JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:31 min • August 7th, 2025
Prelevare le cellule microgliali murine aderenti in una piastra multipozzetto.
Aggiungere nanoparticelle magnetiche rivestite di acido poliacrilico (MNP) al pozzetto del test, lasciando un altro pozzetto non trattato come controllo.
Incubare le cellule per consentire l'assorbimento di MNP tramite endocitosi, consentendone l'internalizzazione.
Lavare con tampone per rimuovere gli MNP non legati.
Aggiungere una soluzione enzimatica per staccare le cellule.
Trasferire le celle staccate in provette e centrifugare per pellettizzarle.
Scartare il surnatante, risospendere il pellet in terreno basale e trasferire la sospensione in provette per microcentrifuga.
Posizionare i tubi al centro di una bobina di rame all'interno del dispositivo applicatore magnetico.
La bobina genera un campo magnetico alternato (AMF) mentre l'applicatore mantiene costante la temperatura target.
L'AMF interagisce con gli MNP per generare calore, interrompendo le strutture cellulari e innescando le vie di morte cellulare. Al contrario, le celle di controllo senza MNP non mostrano danni termici.
Una diminuzione della vitalità delle cellule trattate con MNP conferma il danno termico dovuto all'ipertermia magnetica.