell'OLT in un topo, in particolare utilizzando scansioni di tomografia microcomputerizzata (microCT).

Trapianto ortotopico di fegato di successo nei topi che utilizzano l'angiografia con tomografia microcomputerizzata

Scopri l'imaging vascolare con microCT a contrasto per analizzare le reti di vasi sanguigni in vivo nei topi. Questa tecnica rapida ed economica supporta la ricerca sullo sviluppo tumorale e le risposte terapeutiche.

Contrast Imaging nave migliorata utilizzando microCT

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